規制カンジダバイオ フィルムの成長する赤い光で毎日光線
Summary
ここでは、カンジダバイオ フィルムの発育に赤色光アプリケーションの結果を評価するためのプロトコルを提案する.635 nm の波長とエネルギー密度が 87.6 J·cm-2非コヒーレント赤光デバイスは、48 h のカンジダバイオ フィルムの成長を通して適用されました。
Abstract
ここでは、カンジダバイオ フィルムの発育に日当赤光治療の成果を評価するためのプロトコルを提案する.C. アルビカンスSN425 の浮遊性の成長を高めるため、乳酸菌は酵母窒素ベースのメディアに成長しました。バイオ フィルム形成アミノ酸の高濃度を持っている, RPMI 1640 メディアはバイオ フィルムの成長を助けるに適用されました。48 h のバイオ フィルムは、非コヒーレント光デバイスと 1 分の期間の 1 日 2 回を扱われた (赤色光; 波長 = 635 nm; エネルギー密度 = 87.6 J·cm-2)。肯定的な制御 (PC)、0.12% クロルヘキシジン (CHX) が適用されると否定的な制御 (NC)、0.89% 塩化ナトリウムがバイオ フィルムに適用されました。コロニー形成単位 (CFU) 治療後ドライ重量、水溶性と不溶性の細胞外多糖類の定量を行った。簡単に言えば、ここで提示されたプロトコルは、簡単に再現できると赤光治療.後の乾物重と細胞外多糖類量、生存率についての回答を提供します
Introduction
糖尿病、免疫抑制療法のアプリケーション、HIV 感染、エイズの流行、侵襲の臨床的および過去数年間の広域スペクトルの抗生物質消費の発生率の増加は、カンジダの発生率を増加しています。関連疾患1,2。C. albicans感染症一般的バイオ フィルム開発に関連しているし、カンジダ症やカンジダ性敗血症1,2などの全身症状などの臨床症状を引き起こす可能性があります。バイオ フィルムの成長の最も注目すべき病原因子の 1 つは細胞外多糖類マトリックス設立です。既存の抗真菌薬、環境ストレス、ホスト免疫機構3への抵抗を高めるためにバイオ フィルム形成が協力しています。
C. albicansのバイオ フィルムの成長は、基板、基板表面と菌糸の生育酵母の伝播によって後に浮遊性細胞の初期付着によって始まります。バイオ フィルムの成長の最後の段階は、成熟段階、前記酵母のような開発を抑制、菌糸の開発拡大、および細胞外マトリックスを囲むバイオ4です。C. アルビカンスポリサッカライド (EPS) マトリックスの相互マンナン グルカン複合5,6を形成します。細胞外多糖類の相互作用は薬7に対してバイオ フィルムの防衛のために重要です。したがって、 C. albicansの細胞外マトリックスから EPS の削減は口腔カンジダ症コントロールの新しい antibiofilm プロトコルの開発をサポート可能性があります。
光は、成長、開発、およびいくつかの生物8の動作を調節して光線力学的抗菌化学療法 (協定) において、抗菌薬として適用されています。協定は、可視光線の特定の波長と光吸収の光増感剤9を適用されます。ただし、感光でも苦労して、バイオ フィルムを貫通低い有効性10の原因します。完全にバイオ フィルムを浸透させる治療薬の失敗では、バイオ フィルムが時折伝統的な抗菌療法3,5を抵抗です。囲まれた微生物細胞を非アクティブ化、抗菌薬は細胞外のマトリックスを透過する必要があります。それにもかかわらず、EPS、バイオ フィルムにキャリッジのレベルのプロンプトまたは11マトリックス自体に抗菌の応答に影響を与えるそのような分子の拡散障害の特徴です。
協定の欠点を考える自体による光の使用は、貴重な改善として現れます。予備的なデータでは、青色光と 1 日 2 回の治療が EPS 不溶性のミュータンス連鎖球菌バイオ フィルムの生産と有意に抑制したことを明らかにしました。EPS 不溶性の減少、青い光は、バイオ フィルムの成長を減少しました。それにもかかわらず、 C. albicansのバイオ フィルムの赤い光を使った光線療法の結果が不足しています。したがって、この調査の目的は、成長とC. albicansのバイオ フィルムの配置に影響を及ぼす赤色光を使用してどのような方法の光線療法の評価でした。1 日 2 回治療のため我々 が研究室の前のプロトコル9,12生存率についての答えを提供する簡単で再現性のあるバイオ フィルム モデルを提供する適応乾物重および細胞外多糖類赤光治療.後の金額他の治療法をテストするため、同じプロトコルを使用できます。
Protocol
Representative Results
Discussion
C. アルビカンスバイオ フィルムの培養に成功の最も重要な手順は、: 1) 事前接種と 100 mM グルコース; 混じって YNB 培地で接種を行う2) 90 分を待って接着相と二度 0.89% と井戸を慎重に洗うに塩化ナトリウム非付着細胞を削除するには・ 3) RPMI は菌糸の成長を刺激するためにバイオ フィルム形成を開始する付着細胞に RPMI 培地を追加します。C. アルビカンスを培養染色体異常が起?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
本研究開発の博士ポーラ ダ · シルベイラ、博士 Cecília Atem ゴンサルベス デ · アラウージョ コスタ、ショーン ・ m ・ マウレ、シェーン ・ m ・ マウレ、博士・ マルヴィン (名) Janal、博士アントニア Zanin をありがとうございます。我々 も本研究で分析したひずみを寄付するため博士アレクサンダー D. ジョンソン (UCSF) を認めます。
Materials
| Clorhexidine 20% | Sigma-Aldrich | C9394 | |
| Dextrose (D-Glucose) Anhydroous | Fisher Chemical | D16-500 | |
| Ethanol 200 proof | Decon Laboratories | DSP-MD.43 | |
| LumaCare LC-122 A | LumaCare Medical Group, Newport Beach, CA, USA | ||
| NaCl | Fisher Chemical | S641-500 | |
| NaOH | Fisher Bioreagents | BP 359-500 | |
| Phenol 5% | Milipore Sigma | 843984 | |
| RPMI 1640 buffered with 3-(N-morpholino) | Sigma | R7755 | |
| Sabouraud dextrose agar supplemented with chloramphenicol | Acumedia | 7306A | |
| Sulfuric acid | Fisher Chemical | SA200-1 | |
| Yeast nitrogen base | Difco | DF0392-15-9 | |
| 3-(N-morpholino)propanesulfonic acid MOPS | Sigma-Aldrich | M1254 | |
| 24-well polystyrene plate | Falcon | 353935 |
References
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