Летные мельницы являются важными инструментами для сравнения того, как возраст,пол, состояние спаривания, температура или различные другие факторы могут влиять на поведение насекомого. Здесь мы описываем протоколы, чтобы привязывать и измерять склонность к полету и производительность западного кукурузного корневого червя при различных методах лечения.
Западный корневой червь кукурузы, Diabrotica virgifera virgifera (LeConte) (Coleoptera: Chrysomelidae), является экономически важным вредителем кукурузы в северной части Соединенных Штатов. Некоторые популяции разработали устойчивость к стратегиям управления, включая трансгенную кукурузу, которая производит инсектицидные токсины, полученные из бактерии Bacillus thuringiensis (Bt). Знание западного рассеивания корневого червя кукурузы имеет решающее значение для моделей эволюции устойчивости, распространения и смягчения последствий. Поведение насекомого, особенно на большом расстоянии, по своей сути трудно наблюдать и охарактеризовать. Летные мельницы предоставляют средства для непосредственного тестирования развития и физиологических воздействий и последствий полета в лаборатории, которые не могут быть получены в полевых исследованиях. В этом исследовании летные мельницы использовались для измерения времени полетной активности, общего числа полетов, а также расстояния, продолжительности и скорости полетов, выполняемых женскими корневыми червями в течение 22-h испытательного периода. Шестнадцать летных мельниц были размещены в экологической камере с программируемым освещением, температурой и контролем влажности. Описанная летная мельница имеет типичную конструкцию, где рука полета свободно поворачивает сяротку около центрального опоры. Вращение происходит от полета насекомого, привязанного к одному концу летной руки, и каждое вращение записывается датчиком с отметкой времени. Необработанные данные компилируются с помощью программного обеспечения, которое впоследствии обрабатывается для предоставления сводной статистики по параметрам полетов, представляющим интерес. Самой трудной задачей для любого исследования летной мельницы является присоединение троса к насекомому с клеем, и используемый метод должен быть адаптирован к каждому виду. Крепление должно быть достаточно сильным, чтобы держать насекомое в жесткой ориентации и предотвратить отслоение во время движения, не мешая при этом естественному движению крыла во время полета. Процесс вложения требует ловкости, утонченности и скорости, делая видеоматериалы процесса для корневых червей стоимости.
Западный корневой червь кукурузы, Diabrotica virgifera virgifera LeConte (Coleoptera: Chrysomelidae), был определен как вредитель культивируемой кукурузы в 19091. Сегодня, это самый важный вредитель кукурузы(Зея может Л.) в США кукурузный пояс, с личинки кормления на корни кукурузы вызывает большую часть потери урожайности, связанные с этим вредителем. Ежегодные расходы на управление и потери производства кукурузы из-за кукурузы корневой червь, по оценкам, превышает $ 1 млрд2. Западный корневой червь кукурузы очень адаптируется, и популяции развили устойчивость к нескольким стратегиям управления, включая инсектициды, севооборот, и трансгенные bt кукурузы3. Определение пространственных измерений, над которыми должна применяться тактика для смягчения локального развития сопротивления, или точки доступа сопротивления, зависит от лучшего понимания разгона4. Меры по смягчению последствий не будут успешными, если они будут ограничены слишком малым пространственного масштаба вокруг точки доступа сопротивления, потому что устойчивые взрослые будут рассеиваться за пределы зоны смягчения5. Понимание поведения полета западной кукурузы корневой червь имеет важное значение для создания эффективных планов управления устойчивостью для этого вредителя.
Разгон по летом играет важную роль во взрослой западной кукурузы корневого червя истории жизни и экологии6, и поведение полета этого вредителя могут быть изучены в лаборатории. Для измерения поведения полета в лаборатории может использоваться несколько методов. Актограф, ограничивающий полет в вертикальной плоскости, может измерять количество времени, в течение которого насекомое участвует в полете. Актографы были использованы для сравнения продолжительности полета и периодичности моделей западной кукурузы корневого червя мужчин и женщин в разном возрасте, размеры тела, температуры, инсектицидной восприимчивости, и воздействие инсектицидов7,8, 9. Полет туннели, которые состоят из камеры слежения и направленного воздушного потока, особенно полезны для изучения поведения полета насекомых при следовании шлейф запаха, таких как кандидат феромонов компонентов10 или растений летучих11. Летные мельницы, пожалуй, наиболее распространенный метод для лабораторных исследований поведения насекомых полета и может охарактеризовать несколько аспектов летной склонности и производительности. Лабораторные летные мельницы были использованы в исследованиях западного кукурузного корневого червя, чтобы охарактеризовать склонность совершать короткие и устойчивые полеты, а также гормональный контроль устойчивого полета12,13.
Летные мельницы обеспечивают относительно простой способ изучения поведения насекомых в лабораторных условиях, позволяя исследователям измерять различные параметры полета, включая периодичность, скорость, расстояние и продолжительность. Многие из летных мельниц, используемых сегодня, являются производными от кольцевых разбое14 и Крога и Вайс-Фога15. Летные мельницы могут быть разными по форме и размеру, но основной принцип остается прежним. Насекомое привязали и смонтировали на радиальной горизонтальной руке, которая свободно вращается, с минимальным трением, о вертикальном валу. Как насекомое летит вперед, его путь ограничивается кружили в горизонтальной плоскости, с расстоянием, пройденное за вращение продиктовано длина руки. Датчик обычно используется для обнаружения каждого вращения руки, вызванного летной активностью насекомого. Сырые данные включают вращения на единицу времени, и время полета дня произошло. Данные подаются в компьютер для записи. Данные с нескольких летных мельниц часто регистрируются параллельно, по существу одновременно, при этом банки 16 и 32 летных мельниц являются общими. Необработанные данные дополнительно обрабатываются пользовательским программным обеспечением для обеспечения значений для таких переменных, как скорость полета, общее количество отдельных рейсов, расстояние и продолжительность полета и так далее.
Каждый вид насекомых отличается, когда дело доходит до наилучшего метода для привязывания из-за морфологических переменных, таких как общий размер, размер и форма целевой области для крепления троса, мягкость, и гибкость насекомого, необходимость и метод для анестезии, потенциал для загрязнения крыльев и / или головы с неуместным или переполнения клея, и многие, многие другие детали. В случаях визуализированного привязывания plataspid ошибка16 и амброзия жук17, соответствующие целевые области для крепления троса являются относительно большими и прощает неточное размещение клея, потому что голова и крылья несколько хорошо отделены от сайта вложений. Это не преуменьшать сложность привязывая этих насекомых, который требует для любого вида. Но западный кукурузный корневой червь является особенно сложным насекомым, чтобы привязывать: пронотам узкий и короткий, что делает очень точное вложение с минимальным количеством клея (зубной воск в этом случае), необходимых для предотвращения вмешательства в открытие elytra для полета и с головой, где контакт с глазами или антеннами может повлиять на поведение. В то же время, трос аттера должны быть твердо прикреплены, чтобы избежать выбивки этой сильной листовки. Демонстрация привязывания корневого червя взрослых является наиболее важным предложением в этой работе. Это должно быть полезным для тех, кто работает с этим или аналогичными насекомыми, где метод визуализированы здесь может быть полезным вариантом.
В этой статье описаны методы, используемые для эффективного привязки и характеризуют летную активность западных взрослых кукурузных корневого червя, которые были воспитаны при различных личинках плотности. Летные мельницы и программное обеспечение, используемое в этом исследовании(Рисунок 1) были получены из проектов, размещенных в Интернете Джонс и др.18 Привязывая методы были изменены из описания в Stebbing и др.9 Массив 16 летных мельниц был размещены в экологической камере, предназначенной для контроля освещения, влажности и температуры(рисунок 2). Использование этой или аналогичной установки наряду со следующими методами позволяет для тестирования факторов, которые могут повлиять на склонность к полету и производительность западного кукурузного корневого червя, в том числе возраст, пол, температура, фотопериод, и многие другие.
Характеристика западного поведения полета корневого червя кукурузы имеет важное значение для разработки эффективных планов управления сопротивлением. Поведение этого вредителя изучалось в лаборатории с использованием различных методов, включая актографы, летные туннели и летные м?…
The authors have nothing to disclose.
Ассистента выпускника E.Y.Y. была поддержана Национальным научным фондом I/UCRC, Центром технологий управления артроподами под управлением Гранта No. IIP-1338775 и отраслевые партнеры.
Butane multi-purpose lighter | BIC | UXMPFD2DC | To soften wax when tethering |
Clear polystyrene plastic vial (45-ml) | Freund Container and Supply | AS112 | To hold beetle while anesthetizing |
Dehydrated culture media, agar powder | Fisher Scientific | S14153 | To make agar for holding moisture for adults |
Delrin rod (1" diameter, 3.75" long) | Many suppliers: can use cheapest on the internet. | For post of flight mill | |
Dental wax | DenTek | 47701000335 | Adheres wire tether to prothorax |
Ferrite ring magnets (OD: 0.69”, ID: 0.29”, Thickness: 0.118”; 7oz pull) | Magnet Shop | 63B06929118 | Opposing – to generate the float. |
Hall effect sensor | Optikinc | OHN3120U | Look under magnetic sensors on the left side of the Optekinc website then look for the part number. A link is given for current suppliers. |
Hypodermic tubing (22 gauge; 0.0358” OD x 0.01975” ID x 0.004” wall) | Small Parts, Inc. | HTX-22T-12 | Used for flight mill arms and main axis rod. |
Incubator (104.1 x 85.4 x 196.1 cm) | Percival Scientific | I-41VL | |
LabVIEW Full Development System software, system-design platform | National Instruments (See http://www.ni.com/en-us/shop/labview/select-edition.html) | LabVIEW 2018 (Full Edition) | Provides environment needed to run flight mill files (.vi extensions) available for download from Jones et al.18 at http://entomology.tfrec.wsu.edu/VPJ_Lab/Flight-Mill. LabVIEW 2018 Full is compatible with Win/Mac/Linux operating systems. |
Mesh cage (18 x 18 x 18 cm) | MegaView Science Co. Ltd. | BugDorm-4M1515 | mesh size = 44 x 32, 650 µm aperture |
Needle tool | BLICK | 34920-1063 | For scoring soil surface for egg laying in laboratory |
Nickel ring magnets (3/16” OD x 1/16” ID x: 1/16” thick) | K&J Magnetics | R311 | Used to trigger the digital hall effect sensor. |
Petri dish (100 mm x 15 mm) | Fisher Scientific | S33580A | |
Plastic container (44-ml) | Dart | 150PC | For initial rearing of young larvae |
Plastic container (473-ml) | Placon | 22885 | For rearing of older larvae |
Round brush (size 2) | Simply Simmons | 10472906 | For transferring freshly hatched neonates to surface of roots |
Sieve (250-µm) | Fisher Scientific | 08-418-05 | To separate eggs from soil |
Steel wire (28-gauge) | The Hillman Group | 38902350282 | |
Teflon rod (3/8" diameter, 3/4" length) | United States Plastic Corporation | 47503 | To accept the rotating arm. |
Vacuum | Gast Manufacturing, Inc. | 1531-107B-G288X | For aspirating adults in laboratory |
White poly chiffon fabric | Hobby Lobby | 194811 | To prevent escape of larvae from rearing container |