Protocolo de bajo costo de análisis de la huella y colgante caja de prueba para los ratones aplicada la tensión de retención crónica
Summary
El protocolo de bajo costo que consiste en análisis de la huella y colgante caja de prueba después de sistema de seguridad para el estrés es útil para evaluar los trastornos de movimiento del modelo del ratón.
Abstract
Disturbio del paso se observa con frecuencia en pacientes con trastornos del movimiento. En modelos de ratón utilizados para trastornos del movimiento, análisis de la marcha es prueba de comportamiento importante para determinar si los ratones imitan los síntomas de los pacientes. Déficit motor es a menudo inducida por el estrés cuando no fenotipo motor espontáneo se observa en los modelos de ratón. Por lo tanto, el análisis de la marcha siguió por la tensión de carga sería un método sensible para evaluar el fenotipo motor en modelos de ratón. Sin embargo, los investigadores enfrentan la exigencia de un aparato costoso para obtener automáticamente resultados cuantitativos de análisis de la marcha. Para estrés, tensión carga por métodos simples sin aparatos costosos necesarios para la descarga eléctrica y forzado a correr es deseable. Por lo tanto, presentamos un protocolo simple y de bajo costo que consiste en análisis de la huella con tinta y papel colgante caja de prueba para evaluar la función motora, y carga de estrés por restricción con un tubo cónico. El déficit motor de los ratones con éxito fueron detectado por este protocolo.
Introduction
Trastornos del movimiento se definen como alteraciones del sistema nervioso, mostrando un exceso o falta de movimientos voluntarios o automáticos1. En particular, disturbio del paso se documenta con frecuencia entre los pacientes con trastornos de movimiento2,3,4. Por lo tanto, análisis de la marcha es una prueba de comportamiento adecuada para la validación de modelos animales de trastornos del movimiento. En ratones, análisis de la marcha automática se han realizado para caminar a velocidad natural5 y a las velocidades ajustables por cinta de correr6,7. Estos análisis ofrecen resultados cuantitativos de la marcha automáticamente. Un método alternativo para detectar la alteración de la marcha se llama análisis de huella. Después de etiquetar los fondos de los pies con tinta, ratones caminando sobre el papel, y se analizan las huellas. Inicialmente, vaselina y carbón en polvo se utilizaron para visualizar la huella8y luego fueron reemplazados por tinta sobre papel de polígrafo9 y revelador fotográfico papel fotográfico10. Un método más barato y menos tóxico con tinta y el papel que los otros métodos sigue siendo hasta la fecha11. Análisis de la huella es menos costoso en comparación con análisis automatizado5,6,7 y serían útil para evaluar los trastornos del movimiento en modelos de ratón para los investigadores sin fondos de abundante investigación .
El colgante caja de prueba es una clase de cuatro extremidades colgantes pruebas con alambre jaula tapa12 y13de la pantalla de malla de alambre. La caja es un aparato con la tapa de la malla rotativa en la tapa de la caja a lo largo de una barra central. Además de análisis de la marcha, puede se realizar el examen fácilmente y económicamente. Por lo tanto, llevamos a cabo el colgante caja de prueba para evaluar la fuerza de agarre y el equilibrio, además para el análisis de la huella en el presente Protocolo.
El estrés induce los síntomas de trastornos de movimiento14,15. Déficit motor es inducido a menudo por varias tensiones crónicas aun cuando ningún fenotipo motor espontáneo se observa en los modelos de ratón de un desorden de movimiento16,17,18. Moderación es uno de los métodos comúnmente usados para tensión de carga en los ratones, porque el animal no está físicamente dañado19 y costo menos comparado con otros métodos como descargas eléctricas con aparato dedicado y forzado con el uso de una caminadora. Restricción por un tubo, que se realiza en confinamiento de un ratón en un tubo cónico de 50 mL agujereado, es más fácil que otros métodos tales como alambre de malla de tamiz, extremidades con cinta y envoltura de animal con una gasa (ha comentado20). En este artículo, resumimos los protocolos de la huella de análisis y el cuadro del colgante de prueba después de moderación por un tubo. Este protocolo nos ayudaría a utilizar modelos de ratón de trastornos del movimiento sin fenotipo motor espontáneo.
Protocol
Representative Results
Discussion
El análisis de la huella y la caja colgante prueba Test conductual simple y barato para la función motora de los ratones. Los fenotipos de neurobehavioral en varios modelos de ratón han sido correctamente detectados por estas pruebas. Por ejemplo, acortar la longitud de zancada en esclerosis lateral amiotrófica24, mayor longitud de zancada asimétrica en la ataxia-telangiectasia25, mayor longitud de la superposición de la enfermedad de Huntington26</s…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabajo fue apoyado por KAKENHI de JSPS (sociedad japonesa para la promoción de la ciencia) (subvenciones para investigación científica), conceder subsidios de universidades privadas y número 18K 07373 (H.S.).
Materials
| Hanging box | O’hara & Co. | http://ohara-time.co.jp/products/wire-hanging-test/ | |
| Marking pen | ZEBRA | MO-120-MC-BK | |
| Goal box | O’hara & Co. | http://ohara-time.co.jp/products/balanced-beam-test/ | Accessory for apparatus of balanced beam test |
| Boxes | O’hara & Co. | – | Side wall of runway |
| Black ink | Shin-asahi | – | |
| Red ink | Maruyamakogyo | BC-6 | |
| Disposable Petri Dish | Corning | 351008 | Petri dishe (35 mm in diameter) |
| Askul Multipaper Super White J Monochrome A3 | Askul | 701-712 | White paper (29.7 cm x 42 cm x 0.09mm) |
| 50 mL Conical tube | Corning | 430829 | |
| Square drill | KAKURI Corporation | DIY FACTORY (K32-0313) |
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