Summary

Ayıklama ve Tayvanlı yeşil Propolis Analizi

Published: January 07, 2019
doi:

Summary

Biz etanol elde etmek ve antibakteriyel etkinliği sergileyen Tayvanlı yeşil propolis karakterize bir çözücü kullanmak için bir iletişim kuralı mevcut.

Abstract

Tayvanlı yeşil propolis prenylated Flavonoidler zengin ve geniş bir antioksidan, antibakteriyel, gibi biyolojik etkinlikler ve antikanser olanlar sergiler. Propolins, yani C, D, F ve g Tayvanlı yeşil propolis, biyoaktif bileşiklerdir Tayvanlı yeşil propolis propolins konsantrasyonu sezon ve coğrafi konuma bağlı olarak değişir. Böylece, Tayvanlı yeşil propolis kalitesini belirlemek için bir standart ve tekrarlanabilir yordamı oluşturmak için önemlidir. Burada, etanol bazlı çıkarma, yüksek performanslı sıvı kromatografi ve antibakteriyel etkinliği analiz Tayvanlı yeşil propolis kalite karakterize etmek için kullanan bir iletişim kuralı mevcut. Bu yöntem % 95 ve % 99.5 etanol çekimi Tayvanlı yeşil propolis, böylece antibakteriyel özelliklere sahip propolins yüksek konsantrasyonları verimli üzerinden en fazla kuru madde verimi elde gösterir. Bu bulgularına göre mevcut Protokolü güvenilir ve Tayvanlı yeşil propolis kalitesini belirlemek için yinelenebilir sayılır.

Introduction

Propolis, arı türleri Apis melliferatarafından üretilen doğal bir reçine karışımdır. Propolis yaygın halk ilaçları içinde eski çağlardan beri kullanılmaktadır. Bir çalışmada son zamanlarda o propolis mikrobiyal enfeksiyonlar ve iltihap1önlemek için yararlı olduğunu bildirdi. Çok sayıda çalışma propolis ana biyoaktif bileşikler flavonoidler, fenolik asit esterleri, prenylated polduğunu göstermiştir-kumarik asit ve diterpenic asit2,3. Bugüne kadar yüksek performanslı sıvı kromatografi (HPLC)4,5,6,7ile 10 prenylated flavanone türevleri Tayvanlı yeşil propolis üzerinden tespit edilmiştir. Bunlar arasında en bol propolins C, D, F ve G5,7vardır. Tayvanlı yeşil propolis önemli biyolojik etkileri propolins8yüksek içeriği ile ilişkili.

Konsantrasyonlarda propolis biyoaktif bileşiklerin büyük sezon ve propolis alındığı coğrafi konuma bağlı olarak çeşitlilik gösterir. Avrupa propolis esas olarak flavonoid aglycone ve fenolik asitleri9içerir. Propolis Brezilya büyük biyoaktif bileşikler vardır prenylated p-kumarik asit, artepillin C10gibi. Bir çalışma sezonun Tayvanlı yeşil propolis11toplam propolin içeriğinde belirlenmesi için kritik bir faktör olduğunu gösterdi. Tayvanlı yeşil propolis propolin içeriğinde yaz (Mayıs – Temmuz) ve en düşük kış11‘ en yüksek. Propolis antibakteriyel özelliği yaygın olarak biyolojik aktivitesi bir göstergesi olarak kabul edilmiştir. Genel olarak, çeşitli bölgelerden toplanan propolis örnekleri benzer bir antibakteriyel özelliği sergiledik; Örneğin, genel olarak hemen hemen tüm gram pozitif bakterilere karşı etkilidir ve gram-negatif bakteri10,12,13karşı sınırlı bir antibakteriyel etkisi sergiler. Propolis flavonoidler arasındaki sinerjik etkileşim bir antibakteriyel etkisi14için gösterdi. Benzer şekilde, Tayvanlı yeşil propolis gram-pozitif bakteri15karşı antimikrobiyal etkisi olduğu bildirildi. Ayrıca, bir çalışma da propolins Tayvanlı yeşil propolis8etkileşimlerin bir antimikrobiyal etkisi tespit edilmiştir.

Propolis biyoaktif bileşikler karakterizasyonu zor çünkü onun kimyasal bileşimi özgün kaynak göre değişebilir. Bu nedenle, Tayvanlı yeşil propolis kalitesini belirlemek için mümkün ve yinelenebilir bir yöntem kurmak gereklidir. Ancak, standart bir prosedür Tayvanlı yeşil propolis çıkarma ve sonraki fonksiyonel analiz için kurulmuştur. Çeşitli organik ve inorganik maddeleri uygulamak birkaç yöntem için propolis ayıklama16,17,18,19,20önerilmiştir. Propolis lipofilik bir karışımı olduğu için çalışmalar organik ayıklama inorganik ayıklama8,18,19iyi olduğunu gösterdi. Tayvanlı yeşil propolis ve antibakteriyel özellikleri toplam propolin konsantrasyon Tayvanlı yeşil propolis kalitesini anahtar göstergeleri. Böylece, bu çalışmada etanol elde etmek ve Tayvanlı yeşil propolis antibakteriyel özellikleri karakterize bir çözücü kullanmak için bir protokol sunmaktır.

Protocol

1. hazırlık bileşiklerin etanol elde Arı kovanı Temmuz Mayıs Tayvan dan toplanmıştır, donmuş Tayvanlı yeşil propolis 10 g tartmak ve baharat değirmeni kullanarak eziyet. Bütün Tayvanlı yeşil propolis parçaları olmadan herhangi bir büyük parçacıklar ince bir toz zemine olduğundan emin olun. 100 mL etanol (% 60, % 70, , % 95 ve % 99.5) ve su şişe ayırmak ve her yere propolis konsantrasyonu 10 g ile karıştırmak için çeşitli konsantrasyonları ekleyin. 25 ° C…

Representative Results

Etanol çıkarılması için olumlu temsilcisi veri Tablo 1′ de sunulmaktadır. Tayvanlı yeşil propolis üzerinden kuru madde verimi olumlu etanol konsantrasyon ile ilişkili idi. ve % 99.5 etanol özleri Tayvanlı yeşil propolis verim yüksek kuru madde vardı. Su ekstraksiyon solvent kullanıldığında en düşük kuru madde verimi Tayvanlı yeşil propolis üzerinden oluştu. Bu sonuçları, etanol gibi organik bir çözücü Tayvanlı yeşil propolis çıkarma…

Discussion

Bir çalışmada maserasyon, etanol, çeşitli konsantrasyonları kullanarak Brezilyalı propolis ayıklama17için kullanılabilir rapor; Ancak, süreç zaman alan17oldu. Fenol içeriği gibi biyoaktif bileşikler Brezilyalı propolis17ayıklamak için en az 10 gün sürdü. Alternatif olarak, etanol ayıklama 37 ° C, 50 ° C veya 70 ° C 30 dk için Isıtma ile birlikte Brezilya propolis19,21</su…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Bu el yazması Wallace akademik düzenleyerek düzenlendi.

Materials

ethanol Sigma-Aldrich E7023
Whatman no. 4 filter paper Sigma-Aldrich WHA1004125
methanol Sigma-Aldrich 34860
reverse phase RP-18 column Phenomenex Inc. 00G-0234-E0
Staphylococcus aureus ATCC BCRC 10780
Escherichia coli ATCC BCRC 10675
tryptic soy broth Sigma-Aldrich 22092
nutrient broth Sigma-Aldrich 70122
dimethyl sulfoxide Sigma-Aldrich D2650
spice grinder Waring WSG60K
microplate Reader Molecular Devices EMAX PLUS
HPLC system Agilent 1200 Series
vacuum evaporation BÜCHI Rotavapor R-215

References

  1. Zabaiou, N., et al. Biological properties of propolis extracts: Something new from an ancient product. Chemistry and Physics of Lipids. 207 (Pt B), 214-222 (2017).
  2. Bankova, V. B., De Castro, S. L., Marcucci, M. C. Propolis: Recent advances in chemistry and plant origin. Apidologie. 31 (1), 3-15 (2000).
  3. Park, Y. K., Alencar, S. M., Aguiar, C. L. Botanical origin and chemical composition of Brazilian propolis. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 50 (9), 2502-2506 (2002).
  4. Chen, C. N., Wu, C. L., Shy, H. S., Lin, J. K. Cytotoxic prenylflavanones from Taiwanese propolis. Journal of Natural Products. 66 (4), 503-506 (2003).
  5. Chen, C. N., Weng, M. S., Wu, C. L., Lin, J. K. Comparison of radical scavenging activity, cytotoxic effects and apoptosis induction in human melanoma cells by Taiwanese propolis from different sources. Evidence-Based Complementary and Alternative. 1 (2), 175-185 (2004).
  6. Chen, C. N., Wu, C. L., Lin, J. K. Apoptosis of human melanoma cells induced by the novel compounds propolin A and propolin B from Taiwanese propolis. Cancer Letters. 24 (1-2), 218-231 (2007).
  7. Huang, W. J., et al. Propolin G, a prenylflavanone, isolated from Taiwanese propolis, induces caspase-dependent apoptosis in brain cancer cells. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 55 (18), 7366-7376 (2007).
  8. Chen, Y. W., Ye, S. R., Ting, C., Yu, Y. H. Antibacterial activity of propolins from Taiwanese green propolis. Journal of Food and Drug Analysis. 26 (2), 761-768 (2018).
  9. Hegazi, A. G., Abd El Hady, F. K., Abd Allah, F. A. M. Chemical composition and antimicrobial activity of European propolis. Zeitschrift für Naturforschung. 55 (1-2), 70-75 (2000).
  10. Sforcin, J. M., Fernandes, A., Lopes, C. A. M., Bankova, V., Funari, S. R. C. Seasonal effect on Brazilian propolis antibacterial activity. Journal of Ethnopharmacology. 73 (1-2), 243-249 (2000).
  11. Chen, Y. W., et al. Characterization of Taiwanese propolis collected from different locations and seasons. Journal of the Science of Food and Agriculture. 88 (3), 412-419 (2008).
  12. Grange, J. M., Davey, R. W. Antibacterial properties of propolis (bee glue). Journal of the Royal Society of Medicine. 83 (3), 159-160 (1990).
  13. Kujumgiev, A., et al. Antibacterial, antifungal and antiviral activity of propolis from different geographic origins. Journal of Ethnopharmacology. 64 (3), 235-240 (1999).
  14. Krol, W., Scheller, S., Shani, J., Pietsz, G., Czuba, Z. Synergistic effect of ethanol extract of propolis and antibiotics in the growth of Staphylococcus aureus. Drug Research. 43 (5), 607-609 (1993).
  15. Lu, L. C., Chen, Y. W., Chou, C. C. Antibacterial and DPPH free radical-scavenging activities of the ethanol extract of propolis collected in Taiwan. Journal of Food and Drug Analysis. 11 (4), 277-282 (2003).
  16. Tosi, B., Donini, A., Romagnoli, C., Bruni, A. Antimicrobial activity of some commercial extracts of propolis prepared with different solvents. Phytotherapy Research. 10 (4), 335-336 (1996).
  17. Cunha, I. B. S., et al. Factors that influence the yield and composition of Brazilian propolis extracts. Journal of the Brazilian Chemical Society. 15 (6), 964-970 (2004).
  18. Woo, S. O., Hong, I. P., Han, S. M. Extraction properties of propolis with ethanol concentration. Journal of Apicultural Research. 30 (3), 211-216 (2015).
  19. Park, Y. K., Ikegaki, M. Preparation of water and ethanolic extracts of propolis and evaluation of the preparations. Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry. 62 (11), 2230-2232 (1998).
  20. Ramanauskienė, K., Inkėnienė, A. M. Propolis oil extract: quality analysis and evaluation of its antimicrobial activity. Natural Product Research. 25 (15), 1463-1468 (2011).
  21. Machado, B. A., et al. Chemical composition and biological activity of extracts obtained by supercritical extraction and ethanolic extraction of brown, green and red propolis derived from different geographic regions in brazil. PLoS One. 11 (1), e0145954 (2016).
  22. Monroy, Y. M., et al. Brazilian green propolis extracts obtained by conventional processes and by processes at high pressure with supercritical carbon dioxide, ethanol and water. The Journal of Supercritical Fluids. 130, 189-197 (2017).
  23. Popova, M., Chen, C. N., Chen, P. Y., Huang, C. Y., Bankova, V. A validated spectrophotometric method for quantification of prenylated flavanones in pacific propolis from Taiwan. Phytochemical Analysis. 21 (2), 186-191 (2010).
  24. Chen, L. H., et al. Taiwanese green propolis ethanol extract delays the progression of type 2 diabetes mellitus in rats treated with streptozotocin/high-fat diet. Nutrients. 10 (4), e503 (2018).

Play Video

Cite This Article
Chen, C., Chien, Y., Yu, Y., Chen, Y. Extraction and Analysis of Taiwanese Green Propolis. J. Vis. Exp. (143), e58743, doi:10.3791/58743 (2019).

View Video