쥐에서 사 여과 속도의 경 피 측정

이 원고와 함께 교육 비디오 제공 실용적인 지침 경 피를 사용 하 여 마우스에 GFR 모니터. 절차에서 가장 중요 한 단계는 동물의 뒤, 그리고 안전 하 게 복 부 주위에 테이프를 배치에 장치의 올바른 첨부 파일. 가장 좋은 위치는 흉 곽 약간 왼쪽 이나 오른쪽, 중간의 끝났습니다. 패치 및 장치는 피부에 단단히 고정 되어 있이 필요가 있지만 그들은 해서는 안됩니다 너무 조이는 그들은 제한 하는 호흡, 운동, 또는 장치, 피부 혈액 순환에 영향을 미칠이 결함이/부정확 한 측정 이어질 것 이다. 또한, 이후 모니터링 후 그들은 마 취에서 회복 의식 마우스에서 발생 합니다, 작은 운동 유물으로 경 피 측정에서 운동 결과에서 낮은 방해와 시체 일부 장치의 배치를 수정 합니다. 이러한 이유로, 그것은 중요 한 장치 배치 되지 않습니다 너무 가까이 위 사지 쥐 그들의 어깨를 자유롭게 움직일 수 있도록.

그것은 탈모에 영향을 미치는 예비 데이터를 나타내는 경 피 GFR 증가의 측정 직전 그 탈모와 FITC sinistrin 클리어런스의 측정 depilate 쥐 GFR 측정 전에 1 ~ 2 일 하는 것이 중요 합니다 FITC sinistrin의의 명백한 반감기 이 메커니즘은 알려져 있지 않습니다. 따라서, 여러 시간 포인트와 실험 사이 신뢰성 높은 측정을 얻기 위하여 그것은 GFR 측정 진행 하기 전에이 과정에서 회복 하기 위해 피부 수 있도록 사전에 쥐를 depilate 하는 것이 좋습니다. 탈모 크림 피부에 화학 손상을 방지 하기 위해 이전 응용 프로그램의 72 h 내 피부 같은 지역에 적용 하지 합니다. 많은 경우에, 모피 다시 성장을 몇 일 또는 주까지 걸리며 그래서 탈모 크림 72 h 이내 다시 적용 쉽게 피할 수 있습니다.

때문에 최대 50% 혈 청의 크는 쥐¹³, 관 섹션에 의해 배설 때 있기 때문에 증가 재흡수 신장 tubules에서 우 레 아의 마우스는 탈수¹⁴, 혈 청 크와 벤은 신장 기능의 가난한 마커. 그러나, 그들의 편의 때문에 이러한 분석 실험 쥐에서 아키와 CKD의 전 임상 연구에서 신장 기능의 주요 조치로 사용 될 계속. 그러나, 정상 또는 정상 신장 기능¹³근처 쥐 크 배설을 관 분 비의 주요 기여와 일치, 혈 청 크가 보였다 FITC-sinistrin 허가와 약간 상관 관계가 높은 공간 속도에서 (낮은 FITC-sinistrin 하프), 그 크는 구분 하지 않는 정도의 가벼운 신장 부상으로 쥐에 있는 신장 기능을 나타내는. 반면, 롤빵 온화한 신장 손상 된 쥐에서 FITC-sinistrin 허가와 잘 연결, 더 가혹한 신장 상해 (하프 라이프 FITC sinistrin 높은)와 쥐에서 롤빵 및 FITC-sinistrin 허가 가난한 상관관계는. 이것은 가능성이 심각한 신장 부상으로 아픈 동물에 탈수와 관련 된 요소 재흡수의 효과 의해 발생 합니다.

다른 모든 bolus 클리어런스 또는 GFR 측정에 대 한 지속적인 주입 기술에 비해 경 피 GFR 측정의 주요 이점은 신중 하 게 초과 혈액 또는 소변 컬렉션 필요 하지 않습니다 이다. 이러한 낮은 총 혈액 볼륨 및 쥐에 비해 비뇨 기 출력 특히 쥐에서 도전 될 수 있습니다. 또한, 마우스 장치 및 주입, 첨부 파일에 대해서만 하지만 클래식 bolus 클리어런스 실험¹⁵필요에 따라 여러 venipunctures 처리를 해야 합니다. 또한, 마 취의 기간은 짧은, 그리고 따라서 그것은 시간이 지남에 따라 개별 쥐에 반복된 측정을 수행할 수 있습니다. 주파수는 측정을 수행할 수 있습니다 주로 반복 된 마 취 세션에 쥐, 정 맥 주사, 그리고 현지 기관 규정에 대 한 연구원의 적성의 건강 상태에 따라 달라 집니다. 건강 한, 손상 되지 않은 생쥐에서 경 피 GFR 측정 마우스에 최소한의 또는 더 불리 한 효과 함께 매일, 수행할 수 있습니다. 그러나, 부상된 쥐 아키 또는 CKD에서 고통을 하지 않을 수 있습니다 건강 한 쥐로 반복 된 마 취 세션을 용납 하 고 따라서 측정의 주파수를 감소 한다.

쥐 GFR 측정 bolus 정리 방법에 비해 경 피 GFR 측정의 주요 제한은 배설 활동 시간이 지남에 상대적 형광 강도에 변화 그리고 절대 추적 농도 측정만입니다. 이 때문에,만 세포 외 볼륨¹⁶정규화 GFR의 매우 가까운 견적을 운동, 배설의 단일 지 수 감퇴의 속도 상수를 측정 수는. ML/min에서 GFR을 표현 하는 동물의 세포 외 볼륨¹을 수행 FITC sinistrin의 플라즈마 농도의 동시 측정 했다 이전 연구에서 설정 된 변환 인수를 사용 하 여 예상할 수 있다. 그러나,이 변환 인수 수 있습니다 제대로 예상 하지 extracellular 액체 볼륨 똑같이 모든 마우스에서 잘 유체 볼륨 다양 한 나이 포함 하는 외부 요인에 의해 영향을 받을 수 있습니다, 이후 성, 수 화 상태 (수술에 의해 영향을 받을 수 있는 개입 뿐 아니라 신장 상해), 그리고 무게¹⁷. 그러나, 주입 마우스에서 GFR을 평가 하는 방법 bolus 달리 transcutaneous GFR 측정은 덜 연산자 종속 다양성으로 그것 투약 오류 또는 오류 혈액 컬렉션의 타이밍에 영향을 받지 않습니다.

Transcutaneous GFR 측정 기술의 또 다른 한계는 기준선 신호 교대 피부 fluorophores 및 장치 부착 및 트레이 서 사출에 필요한 마 취의 표백으로 인해 측정의 과정에서 발생할 수 있습니다. 이 제한³보정 알고리즘 구현 하 여 Friedemann와 동료에 의해 해결 되었다. 이 알고리즘의 구현 GFR 평가의 지속적인 주입 기술에 비해 경 피 기술의 정밀도 개선을 이끌어 냈다.

자주 묻는 질문은 여부 다른 마우스 긴장에 피부 착 색 경 피 FITC sinistrin 클리어런스에 영향을 줍니다. 피부 착 색 감소 FITC sinistrin 신호 강도 어두운 안료 흡수 블루 여기 및 녹색 방출 이후 FITC sinistrin 측정에서 신호. 그러나, FITC sinistrin의 배설 율은 전체의 독립적인 신호 강도. 또한, 측정된 된 신호는 낮은, 배경 신호 안료 생쥐에서 낮은도 합니다. 배경 신호 피부 fluorophores의 autofluorescence와 여기 빛의 반사의 혼합물 이므로 우리 배경-최대 신호 비율 비교, 또는 심지어 개선, 색칠 한 동물에는 하는 것이 나타났습니다. 또한, 운동 유물, 주변 피부에의 노출에 의해 발생 하는 빛을 반영, 반사 된 빛은 피부 안료에 의해 흡수 또한 이후 안료 생쥐에서 감소 된다.

결론적으로, 우리가 제시 하는 기술 의식, 자유롭게 모든 피부 타입의 마우스 이동에 GFR의 정확한 측정을 허용 한다. 기술은 혈액 샘플링의 독립적으로, 그것은 사용할 수 있습니다 반복적으로 같은 동물에 GFR의 아키의 유도 후 발생 하는 급격 한 변화 측정에 대 한 뿐만 아니라 CKD 모델, 경도 관측을 위해.