Transdermal מדידה של קצב הסינון Glomerular בעכברים

כתב היד הזה בסרטון הדרכה המלווה את מספקים הנחיות מעשיות לשימוש של transdermal GFR צגים בעכברים. השלבים הקריטיים ביותר בהליך הם החזקה נכונה של המכשיר על החיה הגב, והגלישה בבטחה את הקלטת סביב הבטן. התנוחה הטובה ביותר או מעט ימינה או שמאלה של האמצע, מעל קשת הצלעות. תיקון, התקן צריך להיות מחובר היטב על העור, אך הם לא צריך להיות כל-כך חזק. שהם להגביל את הנשימה, התנועה, או להשפיע על זרימת הדם לעור מתחת המכשיר, כמו זה יוביל למדידות פגום/לא מדויק. בנוסף, מאז ניטור מתרחשת בעכברים בהכרה לאחר הם התאוששו מן ההרדמה, לתקן את המיקום של המכשיר מצד הגוף עם הפרעה הנמוך מתוצאות תנועה במדידות transdermal עם חפצי אמנות תנועה קטנה. מסיבה זו, חשוב כי המכשיר אינם ממוקמים קרוב העליון בגפיים כך העכברים יכול לנוע בחופשיות את הכתפיים שלהם.

זה חשוב depilate העכברים 1-2 ימים לפני המדידה GFR, כמו אפילציה משפיע על מידת הסיווג FITC-sinistrin, עם נתונים ראשוני המציין את אפילציה מיד לפני המדידה של transdermal GFR מגביר לכאורה מחצית החיים של FITC-sinistrin. מנגנון זה אינו ידוע. לכן, על מנת לקבל מדידות אמין על נקודות זמן מרובות, בין ניסויים, מומלץ depilate העכברים מראש, כדי לאפשר לעור להתאושש תהליך זה לפני שתמשיך עם GFR מדידות. אפילציה קרם לא צריך להיות מוחל על אותו אזור של העור בתוך 72 h של יישום מראש, כדי למנוע נזק כימי על העור. במקרים רבים, הפרווה מחדש את הצמיחה לוקח כמה ימים או שבוע, אז יישום מחדש של אפילציה קרם בתוך 72 h בקלות ניתן להימנע.

כי למעלה ל- 50% של סרום קריאטינין מופרש על ידי סעיף צינורי עכברים¹³, כי אין התחדשות מוגברת של שתנן מ בקוריאנית כליות כאשר עכברים מיובש¹⁴, סרום קריאטינין לחמניה הם סמנים המסכן של תפקוד הכליות. עם זאת, בגלל הנוחות שלהם, אלה מבחני להמשיך לשמש המדד המרכזי של תפקוד כלייתי מחקרים פרה של אקי, CKD בעכברים. עם זאת, בקנה אחד עם תרומה עיקרית של הפרשת צינורי כדי קריאטינין הפרשה בעכברים עם נורמלי או בסמוך לשם תפקוד כליות תקין¹³, סרום קריאטינין הראו מתאם קטן עם סיווג FITC-sinistrin במחירים סיווג גבוהות (נמוך FITC-sinistrin half-life), המציין את קריאטינין הוא מדד רגישות של תפקוד כלייתי אצל עכברים עם אי-ספיקת כליות קלה. לעומת זאת, בעוד לחמניה להרכב טוב FITC-sinistrin סיווג בעכברים עם פגיעה כלייתית קלה, יש עניים קורלציה בין סיווג לחמנייה או FITC-sinistrin בעכברים עם אי-ספיקת כליות חמורה יותר (FITC-sinistrin גבוהה מחצית חיים). זו נגרמת ככל הנראה על ידי אפקטים של התחדשות אוריאה המשויך התייבשות אצל בעלי חיים חולים עם אי-ספיקת כליות חמורה.

היתרון העיקרי של המדידה GFR transdermal, לעומת כל סיווג בולוס אחרים או אינפוזיה קבוע שיטות למדידה GFR, היא כי הוא אינו דורש אוספים בדם או בשתן מתוזמן היטב. אלה יכולים להיות מאתגרים במיוחד בעכברים כפי שהם אמצעי אחסון נמוכה בדם הכולל והפלט השתן לעומת חולדות. יתר על כן, עכברים צריכים להיות מטופלים רק עבור קובץ מצורף של המכשיר, הזרקה, אך לא עבור venipunctures מרובות, כנדרש עבור בולוס קלאסית אישור ניסויים¹⁵. יתר על כן, משך הזמן של הרדמה קצר, ככזה זה אפשרי לבצע מדידות חוזרות ונשנות בעכברים בודדים לאורך זמן. התדירות שבה מדידות יכול להתבצע בעיקר תלוי מצב בריאותו של העכברים, כשרון של החוקר זריקות תוך ורידי, ולתקנות מוסדיים מקומיים על הפעלות חוזרות הרדמה. בעכברים בריאים, שציווית, יכול להתבצע transdermal GFR מדידות מדי יום, עם תופעות מינימליות או לא שלילית על העכבר. עם זאת, פצוע עכברים הסובלים אקי או CKD צפויים לסבול הפעלות חוזרות הרדמה, כמו גם עכברים בריאים, ולכן צריך להיות מופחת התדירות של מדידות.

המגבלה העיקרית של המדידה GFR transdermal, לעומת שיטות סיווג בולוס למדוד GFR בעכברים הוא קינטיקה הפרשה נמדדים רק כמו שינוי עוצמת קרינה פלואורסצנטית יחסית לאורך זמן, ולא כפי ריכוזים מעקב מוחלטת. בגלל זה, זה אפשרי רק למדוד את קצב קבוע דעיכה מעריכית יחיד של הפרשה קינטי, המהווה הערכה מאוד קרוב של GFR מנורמל חוץ-תאי אחסון¹⁶. כדי לבטא GFR ב mL/min, נפח חוץ-תאי של החיה יש להערכה באמצעות פקטור המרה שהוקמה במחקרים קודמים שבהם היו מדידות סימולטני של פלזמה ריכוזים של FITC-sinistrin תרגיל¹. עם זאת, גורם המרה זה עשוי לא כראוי מעריכים כרכים נוזל חוץ-תאי באותה מידה גם בעכברים כל, מאז נפח נוזלים עלולים להיות מושפעים על ידי מגוון של גורמים חיצוניים, כולל גיל, סקס, מצב הידרציה (אשר עשוי להיות מושפע כירורגי התערבויות וכן אי-ספיקת כליות), ומשקל¹⁷. אולם, בניגוד בולוס מינון שיטה להערכת GFR בעכברים, transcutaneous מדידה GFR הוא להשתנות פחות תלוי המפעיל כפי לא ישפיע על ידי שגיאות מינון או שגיאות תזמון האוספים דם.

מגבלה נוספת לשיטת המדידה של GFR transcutaneous הוא כי משמרות אות בסיסית עלולה להתרחש במהלך המדידה בשל הלבנת העור fluorophores, ההרדמה הנדרש להזרקה המצורף, מעקב המכשיר. מגבלה זו זו נדונה על ידי פרידמן ועמיתיו על-ידי יישום של אלגוריתם תיקון³. מימוש אלגוריתם זה הוביל לשיפור דיוק של הטכניקה transdermal להשוות טכניקה אינפוזיה מתמדת של הערכת GFR.

שאלה שכיחה היא אם עור פיגמנטציה ב העכבר שונים זנים משפיעה transdermal את סיווג FITC-sinistrin. עור פיגמנטציה מפחיתה את עוצמת האות FITC-sinistrin מאז פיגמנטים כהים סופג את עירור כחול, ירוק הפליטה אותות מן המידות FITC-sinistrin. עם זאת, שיעור הפרשה של FITC-sinistrin אינה תלויה הכולל אות בעוצמה. יתר על כן, בעוד האות נמדד הוא נמוך, האות רקע גם הוא נמוך בעכברים פיגמנט. כי האות הרקע הוא תערובת של autofluorescence של העור fluorophores השתקפות האור עירור, מצאנו כי היחס אות רקע-כדי-מקסימום הוא דומות, או אפילו יותר טוב, בבעלי חיים פיגמנט. בנוסף, התנועה חפצים, אשר נגרמות על ידי חשיפה של העור שמסביב משתקף האור, מופחתים בעכברים פיגמנט מאז האור משתקף גם נספג על ידי פיגמנט העור.

לסיכום, הטכניקה הוצגו מאפשר מדידה מדויקת של GFR ב בהכרה, לנוע בחופשיות עכברים לכל סוגי העור. הטכניקה היא עצמאית של לקיחת דמים, ניתן להשתמש שוב ושוב על אותה חיה תצפיות האורך במודלים CKD, כמו גם עבור המדד של שינויים מהירים של GFR להתרחש לאחר אינדוקציה של אקי.