Maus-Körper-Temperaturmessung mit Infrarot-Thermometer während Passive systemische Anaphylaxie und Essen Allergieabklärung
Summary
Hier präsentieren wir eine neue Methode, um Körper Temperaturunterschiede im passiven systemische Anaphylaxie (PSA) und Lebensmittel Allergie-Maus-Modellen mit Infrarot-Thermometer messen. Dieses Verfahren wurde in früheren PSA Ergebnisse genau dupliziert.
Abstract
Maus-Körper-Temperatur-Messung ist von größter Bedeutung für die Untersuchung von Allergien und anaphylaktische Symptome. Rektale Sonden für Temperaturmessungen ist üblich, und sie erwiesen sich als richtig und von unschätzbarem Wert in dieser Hinsicht sein. Diese Methode der Temperaturmessung erfordert jedoch die Mäuse, betäubt werden, um die Sonde ohne Verletzung des Tieres einzufügen. Dies schränkt die Möglichkeiten andere Phänotypen der Maus gleichzeitig zu beobachten. Um anderen Phänotypen untersuchen während der Messung von Temperaturen, rektale Sonden sind nicht ideal, und eine andere Methode ist erwünscht. Hier stellen wir eine nicht-invasive Methode zur Temperaturmessung, die die Voraussetzung für die Maus Anästhesie unter Beibehaltung der gleichen Zuverlässigkeit, rektale Sonden bei der Messung der Körpertemperatur verzichtet. Wir verwenden ein Infrarotthermometer, die erkennt der Körper Oberflächentemperaturen bei Reichweiten von 2 bis 150 mm. Diese Methode der Körper-Temperatur-Messung ist in zuverlässig replizieren veränderungstrends Temperatur während der passiven System Anaphylaxie Experimente an Mäusen erfolgreich. Wir zeigen, dass Körper Oberflächentemperaturen etwa 2,0 ° C niedriger als rektale Sonde Messungen, sondern der Grad der Temperaturabfall dem gleichen Trend folgt. Darüber hinaus verwenden wir die gleiche Technik, um Mäuse in einem Lebensmittel Allergie Modell gleichzeitig auszuwertende Temperatur-und Aktivität zu beobachten.
Introduction
Messung der Körpertemperatur ist schon ein wesentlicher Bestandteil der Überwachung der Auswirkungen der anaphylaktische Symptome in Tier1,2Modelle. Temperaturunterschiede wurden traditionell durch rektale Sonde Thermometer in Mäuse3,4gemessen. Mit diesen Messungen haben Ermittler zuverlässig Temperaturdifferenzen zwischen Variablen dargestellt; aber diese Methode ist ein zeitaufwändiges Verfahren und verursacht Bedrängnis zu Mäusen, die wodurch die Körperkerntemperatur erhöht werden kann. Rektale Untersuchung kann auch Schleimhaut reißen und Infektion3. Darüber hinaus sollten die Mäuse betäubt werden, um die rektale Sonde zur Messung der Temperatur3menschlich einzufügen. Dies ist ein langsamer Prozess, und es verbietet die Messung der aufeinander folgenden Temperaturen innerhalb kurzer Zeit. Darüber hinaus können Mäuse Aktivität Phänotypen beobachtet werden, während dieser Zeit, bis die Narkose vollständig getragen wird, aus, die ein weiterer zeitaufwendiger Prozess ist. In jüngerer Zeit, haben andere zuverlässigen Methoden zur Messung der Körpertemperatur verwendet subkutan implantierten passive Infrarot-Transponder Tags oder Funk-Sendern, die eine Temperatur Sensor3,5,6enthalten. Obwohl sie von einigen Forschern als die ideale Praxis akzeptiert werden, sind diese Methoden nicht wegen der hohen Anschaffungskosten und Not an Mäusen, durch die chirurgische Implantation eines Temperatursensors unter die Haut oder einem anderen Teil des Körpers verbreitet.
Um zu zeigen, dass eine Temperaturdifferenz ein genaues Bild der Symptome einer Krankheit Modell1,2 ist, müssen Mäuse wach während der Temperaturmessung und können wieder ihre normale Aktivität der phänotypischen unmittelbar vor und nach der Messung. Zu diesem Zweck haben wir versucht, eine Methode, mit der dies erreicht werden könnte.
Unser Ziel war es, präzise und kostengünstig Maus Körpertemperatur, ohne Narkose und ohne Einschränkungen auf Aktivität, um Beobachtung des Verhaltens Phänotypen während und nach der Zeit der Temperaturmessung messen. Um dieses Ziel zu erreichen, war es offensichtlich, dass eine Technik, die weniger invasiv als die standard rektale Temperatur-Sonden erforderlich ist. Infrarot-Thermometer haben jahrzehntelang in der klinischen Medizin, vor allem in der Pädiatrie, verwendet worden, um genaue Messwerte zu erhalten. Es wurde eine alternative Methode, die es Klinikern erlaubt, schnell und präzise Temperaturmessungen bei Säuglingen und pingelig Kindern, die aktiv mobil zu erhalten. Wir dieselbe Technik in Mäusen durchgeführt und entwickelt eine erfolgreiche Methode, um Temperaturen ohne Betäubung zu erreichen. Wichtig ist, zeigen wir, dass diese Methode replizieren die etablierten passive systemische Anaphylaxie Ergebnisse in Bezug auf Temperaturänderungen, gleichzeitig in der Lage, die Aktivität der Maus während der Messung zu beobachten ist. Darüber hinaus verwenden wir die gleiche Methode auszuwertende Körpertemperaturen Lebensmittel allergische Mäuse, während gleichzeitig andere Symptome, um nachzuweisen, dass die Körpertemperatur ist in der Tat ein genaues Bild von dem Aktivitätsniveau und insgesamt Phänotyp der Untersuchung der Maus.
Protocol
Representative Results
Discussion
Das Protokoll beschrieben wurde gegründet mit dem Ziel der Messung der Körpertemperatur ohne die Verwendung der Anästhesie. Trotz seiner relativen Mühelosigkeit, mit welcher Temperatur Lesungen gewonnen werden können, gibt es mehrere Einschränkungen, die diese Technik neben der offensichtlichen Effekte wie Umgang mit Stress und verschiedene Umgebungstemperaturen aufnehmen.
Zuerst, um konsistente Temperaturmessungen während des Experiments zu erhalten, muss der Ort, wo die Temperatur gem…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Forschung in der Lab wurde von NIH unterstützt Kawakami gewährt: R01 AR064418-01A1, R01 HL124283-01, R21 AI 115534-01, und R41AI124734-01.
Materials
| Non-contact infrared thermometer | SinoPie | DT-8861 | |
| Anti-dinitrophenyl (DNP) IgE | Sigma Aldrich | D8406-.2MG | |
| PrecisionGlide 30G needle | BD | 305128 | |
| PrecisionGlide 26G needle | BD | 305111 | |
| 1 mL syringe | BD | 309659 | |
| Dinitrophenyl – human serum albumin | Biosearch Technologies | D-5059-10 | |
| Ovalbumin from chicken egg white | Sigma Aldrich | A5503-50G | |
| Imject Alum | ThermoFisher Scientific | 77161 | |
| Animal Feeding Needles, disposable | Fisher Scientific | 01-208-87 |
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