Summary

Выборки и предварительной обработки эмали зубов карбонат для стабильной углерода и кислорода изотопный анализ

Published: August 15, 2018
doi:

Summary

Стабильные углерода и кислорода изотопный анализ карбоната человека и животных зуб эмаль используется в качестве прокси для индивидуальной диеты и экологической реконструкции. Здесь мы предоставляем подробное описание и визуальные документации навалом и последовательные зуб эмаль выборки, а также предварительной археологические и палеонтологические образцы.

Abstract

Стабильные углерода и кислорода изотопный анализ человека и животных зуб эмаль карбоната применялся в paleodietary, палеоэкологические и палеоэкологическое исследования недавних исторических периодов вернуться к более 10 миллионов лет назад. Массовая подходы обеспечивают репрезентативной выборки на период минерализации эмали, в то время как последовательных выборок внутри зуба может отслеживать диетических и экологические изменения в этот период. Хотя эти методологии были широко применяется и описаны в археологии и экологии, палеонтологии, там было без четких руководящих принципов для оказания помощи в выборе необходимого лабораторного оборудования и подробно описать подробные лабораторных проб и протоколы. В этой статье мы документ текстуально и визуально, весь процесс от выборки путем предварительной обработки и диагенетических скрининг более широко распространять методологии для исследователей, считая его применение в различных лабораторных параметров.

Introduction

Стабильные углерода и кислорода анализ изотоп карбоната эмаль зуба был использован для изучения прошлого человека пищей, отлучение от груди и мобильности, а также животных полагаться на растительность, движения животных и кормлении скота. Эти приложения были всесторонне обсудили и рассмотрели для различных условий окружающей среды, определяющее последствия местных засушливость, температуры, источников воды и растительности композиции1,2, 34,,5,6. Разнообразие потенциальных применений в области археологии и палеонтологии, а также хорошее сохранение карбоната эмали зуба, сделало его привлекательный материал для стабильного изотопа работы3. Методы отбора проб, предварительной обработки и Диагенез скрининг кратко описаны в ряде предыдущих публикаций1,7. Однако тщательное вербальный и демонстрации остаются практически недоступными, особенно для людей вне археологической науки лаборатории и лаборатории группами с ограниченным финансированием, где растет интерес к использованию этого метода 5.

Зубная эмаль главным образом состоит из гидроксиапатита (bioapatite) кристаллитов8 больше, чем те, в кости, что делает его более устойчивым к посмертные диагенетических ионных замен и загрязнения3. Современные исследования показали, что стабильная углерода изотопа (δ13C) измерения фауны зуб эмаль надежно запись животных диеты и поведение9,10. Изотоп (δ18O) значение стабильной кислорода эмали зубов определяется изотопного состава кислорода попадает вода, которая включает в себя водных растений и животных продуктов, питьевой воды, дыхания, а также различных экологических последствий на воде что может привести к дальнейшей изотопный фракционирование (например., засушливость, температуры, высоты, количество осадков, континентальной местоположение)11. Это сделало его популярным методом для диетического и экологической реконструкции археологических, палеоэкологические и палеонтологические исследования.

В период формирования эмали зуба является относительно коротким (лет) и отличается в зависимости от зуба производится выборка. Для людей первого моляра эмаль реминерализует от рождения до 3 лет возраста, премоляры минерализации от 1,5 до 7 лет, второй моляров минерализации от 2,5 до 8 лет и третьих моляров минерализации в подростковом возрасте, от 7 до 16 лет12 . Учитывая что формы эмаль зуба постепенно в течение его периода формирования, он может быть пробы навалом вдоль оси весь рост или последовательно отобранных для того, чтобы исследовать изменения в рационе питания и окружающей среде, которые имели место в период формирования13 . Хронологически приказал диетических изменений в пределах данного зуба является наблюдаемый объект для людей и других животных1,14, предоставляя информацию о межгодовой вариации сезонного и диетических.

В то время как эмаль обычно устойчив к Диагенез, изотопный изменениями, вытекающими из захоронения окружающей среды возможны и наблюдались15,16, делая экспериментальных проверок и предварительной обработки выбор полезных. Хотя это не только доступный метод, Фурье преобразование инфракрасной спектроскопии (FTIR), особенно в ослабленный режим передачи, возникла как быстрый, недорогой и относительно доступный метод для оценки taphonomic изменения в эмали зубов, особенно в палеонтологических контексты17,18,19,20. Однако подробных протоколов и стандартов записи остаются относительно недоступными для многих людей за пределами области геохимии или материал науки.

Время реакции и химических веществ, используемых исследователями в предварительной обработки эмали зубов также существенно различаются в литературе, часто с ограниченной рассмотреть вопрос о том, что эта изменчивость может сделать, чтобы стабильные углерода и кислорода изотоп значения образца21 ,22. Здесь мы приводим подход использует разбавить уксусной кислоты (0,1 М) для предварительной обработки образцов порошковой эмалью. Однако учитывая, что различия в изотопного измерения, связанные с предварительной обработкой являются относительно незначительными для эмали зубов, это лучше для исследователей, чтобы следовать протоколы для наборов данных, с которой они хотели бы сравнить свои данные до11. Кроме того где принимаются небольшие последовательные образцы, особенно на голоценовых образцов, без предварительной обработки может быть выбран (после экспериментального диагенетических испытаний) чтобы избежать потерь образца.

Хотя методы, которые мы приводим здесь отнюдь не являются новыми, насколько нам известно, это первый раз, что тщательной документации письменные и визуальные сыпучих и последовательной выборки, предварительной обработки выбора и диагенетических проверить методы (в виде FTIR) для зубов эмаль были предприняты широко доступны в разнообразных академической аудитории. Хотя мы надеемся, наши усилия будут сделать этот подход более доступными для более широкого числа лиц и лабораторий, исследователей, которые хотят применять и опубликовать этот метод должны быть осведомлены о минимальных стандартов, диагенетических соображений, отчетности и требования к презентации сделал обзор других20, а также потенциальных Интерпретив сложностей, которые будут уникальными для их изучения региона, таксонов проанализированы и время периода5.

Protocol

Следующий протокол следует принципам свет изотопной масс спектрометрии лаборатории в институте Макса Планка для науки истории человечества. Этика соответствующие разрешения от национальных и международных комитетов следует искать для анализов, связанных с находящимися под угрозой …

Representative Results

С использованием представленные выше процедура отбора, были подготовлены дополнительные эмаль bioapatite образцы. Анализ bioapatite эмали зависит точность выборки, сыпучих или добавочное. В этом случае мы решили представить результаты археологические образцы (две овцы) из раз…

Discussion

Вызовы успешных проб (насыпных и добавочное) зубочелюстной системы зависит от доступа к знаниям о методы бурения и пробоподготовки, наряду с инвестиций в оборудование, относительно недорогой. Эти проблемы легко преодолимы, когда ясно, что имеются инструкции, касающиеся отбора проб и пр…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Мы хотели бы поблагодарить Общество Макса Планка для финансирования этого исследования, а также недавнее создание стабильного изотопа лаборатории отдела археологии, Институт Макса Планка для науки истории человечества.

Materials

Dremel Micro Dremel https://www.dremel.com/en_US/products/-/show-product/tools/8050-micro
Diamond-tipped drill bit Dremel https://www.dremel.com/en_US/products/-/show-product/accessories/7122-diamond-wheel-point
1.5 mL micro-centrifuge tube Sigma Aldrich https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/t2422?lang=de&region=DE&gclid=EAIaIQobChMI7pHRpauW2QIV77ftCh1p1wjhEAAYASAAEgKzkvD_BwE
Methanol Linear Formula: CH3OH
Acetic Acid Linear Formula: CH3CO2H
Dremel rig set-up (workstation) Dremel https://www.dremel.com/en_US/products/-/show-product/tools/220-01-workstation
Microcentrifuge Thermo Scientific http://www.thermofisher.com/order/catalog/product/75002401
Mini-centrifuge Sprout http://www.heathrowscientific.com/sprout-mini-centrifuge-4
Freeze drier Zirbus Technology http://www.zirbus.com

References

  1. Balasse, M. Reconstructing dietary and environmental history from enamel isotopic analysis: time resolution of intra-tooth sequential sampling. International Journal of Osteoarchaeology. 12 (3), 155-165 (2002).
  2. Balasse, M. Potential biases in sampling design and interpretation of intra-tooth isotope analysis. International Journal of Osteoarchaeology. 13 (1-2), 3-10 (2003).
  3. Lee-Thorp, J. A. On isotopes and old bones. Archaeometry. 50 (6), 925-950 (2008).
  4. Clementz, M. T. New insight from old bones: stable isotope analysis of fossil mammals. Journal of Mammalogy. 93 (2), 368-380 (2012).
  5. Loftus, E., Roberts, P., Lee-Thorp, J. A. An isotopic generation: four decades of stable isotope analysis in African archaeology. Azania: Archaeological Research in Africa. 51 (1), 88-114 (2016).
  6. Ventresca Miller, A. R., Makarewicz, C. Isotopic approaches to pastoralism in prehistory: Diet, mobility, and isotopic reference sets. Isotopic Investigations of Pastoralism in Prehistory. , 1-14 (2018).
  7. Hollund, H. I., Ariese, F., Fernandes, R., Jans, M. M. E., Kars, H. Testing an alternative high-throughput tool for investigating bone diagenesis: FTIR in attenuated total reflection (ATR) mode. Archaeometry. 55 (3), 507-532 (2013).
  8. LeGeros, R. Z. Calcium phosphates in oral biology and medicine. Monographs in oral sciences. 15, 109-111 (1991).
  9. Lee-Thorp, J. L., Van Der Merwe, N. J. Carbon isotope analysis of fossil bone apatite. South African Journal of Science. 83 (11), 712-715 (1987).
  10. Cerling, T. E., Harris, J. M. Carbon isotope fractionation between diet and bioapatite in ungulate mammals and implications for ecological and paleoecological studies. Oecologia. 120 (3), 347-363 (1999).
  11. Koch, P. L. Isotopic study of the biology of modern and fossil vertebrates. Stable Isotopes in Ecology and Environmental Science. , 99-154 (2007).
  12. Nelson, S. J. . Wheeler’s Dental Anatomy, Physiology and Occlusion-E-Book. , (2014).
  13. Tsutaya, T., et al. From cradle to grave: multi-isotopic investigations on the life history of a higher-status female from Edo-period Japan. Anthropological Science. 124 (3), 185-197 (2016).
  14. Sponheimer, M., Passey, B. H., De Ruiter, D. J., Guatelli-Steinberg, D., Cerling, T. E., Lee-Thorp, J. A. Isotopic evidence for dietary variability in the early hominin Paranthropus robustus. Science. 314 (5801), 980-982 (2006).
  15. Lee-Thorp, J., Sponheimer, M. Three case studies used to reassess the reliability of fossil bone and enamel isotope signals for paleodietary studies. Journal of Anthropological Archaeology. 22 (3), 208-216 (2003).
  16. Zazzo, A. Bone and enamel carbonate diagenesis: a radiocarbon prospective. Palaeogeography, Palaeoclimatology, Palaeoecology. 416, 168-178 (2014).
  17. Sponheimer, M. . Isotopic paleoecology of the Makapansgat Limeworks fauna (Australopithecus africanus, South Africa). , (1999).
  18. Sponheimer, M., Lee-Thorp, J. A. Alteration of enamel carbonate environments during fossilization. Journal of Archaeological Science. 26 (2), 143-150 (1999).
  19. Roche, D., Ségalen, L., Balan, E., Delattre, S. Preservation assessment of Miocene-Pliocene tooth enamel from Tugen Hills (Kenyan Rift Valley) through FTIR, chemical and stable-isotope analyses. Journal of Archaeological Science. 37 (7), 1690-1699 (2010).
  20. Roberts, P., et al. Calling all archaeologists: guidelines for terminology, methodology, data handling, and reporting when undertaking and reviewing stable isotope applications in archaeology. Rapid Communications in Mass Spectrometry. , (2018).
  21. Snoeck, C., Pellegrini, M. Comparing bioapatite carbonate pre-treatments for isotopic measurements: Part 1-Impact on structure and chemical composition. Chemical Geology. 417, 394-403 (2015).
  22. Pellegrini, M., Snoeck, C. Comparing bioapatite carbonate pre-treatments for isotopic measurements: Part 2-Impact on carbon and oxygen isotope compositions. Chemical Geology. 420, 88-96 (2016).
  23. Wright, L. E., Schwarcz, H. P. Stable carbon and oxygen isotopes in human tooth enamel: identifying breastfeeding and weaning in prehistory. American Journal of physical anthropology. 106 (1), 1-18 (1998).
  24. Roberts, P., et al. Fruits of the forest: Human stable isotope ecology and rainforest adaptations in Late Pleistocene and Holocene (∼ 36 to 3 ka) Sri Lanka. Journal of human evolution. 106, 102-118 (2017).
  25. Zazzo, A., Balasse, M., Patterson, W. P. High-resolution δ13C intratooth profiles in bovine enamel: Implications for mineralization pattern and isotopic attenuation. Geochimica et Cosmochimica Acta. 69 (14), 3631-3642 (2005).
  26. Sydney-Zax, M., Mayer, I., Deutsch, D. Carbonate content in developing human and bovine enamel. Journal of dental research. 70 (5), 913-916 (1991).
  27. Rink, W. J., Schwarcz, H. P. Tests for diagenesis in tooth enamel: ESR dating signals and carbonate contents. Journal of Archaeological Science. 22 (2), 251-255 (1995).
  28. Szpak, P., Metcalfe, J. Z., Macdonald, R. A. Best practices for calibrating and reporting stable isotope measurements in archaeology. Journal of Archaeological Science: Reports. 13, 609-616 (2017).
  29. Wright, L. E., Schwarcz, H. P. Correspondence between stable carbon, oxygen and nitrogen isotopes in human tooth enamel and dentine: infant diets at Kaminaljuyu. Journal of Archaeological Science. 26 (9), 1159-1170 (1999).
  30. Schoeninger, M. J., Hallin, K., Reeser, H., Valley, J. W., Fournelle, J. Isotopic alteration of mammalian tooth enamel. International Journal of Osteoarchaeology. 13 (1-2), 11-19 (2003).

Play Video

Cite This Article
Ventresca Miller, A., Fernandes, R., Janzen, A., Nayak, A., Swift, J., Zech, J., Boivin, N., Roberts, P. Sampling and Pretreatment of Tooth Enamel Carbonate for Stable Carbon and Oxygen Isotope Analysis. J. Vis. Exp. (138), e58002, doi:10.3791/58002 (2018).

View Video