Summary

Inducción quirúrgica simple de pérdida auditiva conductiva con verificación mediante la visualización del otoscopio y la respuesta de golpe de golpe conductual en Rata

Published: October 26, 2019
doi:

Summary

Aquí, presentamos un protocolo para establecer una inducción de pérdida auditiva conductiva replicable a través de la punción quirúrgica de la membrana timpánica y la verificación por visualización del otoscopio y evaluación del comportamiento por golpe de aplauso.

Abstract

La hipoacusia conductiva (CHL) es una deficiencia auditiva prevalente en los seres humanos. El objetivo del protocolo es describir un procedimiento quirúrgico simple para inducir CHL en roedores. El protocolo demuestra CHL por punción de membrana timpánica. La verificación de la cirugía de CHL fue por examen de otoscopio y evaluación del comportamiento por respuesta de sobrescopio de aplausos, replicable y confiable, y son métodos simples para demostrar que se ha producido pérdida auditiva. El sencillo procedimiento de CHL es ventajoso debido a su reproducibilidad y flexibilidad para diferentes actividades en la investigación de pérdida auditiva. Las limitaciones de inducir CHL por un enfoque quirúrgico se asocian con la curva de aprendizaje para realizar el procedimiento quirúrgico y la confianza en el examen audiológico. Inducir una discapacidad auditiva por CHL permite estudiar fácilmente las manifestaciones neuronales y los resultados conductuales de la pérdida auditiva.

Introduction

La prevalencia de la pérdida auditiva en niños y adultos es de aproximadamente 19,5%1 y 15,2%2 respectivamente. Sin embargo, aproximadamente el 39,3% de todos los recién nacidos con un examen auditivo anormal no reciben tratamiento corrector según lo informado por los Centros para el Control de Enfermedades3. La pérdida auditiva es una condición ampliamente estudiada, y el roedor es un modelo robusto para estudiar trastornos normales relacionados con la audición y la audición4,5,6,7,8,9 ,10,11,12,13,14,15. Los trastornos auditivos como la hipoacusia conductiva (CHL) conducen a un aumento de la depresión sináptica a corto plazo en la corteza auditiva4,lo que da lugar a pendientes psicométricas más superficiales asociadas con umbrales de detección de modulación de frecuencia 5. Los modelos de pérdida auditiva conductiva por extracción quirúrgica/desplazamiento del malleus, la punción de la membrana timpánica (TM) o el tapón para los oídos se emplean fácilmente y permiten la inducción rápida del modelo de pérdida auditiva5,14 ,15,16,17,18. El objetivo del protocolo y método actual es demostrar un modelo CHL simple y reproducible en roedores.

El protocolo actual es barato (USD$300 con todas las herramientas), y fácilmente modificable para diferentes actividades de investigación. La rata ha tenido evaluaciones detalladas de la anatomía del oído medio19,20,21,22,23, enfoques quirúrgicos24, modelos en otitis media25, 26,27 y TM regeneración de pinchazos16,17,18,28,29,30, por lo que es un modelo ideal para estudiar pérdida auditiva. Aquí, un procedimiento de inducción de CHL simple se describe con la verificación por otoscopio y evaluación del comportamiento con respuesta de sobregolpe de aplausos en rata, que luego se puede utilizar para explorar secuencias adicionales de pérdida auditiva. El procedimiento de CHL es inducido por punción quirúrgica de la TM. La verificación del procedimiento CHL se realiza mediante visualización de otoscopio para determinar la ausencia de la TM. La evaluación del comportamiento se realiza mediante un aplauso manual de alto nivel de presión sonora (SPL) de decibelios (dB). Este método se ha aplicado previamente en una variedad de roedores. Es fácil de replicar, produce fuertes diferencias psicométricas y cambios en las respuestas fisiológicas neuronales4,5,16,17,18.

Protocol

El presente estudio y procedimientos fueron aprobados por los comités de ética de investigación animal de la Universidad de la Ciudad de Hong Kong, la Universidad de Hong Kong y el Departamento de Salud de la Región Administrativa Especial de Hong Kong. 1. Animales Utilice ratas Sprague-Dawley (SD) de dos meses (N .90, 200-250 g).NOTA: Los roedores fueron proporcionados por la Unidad de Animales de Laboratorio acreditada de la Universidad de Hong Kong. Mantener las …

Representative Results

El sencillo procedimiento de CHL se realizó en 90 ratas y de este grupo 2 tuvo sangrado significativo y 2 no tuvieron pérdida de audición al día siguiente, según lo evaluado por el contragolpe de aplausos conductuales. Estas cuatro ratas fueron descartadas. Las ratas deben descartarse como se describe por las razones en la discusión debido a complicaciones. Inducir la punción y/o el desplazamiento/eliminación de la TM (Figura 2B) provoca CHL, lo que r…

Discussion

Describimos una simple inducción quirúrgica de CHL con verificación utilizando la visualización del otoscopio y la respuesta de sobregolpe de aplausos conductuales en rata. Aquí demostramos el método en rata y anteriormente este método se ha aplicado a jerbos y ratones. El método se puede adoptar fácilmente a otros roedores. La inducción de CHL permite el estudio de una forma sutil de pérdida auditiva que se manifiesta en alteraciones corticales auditivas y hallazgos psicofísicos del comportamiento<sup class=…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Este trabajo fue apoyado en parte por el Consejo de Becas de Investigación de Hong Kong, Early Career Scheme, Project #21201217 a C. L., para el proyecto Brain mapping guided electrophysiology with applications in hearing and noise pollution research. Agradecemos a Posgrado en Ciencias Biomédicas, el Instituto de Neurobiología de la Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM), el Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (CONACyT) México por la Beca de Posgrado 578458 a FAM Manno.

Materials

Latex, polyvinyl or nitrile gloves AMMEX Use unpowdered gloves 8-mil
Micro spring scissors (see Fig. 1b) RWD Life Science S11035-08 8.0 cm total length, with 3.5mm cutting edge, or similar micro forceps. Standard tweezers with spring action will suffice
Otoscope mini 3000 HEINE  D-008.70.120M Standard LED otoscope will suffice
Rat or mouse JAX labs Any small rodent 
Small rodent cage Tecniplast 1284L Need two cages to separate CHL rodent from hearing rodent. If rodent are in direct contact with one-another, they will startle each other. Cage dimensions 365 x 207 x 140 mm, floor area: 530 cm2/82.15 in2

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Cite This Article
Manno, F. A. M., Manno, S. H. C., Ma, V., Barrios, F. A., Cho, W. C., Cheng, S. H., Lau, C. Simple Surgical Induction of Conductive Hearing Loss with Verification Using Otoscope Visualization and Behavioral Clap Startle Response in Rat. J. Vis. Exp. (152), e57993, doi:10.3791/57993 (2019).

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