Aqui, apresentamos um protocolo para estabelecer uma indução de perda auditiva condutora replicável por meio de punção cirúrgica da membrana de tympanic e verificação por visualização de otoscópio e avaliação comportamental por verino de gonorreia.
A perda auditiva condutiva (CHL) é um comprometimento auditivo prevalente em seres humanos. O objetivo do protocolo é descrever um procedimento cirúrgico simples para induzir CHL em roedores. O protocolo demonstra CHL por punção de membrana tympanic. A verificação da cirurgia de CHL foi por exame de otoscópio e avaliação comportamental por resposta ao vermão, tanto replicável quanto confiável, e são métodos simples para demonstrar que a perda auditiva ocorreu. O procedimento simples de CHL é vantajoso devido à sua reprodutibilidade e flexibilidade a diferentes atividades na pesquisa de perda auditiva. As limitações da indução de LCH por abordagem cirúrgica estão associadas à curva de aprendizagem para realizar o procedimento cirúrgico e a confiança no exame audiológico. Induzir uma deficiência auditiva por CHL permite que um estude prontamente as manifestações neurais e os resultados comportamentais da perda auditiva.
A prevalência da perda auditiva em crianças e adultos é de aproximadamente 19,5%1 e 15,2%2, respectivamente. No entanto, aproximadamente 39,3% de todos os recém-nascidos com triagem auditiva anormal não recebem tratamento corretivo conforme relatado pelo Centers for Disease Control3. A perda auditiva é uma condição amplamente estudada, e o roedor é um modelo robusto para estudar distúrbios normais relacionados à audição e audição4,5,6,7,8,9 ,10,11,12,13,14,15. Distúrbios auditivos como perda auditiva condutiva (LE) levam a um aumento da depressão sináptica de curto prazo no córtex auditivo4,o que resulta em inclinações psicométricas mais rasas associadas a limiares de detecção de modulação de frequência 5. Modelos de perda auditiva condutora por remoção/deslocamento cirúrgico do malleus, punção da membrana tympanic (TM) ou tampão de ouvido são facilmente empregados e permitem a rápida indução do modelo de perda auditiva5,14 ,15,16,17,18. O objetivo do protocolo e método atual é demonstrar um modelo CHL simples e reproduzível em roedores.
O protocolo atual é barato (US$ 300 com todas as ferramentas) e prontamente alterado para diferentes atividades de pesquisa. O rato teve avaliações detalhadas da anatomia do ouvido médio19,20,21,22,23, abordagens cirúrgicas24, modelos em otitis media25, 26,27 e regeneração de perfuração TM16,17,18,28,29,30,tornando-se um modelo ideal para estudar perda auditiva. Aqui, um procedimento simples da indução de CHL é descrito com verificação pelo otoscope e pela avaliação com resposta do startle do aplauso no rato, que então pode ser usado para explorar sequelas adicionais da perda de audição. O procedimento de LE é induzido pela punção cirúrgica do TM. A verificação do procedimento de CHL é realizada por visualização de otoscópio para determinar a ausência do TM. A avaliação comportamental é realizada por um alto nível de pressão sonora (DB) (SPL) palmas. Este método foi aplicado previamente em uma variedade de roedores. É fácil de replicar, produz diferenças psicométricas robustas e mudanças nas respostas fisiológicas neurais4,5,16,17,18.
Descrevemos uma simples indução cirúrgica de CHL com verificação usando visualização de otoscópio e resposta comportamental de verniz em ratos. Aqui demonstramos o método em rato e anteriormente este método foi aplicado a gerbils e camundongos. O método pode ser facilmente adotado para outros roedores. A indução da CHL permite o estudo de uma forma sutil de perda auditiva que se manifesta em alterações corticais auditivas e achados comportamentais psicofísicos4,<sup clas…
The authors have nothing to disclose.
Este trabalho foi apoiado em parte pelo Hong Kong Research Grants Council, Early Career Scheme, Project #21201217 a C. L., para o projeto Brain mapeamento eletrofisiologia guiada com aplicações em audição e pesquisa de poluição sonora. Agradecemos ao Posgrado en Ciencias Biomédicas, ao Instituto de Neurobiologiía da Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM), ao Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (CONACyT) México pela Bolsa de Pós-Graduação 578458 à FAM Manno.
Latex, polyvinyl or nitrile gloves | AMMEX | Use unpowdered gloves 8-mil | |
Micro spring scissors (see Fig. 1b) | RWD Life Science | S11035-08 | 8.0 cm total length, with 3.5mm cutting edge, or similar micro forceps. Standard tweezers with spring action will suffice |
Otoscope mini 3000 | HEINE | D-008.70.120M | Standard LED otoscope will suffice |
Rat or mouse | JAX labs | Any small rodent | |
Small rodent cage | Tecniplast | 1284L | Need two cages to separate CHL rodent from hearing rodent. If rodent are in direct contact with one-another, they will startle each other. Cage dimensions 365 x 207 x 140 mm, floor area: 530 cm2/82.15 in2 |