ラットにおける耳鏡可視化と行動拍手驚き応答を用いた検証による導電性難聴の単純な外科的誘導
1Instituto de Neurobiología,Universidad Nacional Autónoma de México, México, 2State Key Laboratory of Marine Pollution (SKLMP),City University of Hong Kong, Hong Kong, 3Department of Biomedical Sciences, College of Veterinary Medicine and Life Sciences,City University of Hong Kong, Hong Kong, 4Department of Physics,City University of Hong Kong, Hong Kong, 5Department of Clinical Oncology,Queen Elizabeth Hospital, Hong Kong, 6Department of Materials Science and Engineering,City University of Hong Kong, Hong Kong
Summary
ここでは、外科的鼓膜穿刺による複製導電性難聴誘導を確立するプロトコルを提示し、拍手驚きによる耳鏡可視化と行動評価による検証を行う。
Abstract
伝音難聴(CHL)は、ヒトで一般的な聴覚障害である。プロトコルの目的は、げっ歯類でCHLを誘導するための簡単な外科的処置を記述することです。プロトコルは、鼓膜穿刺によってCHLを示す。CHL手術の検証は、拍手驚くべき応答による耳鏡検査と行動評価によるものであり、複製性と信頼性の高い両方であり、難聴を実証する簡単な方法が生じた。簡単なCHLプロシージャは難聴の研究の異なった追求への再現性および柔軟性のために有利である。外科的アプローチによってCHLを誘導する限界は、外科的処置およびオーディオ検査における自信を行う学習曲線に関連している。CHLによる聴覚障害を誘発すると、難聴の神経症状や行動の結果を容易に研究することができます。
Introduction
小児と成人の難聴の有病率はそれぞれ約19.5%1%と15.2%2である。 しかし、異常聴力スクリーニングを受けた全新生児の約39.3%は、疾病管理センター3の報告に従って修復治療を受けていない。難聴は広く研究されている状態であり、げっ歯類は正常な聴覚および聴覚関連障害を研究するための堅牢なモデルである4,5,6,7,8,9 ,10,11,12,13,14,15.導電性難聴(CHL)などの聴覚障害は、聴覚皮質4における短期シナプスうつ病の増加につながり、周波数変調検出閾値に関連するより浅い心理測定勾配をもたらす5.マレウスの外科的除去/変位による導電性難聴モデル、鼓膜(TM)穿刺または耳栓が容易に採用され、難聴モデル5、14の迅速な誘導を可能にする,15,16,17,18.本プロトコルおよび方法の目的は、げっ歯類で簡単で再現性の高いCHLモデルを実証することです。
現在のプロトコルは安価で(すべてのツールで300ドル)、異なる研究の追求に容易に修正できます。ラットは中耳解剖学19、20、21、22、23、外科的アプローチ24、中耳炎媒体25のモデルの詳細な評価を有している。 26、27およびTM穿刺再生16、17、18、28、29、30 、研究に理想的なモデル難聴。ここでは、ラットにおけるクラップ驚き応答による耳鏡および行動評価による検証を行い、難聴の追加の後遺症を探索するために使用することができるという単純なCHL誘導手順について説明する。CHL処置はTMの外科的穿刺によって誘発される。CHL手順の検証は、TMの不在を判定するために耳鏡可視化によって行われる。行動評価は高デシベル(dB)音圧レベル(SPL)手拍子によって行われる。この方法は、以前に様々なげっ歯類に適用されています。複製が容易であり、強固な心理測定の違いと神経生理学的応答の変化を生み出す4,5,16,17,18.
Protocol
本研究と手続きは、香港市立大学、香港大学、香港特別行政区保健省の動物研究倫理委員会によって承認された。 1. 動物 2ヶ月のスプレイグ・ドーリー(SD)ラット(N = 90、200-250 g)を使用します。注:げっ歯類は、香港大学の認定実験動物ユニットによって提供されました。 実験動物研究ユニットで、ラットを一定の25°C温度と60~70%の湿度で維持します。…
Representative Results
単純なCHL処置は90匹のラットに対して行われ、このグループ2のうち有意な出血があり、2は行動拍手の驚きによって評価された翌日難聴を有しなかった。この4匹のラットは廃棄された。ラットは、合併症のために議論の理由によって説明されているように廃棄されるべきである。TM穿刺および/またはマレウス変位/除去(図2B)を誘導するとCHLが引き…
Discussion
ラットにおける耳鏡可視化と行動拍手驚き応答を用いた検証によるCHLの単純な外科的誘導について説明する。ここではラットに対する方法を実証し、以前はこの方法がガービルおよびマウスに適用された。この方法は、他のげっ歯類に容易に採用することができる。CHLの誘導は、聴覚皮質変化および心理物理学的行動所見4、5、16、17、18に<…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この研究は、香港研究助成協議会、早期キャリアスキーム、プロジェクト#21201217からC.L.、聴覚および騒音公害研究におけるアプリケーションを用いた脳マッピング誘導電気生理学によって部分的にサポートされました。我々は、ポストグラド・エン・シエンシアス・ビオメディカ、ナシオナル・アウトノマ・デ・メヒコ大学(UNAM)のニューロバイオロジー・インスティトゥート、コンセホ・ナシオナル・デ・シエンシア・イ・テクノロジア(CONACyT)に対するメディコに感謝する。
Materials
| Latex, polyvinyl or nitrile gloves | AMMEX | Use unpowdered gloves 8-mil | |
| Micro spring scissors (see Fig. 1b) | RWD Life Science | S11035-08 | 8.0 cm total length, with 3.5mm cutting edge, or similar micro forceps. Standard tweezers with spring action will suffice |
| Otoscope mini 3000 | HEINE | D-008.70.120M | Standard LED otoscope will suffice |
| Rat or mouse | JAX labs | Any small rodent | |
| Small rodent cage | Tecniplast | 1284L | Need two cages to separate CHL rodent from hearing rodent. If rodent are in direct contact with one-another, they will startle each other. Cage dimensions 365 x 207 x 140 mm, floor area: 530 cm2/82.15 in2 |
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Cite This Article
Manno, F. A. M., Manno, S. H. C., Ma, V., Barrios, F. A., Cho, W. C., Cheng, S. H., Lau, C. Simple Surgical Induction of Conductive Hearing Loss with Verification Using Otoscope Visualization and Behavioral Clap Startle Response in Rat. J. Vis. Exp. (152), e57993, doi:10.3791/57993 (2019).