Enterprise gold nanostaafjes kan worden gevangen in vloeistoffen en gedraaid bij kHz frequenties met behulp van cirkel-gepolariseerde optisch pincet. Invoering van instrumenten voor Brownian dynamics analyse en lichte scatteringspectroscopy leidt tot een krachtig systeem voor onderzoek en toepassing op talrijke gebieden van de wetenschap.
De mogelijkheid om te genereren en het meten van de rotatie en het koppel op nanoschaal is van fundamenteel belang zijn voor de studie en de toepassing van biologische en kunstmatige nanomotors en kan nieuwe wegen voor de eencellige analyse, studies van niet-evenwichts thermodynamica en mechanische bediening van nanoschaal systemen. Een facile manier om te rijden rotatie is het gebruik van gerichte circulair gepolariseerde laserlicht in optisch pincet. Met behulp van deze aanpak, worden metalen nanodeeltjes bediend als hoogefficiënte verstrooiing gestuurde roterende motor spinnen bij ongekende rotatie frequenties in water.
In dit protocol, wij een overzicht van de bouw en de exploitatie van cirkel-gepolariseerde optisch pincet voor nanoparticle rotatie en beschrijven van de instrumenten die nodig zijn voor het opnemen van de Brownse dynamiek en Rayleighverstrooiing van de gevangen deeltje. De roterende beweging en de verstrooiing spectra verstrekt onafhankelijke informatie over de eigenschappen van de nanoparticle en haar naaste omgeving. Het experimenteel platform heeft bewezen nuttig als een nanoscopische spoorbreedte van de viscositeit en de lokale temperatuur, voor het bijhouden van de morfologische veranderingen van nanostaafjes en moleculaire coatings, en als een transducer en sonde van photothermal en thermodynamische processen.
De methoden die in dit artikel wordt gerepliceerd die worden gebruikt in onze vorige werk1 nanoschaal photothermal effecten beïnvloeden licht gestuurde gouden nanostaafjes roterende motoren te bestuderen. Varianten van het experimenteel platform is gebruikt in verschillende verwante publicaties2,3,4,5,6,7,,8, 9.
Optisch pincet worden veel gebruikt voor het beheersen van positie, kracht en dynamiek van de lineaire overdracht op kleine lengte schalen in natuurkunde, biologie en engineering10,11,12,13,14 . Impulsmoment gedragen door circulair gepolariseerd licht kan worden ingezet voor extra regeltechniek omdat het koppel op een continu overbrengen gevangen objecten15. Door het combineren van optische lineaire en impulsmoment overdracht, is het dan mogelijk om te bouwen van niet-invasieve roterende nanomotors met potentieel voor uiteenlopende toepassingen, zoals drug delivery in afzonderlijke cellen16,17, nanoschaal chirurgie18, en actieve nanofluidics19, onder anderen.
Met behulp van metallisch nanodeeltjes als onderwerp van lichte gedreven manipulatie, kan een profiteren van de voordelen van gelokaliseerde oppervlakte plasmon resonanties (LSPR van), waarmee grote optische kruissecties, hoge gevoeligheid voor veranderingen in het milieu, en grote veld verbeteringen20,21,22,23. Dit heeft geleid tot een schat aan studies aan de grens tussen plasmonics en optische manipulatie8,24,25,26,27. De sterke interactie van licht-kwestie geboden door LSPR heeft ons het ontwerpen van een platform waar circulair gepolariseerde laser pincet geschikt zijn voor het rijden van gouden nanostaafjes te draaien op record rotatie frequenties in water2ingeschakeld. Door het bijhouden van de Brownse beweging van een roterende nanostaafjes, kan gedetailleerde informatie over de omgeving en de temperatuur worden verkregen van3,5. Gelijktijdige spectroscopische analyse biedt een extra onafhankelijke informatiekanaal voor de analyse van de lokale temperatuur en de morfologische stabiliteit van de roterende nanostaafjes1. Een aantal systemen en configuraties zijn gebruikt voor de studie en toepassing van de roterende beweging in optisch pincet, genereren van belangrijke inzichten binnen het veld15,28,29,30 , 31 , 32. echter, de meeste van deze studies hebben behandeld objecten verschillende micrometer in diameter terwijl een enkele nanostaafjes toegang tot het nanometer grootte regime geeft. Bovendien, wanneer ze worden gebruikt als de roterende nanomotor, koppel goud is efficiënt overgedragen voornamelijk via verstrooiing2,33. Dit vermindert het risico van oververhitting van de gevangen deeltje3,34,35.
In de volgende methode schetsen we de benodigde stappen voor het bouwen van een systeem dat kan efficiënt optische overlapping en rotatie van metalen nanodeeltjes. De gouden nanostaafjes beschouwd in deze studies hebben hoog verstrooiing kruissecties, en de stralingsdruk blijkt te zijn sterker dan de vervangend kleurovergang kracht in de richting van de voortplanting. Als u wilt nog steeds beperken de deeltjes in 3D, gebruiken we de kracht evenwicht tussen Coulomb afkeer van een glazen oppervlak en de laser verstrooiing kracht in de richting van de voortplanting. Deze 2D-overlapping configuratie het bereik van te onderscheppen deeltjes, in vergelijking met standaard 3D optisch pincet, sterk uitgebreid en kan gemakkelijk worden gecombineerd met donker-veld optische beeldvorming en spectroscopie.
Een gevangen en draaiende metalen nanoparticle wisselwerking met zijn omgeving, en gedetailleerde informatie over deze interactie bevindt zich in de beweging en de spectrale eigenschappen. Na het beschrijven hoe de bouw van de circulair gepolariseerde optisch pincet, we daarom ook een overzicht hoe te integreren instrumentatie voor indringende roterende dynamiek en voor het meten van Rayleighverstrooiing spectra in de experimentele opzet. Het resultaat is een veelzijdig platform voor studies van nanoschaal rotatie verschijnselen in natuurkunde, scheikunde en biologie.
Dit protocol wordt ervan uitgegaan dat de onderzoeker toegang tot geschikt colloïdaal metalen nanodeeltjes, bij voorkeur één kristallijne gouden nanostaafjes heeft. Gouden nanostaafjes kan worden gekocht bij gespecialiseerde bedrijven of gesynthetiseerd in huis met behulp van NAT-chemie methoden. De nanostaafjes gebruikt in onze experimenten werden gemaakt door de zaad-gemedieerde groei-methode, beschreven in gij et al. 201336. Het is gunstig als de morfologie en de optische eigenschappen van de nanodeeltjes goed gekenmerkt worden, bijvoorbeeld met behulp van scanning elektronen microscopie (SEM) en optische extinctie metingen. Figuur 1 toont gegevens opgenomen van dergelijke metingen voor representatieve nanostaafjes typen1.
Een overzicht van het protocol is als volgt: In de eerste sectie, beschrijven we de bouw van de optisch pincet gebaseerd op cirkelvormige polarisatie. In de tweede sectie beschrijven we hoe om informatie te extraheren uit de nanomotor door het opnemen van de dynamiek van de rotatie en verstrooiing eigenschappen. De frequentie van de rotatie en de rotatie Brownse beweging van de gevangen deeltje wordt gemeten met behulp van foton correlatie spectroscopie door projecteren terugverstrooide laserlicht gefilterd door een lineaire polarisator op een snelle single-pixel detector3. Door het aanbrengen van de gegevens naar een theoretische autocorrelatiefunctie, kunnen zowel de rotatie-frequentie en het tijdstip van verval van de Brownse rotatiediffusie uitgepakte2,3. De optische eigenschappen van de gevangen en roterende nanoparticle worden gemeten met behulp van donkere veld spectroscopie, die voorziet in aanvullende informatie over het deeltje en haar omgeving. In het derde deel beschrijven we de experimentele procedure voor de vangst en de rotatie van gouden nanostaafjes.
Het protocol beschreven tot op dit punt is een eenvoudig pad naar een goed functionerend systeem van circulair gepolariseerde optisch pincet voor nanoparticle rotatie. Echter problemen soms die extra aandacht vraag. In de vierde sectie schetsen we een paar van de gemeenschappelijke problemen die wij hebben ondervonden en hoe aan te pakken hen. Deze omvatten van kwesties in verband met optische eigenschappen nanoparticle leidt tot slechte val stabiliteit (4.1), lage frequenties van de rotatie toe te schrijven aan suboptimaal circulair polarisatie veroorzaakt door beamsplitter dubbele breking (4.2), steken van nanodeeltjes op het glasoppervlak Als gevolg van onvoldoende Coulomb repulsion (4.3) en afwijking van het karakteristieke autocorrelatie signaal (4.4).
De optische overlapping setup beschreven in dit protocol is opgebouwd rond een commerciële omgekeerde Microscoop en gebruikt rode laserlicht. Echter, de technieken beschreven zijn veelzijdig en kunnen worden gebruikt om te bouwen van circulair gepolariseerde optisch pincet rond de meest commerciële of huis-gebouwde microscopen, beide rechtop en omgekeerd, met slechts geringe wijzigingen. De golflengte van de laser overlapping kan worden gekozen binnen een brede zichtbaar–-NIR-spectrum, zo lang als de rest van de optische onderdelen en detectoren zijn functioneel bij deze specifieke golflengte. Echter bij het kiezen van een golflengte van de laser, moeten de grootte en de spectrale nabijheid resonanties van de deeltjes worden gemanipuleerd worden beschouwd omdat dit zal invloed hebben op de optische overlapping krachten en rotatie prestaties2,5, de omvang van photothermal effecten1, en de overlapping stabiliteit26. We hebben eerder succesvol samengewerkt met circulair gepolariseerde laser pincet met behulp van laser golflengten van 660, 785, 830 en 1064 nm.
Een van de belangrijkste onderdelen van de optische overlapping setup is de doelstelling van de Microscoop. Het doel van dit protocol is een droge doelstelling met NB = 0.95. Het gebruik van een droge doelstelling is experimenteel een eenvoudiger uitvoering van de installatie; het leidt echter tot optische aberraties als gevolg van refractie in de steekproef cel interfaces. In het onderhavige geval is het resultaat een iets grotere nadruk plek (~1.2 µm) vergeleken met de diffractie limiet (~0.4 µm), maar hierdoor de algemene of roterende prestaties van het platform niet aanzienlijk gewijzigd. In principe, kan een breed scala van Microscoop doelstellingen worden gebruikt, mits dat ze hebben goede transmissie op de overlapping golflengte, goede polarisatie onderhoud en lang genoeg afstand om uit te voeren van de overlapping door middel van een Microscoop cover slip en een laagje water. In het geval van 2D overlapping kunnen de waarde N.V.T. relatief laag, waarop maakt het hele experiment eenvoudiger en schoner circulair polarisatie in de focus is bepaald. Hogere machten van de laser kunnen echter vereist dan in het geval van een hoge doelstelling NA. In onze ervaring, de beste prestaties voor overlapping, rotatie en donker-veld spectroscopie wordt verkregen met doelstellingen met NA 0,7-0.95, maar het is mogelijk om te gebruiken zowel lagere als hogere nb doelstellingen.
Voor het verkrijgen van goede foton correlatie metingen van de roterende beweging, is een snelle single-pixel detector nodig. Kies een detector met een bandbreedte van minstens twee, liefst tienmaal, hoger dan de frequentie van de verwachte rotatie vermenigvuldigd met de vorm ontaarding factor en hoge gevoeligheid bij de golflengte van de overlapping gebruikt. Versterkte Si fotodetectoren, één foton tellen APDs, en PMTs zijn met succes in verschillende opstellingen in onze laboratoria gebruikt. Extra informatie, bijvoorbeeld over val stijfheid, kan worden verkregen door te meten en analyseren van deeltje translationeel verplaatsing met behulp van gevestigde technieken zoals macht spectrale analyse5. Een aantal eerdere publicaties beschrijven verschillende varianten van deze techniek38,39. DF spectroscopie kan worden uitgevoerd met behulp van een breed scala gratis-ruimte of glasvezel combinatie spectrometers en de keuze moet berusten op de spectraal bereik en golflengte en temporele resolutie die nodig zijn voor de geplande studie.
Wanneer u een overlapping-experiment uitvoert, geeft extra deeltjes de val per ongeluk. Dit kan worden gedetecteerd door het toezicht op de frequentie van de rotatie, die sterk als gevolg van de verstoring zal schommelen. Visuele inspectie door DF microscopie kan worden gebruikt om te controleren of de aanwezigheid van een extra deeltje, in welk geval de fase kan worden verplaatst om te voorkomen dat verdere verstoring of het experiment moet opnieuw worden gestart.
Het hierboven beschreven stelsel is een eenvoudige en efficiënte manier te realiseren van 2D opsluiting en draaien van metalen nanodeeltjes. Echter voor sommige toepassingen, de extra mate van vrijheid voor manipulatie die wordt geleverd met 3D overlapping is belangrijk, en de huidige configuratie is daarom een beperking. 3D opsluiting en rotatie kunnen echter haalbaar met behulp van teeltmateriaal tegen laser pincet of meer exotische overlapping configuraties.
Hoewel de parameters van het deeltje en systeem hier besproken kunnen worden geoptimaliseerd om photothermal verhitting tot onder ~ 15 K4, kunnen de temperatuurstijging Enterprise excitatie van metalen nanodeeltjes gekoppeld problematisch in bepaalde toepassingen. Een mogelijke route naar verdere vermindering van de warmte is het gebruik van hoge-index diëlektrische nanodeeltjes in plaats van Enterprise deeltjes. Zulke particles ondersteunen van sterke Mie-achtige verstrooiing resonanties maar tegelijkertijd vertonen lage intrinsieke absorptie coëfficiënten. We zijn onlangs geweest kundig voor vervaardiging van colloïdale resonant Si nanodeeltjes die nuttig kan zijn in dit opzicht40,41.
The authors have nothing to disclose.
Dit werk werd gesteund door de Knut en Alice Wallenberg Foundation, de Zweedse Raad voor het onderzoek en het Chalmers gebied van Advance nanowetenschap en nanotechnologie.
Gold nanoparticles | Purchased or home-grown | ||
Commersial inverted microscope | Nikon | Eclipse TI | |
Trapping laser | Cobolt | Flamenco 05-01 | 660 nm |
Objective | Nikon | CFI Plan Apo Lambda 40X | |
Laser safety googles | Thorlabs | LG4 | |
Assorted optomechanical components for mounting optics. | A range of mounts, posts and components from any company | ||
Lens 1 Keplarian telescope | Thorlabs | AC254-035-A-ML | |
Lens 2 Keplarian telescope | Thorlabs | LA1725-A-ML | |
Silver coated mirrors | Thorlabs | PF10-03-P01 | |
Kinematic mirror mounts | Thorlabs | KM100 | |
Translation stage | Thorlabs | PT1/M | Quantity: 2 |
50/50 R/T Beamsplitter | Chroma | 21000 | |
CMOS camera | Andor | Zyla 5.5 | |
Quarter waveplate (QWP, λ/4) | Thorlabs | AQWP05M-600 | |
Power meter | Thorlabs | PM100USB | |
Photodiode Power Sensors | Thorlabs | S121C | |
Linear polarizer | Thorlabs | LPVIS050 | For laser polarization measurement |
360° rotation mount | Thorlabs | RSP1/M | |
Half waveplate (HWP, λ/2) | Thorlabs | AHWP05M-600 | Used if polarization is not sufficient with only QWP |
Oil DF condenser | Nikon | C-DO Dark Field Condenser Oil | |
30/70 R/T Beamsplitter | Chroma | 21009 | |
Fast Si detector | Thorlabs | PDA36A-EC | |
Data Acquisition Module | National Instruments | USB-6361 | |
Fiber 400 µm core size | Thorlabs | M74L01 | |
xy-translation mount | Thorlabs | LM1XY/M | |
Linear polarizer | Thorlabs | LPVIS050 | |
Spectrometer | Princeton Instruments | IsoPlane SCT320 | |
CCD camera for spectrometer | Princeton Instruments | PyLoN | |
Notch filter | Semrock | NF03-658E-25 | |
Notch filter | Thorlabs | NF658-26 | |
Ultrasonic cleaner bath | Branson | Branson 3510 | |
Microscope slide | Ted Pella | 260202 | |
No. 1.5 Coverslips | VWR | 630-2873 | |
Aceton | |||
Isopropanol | |||
Basic detergent | Hellma | Hellmanex III | Cleaning if particle sticking is an issue |
Secure-Seal Spacer | Thermo Fisher | S24735 | Spacer tape with hole, for making sample cell |
Immersion Oil | Zeiss | 444960-0000-000 | |
PS beads | Microparticles GmbH | PS-R-5.0 | |
Spectrophotometer | Agilent | Cary 5000 UV-Vis-NIR | |
SEM | Zeiss | Ultra 55 FEG SEM | |
Tweezers | Any brand |