يمكن المحاصرين في السوائل nanorods الذهب plasmonic واستدارة ترددات كيلوهرتز استخدام ملاقط بصرية الاستقطاب دائري. إدخال أدوات لتحليل ديناميات براونية والخفيفة سكاتيرينجسبيكتروسكوبي يؤدي إلى نظام قوي للبحوث والتطبيقات في مجالات عديدة من العلوم.
إمكانية توليد وقياس الدوران والعزم على النانو هو من المصلحة الأساسية لدراسة وتطبيق نانوموتورس البيولوجية ومصطنعة وقد توفر طرق جديدة نحو تحليل خلية مفردة، والدراسات المتعلقة بعدم التوازن الديناميكا الحرارية، والميكانيكية يشتغل نظم النانومترية الحجم. طريقة سهلة لدوران محرك الأقراص استخدام ضوء الليزر مستقطبة دائريا مركزة في ملاقط بصرية. باستخدام هذا النهج، يمكن أن تعمل الجسيمات النانوية المعدنية ككفاءة عالية المحركات الدوارة يحركها نثر الغزل في ترددات التناوب لم يسبق لها مثيل في المياه.
في هذا البروتوكول، الخطوط العريضة لتشييد وتشغيل الاستقطاب دائري ملاقط بصرية للتناوب نانوحبيبات، ووصف الأجهزة اللازمة لتسجيل براونية ديناميات ونثر رايليغ الجسيمات المحاصرين. الحركة الدورانية والأطياف ونثر معلومات مستقلة عن الخصائص نانوحبيبات ومحيطها المباشر. منهاج العمل التجريبية قد أثبتت أنها مفيدة كمقياس نانومترى اللزوجة ودرجة الحرارة المحلية، لتعقب التغييرات الشكلية nanorods والطلاء الجزيئية، ومحول والتحقيق فوتوثيرمال والعمليات الحرارية.
طرق عرض في هذه المقالة يتطابق تلك المستخدمة في أعمالنا السابقة العمل1 لدراسة آثار photothermal النانو التأثير على المحركات الدوارة يحركها الضوء نانورود الذهب. وقد استخدمت المتغيرات منهاج تجريبي في عدة منشورات ذات صلة2،3،4،5،6،،من78، 9.
ملاقط بصرية تستخدم على نطاق واسع للسيطرة على نقل الموقف والقوة والزخم الخطي في جداول طول الصغيرة في الفيزياء وعلم الأحياء، والهندسة10،11،،من1213،14 . ويمكن توظيف الزخم الزاوي بضوء مستقطب دائريا لمراقبة حركة إضافية نظراً لأنه باستمرار نقل عزم الدوران إلى كائنات المحاصرين15. من خلال الجمع بين نقل الخطي والزخم الزاوي البصرية، من الممكن ثم بناء غير الغازية نانوموتورس دوارة مع إمكانات لتطبيقات متنوعة، مثل إيصال الأدوية إلى خلايا مفردة16،17، النانو جراحة18، ونشط نانوفلويديكس19، بين أمور أخرى.
باستخدام الجسيمات النانوية المعدنية كموضوع التلاعب مدفوعة الخفيفة، واحد يمكن أن تستغل مزايا الأصداء مأكل مثل الطحين السطحية المترجمة (‘s)، التي توفر المقاطع العرضية البصرية الكبيرة، وحساسية عالية للتغيرات البيئية، وميدان كبير تحسينات20،21،،من2223. وادي ذلك إلى ثروة دراسات على الحدود بين plasmonics والتلاعب البصري8،24،25،،من2627. تفاعل الضوء-المسألة قوية قدمها LSPR مكننا من تصميم منصة قادرة على قيادة نانورودس الذهب لزيادة ونقصان في ترددات سجل التناوب في الماء2فيها ملاقط الليزر مستقطب دائري. من خلال تتبع البراونية من نانورود الدورية، معلومات مفصلة حول البيئة ودرجة الحرارة يمكن الحصول على3،5. التحليل spectroscopic المتزامن يوفر قناة معلومات مستقلة إضافية لتحليل درجات الحرارة المحلية واستقرار المورفولوجية نانورود الدورية1. وقد استخدمت مجموعة من النظم والتكوينات لدراسة وتطبيق الحركة الدوارة في ملاقط بصرية، توليد الأفكار الهامة داخل الحقل15،28،،من2930 , 31 , 32-ومع ذلك، معظم هذه الدراسات تعاملت مع كائنات عدة ميكرومتر في القطر في حين نانورود واحد يتيح الوصول إلى نظام حجم نانومتر. وعلاوة على ذلك، عندما الذهب نانورودس تستخدم نانوموتور دوارة، عزم الدوران كفاءة نقل أساسا عن طريق نثر2،33. وهذا يقلل من خطر ارتفاع درجة حرارة الجسيمات المحاصرين3،،من3435.
في الأسلوب التالي، نحن تحديد الخطوات اللازمة لبناء نظام قادر على تعويض بصري كفاءة وتناوب الجسيمات النانوية المعدنية. Nanorods الذهب التي نظرت في هذه الدراسات العالية التشتت المقاطع العرضية، وضغط الإشعاع تتحول إلى أن تكون أقوى من قوة مكافحة التدرج في اتجاه نشر. لما زالت تحصر الجسيمات في 3D، فنحن نستخدم توازن القوة بين النفور كولومب من سطح زجاج وقوة الليزر ونثر في اتجاه نشر. هذا التكوين في 2D-محاصرة يوسع إلى حد كبير نطاق الجسيمات يمكن تتبعه، مقارنة بملاقط بصرية ثلاثية الأبعاد القياسية، وأنه يمكن دمجها بسهولة مع الظلام-ميدان التصوير البصري والتحليل الطيفي.
نانوحبيبات معدنية المحاصرين والتناوب ويتفاعل مع بيئتها، وترد معلومات مفصلة عن هذا التفاعل في الحركة والخواص الطيفية. بعد تصف كيفية بناء ملاقط بصرية مستقطب دائري، فإننا لذلك أيضا مخطط كيفية دمج الأجهزة لاستكشاف الديناميات التناوب وقياس أطياف رايليغ نثر في الإعداد التجريبية. والنتيجة منصة متعددة الاستخدامات لدراسات الظواهر التناوب النانو في الفيزياء والكيمياء وعلم الأحياء.
يفترض هذا البروتوكول أن الباحث الوصول إلى مناسبة الغروية المعدنية جسيمات نانوية، واحد يفضل nanorods الذهب بلورية. يمكن شراؤها من الشركات المتخصصة nanorods الذهب أو تصنيعه في المنزل باستخدام طرق كيمياء رطبة. وأدلى نانورودس المستخدمة في تجاربنا نمو البذور بوساطة الطريقة الموضحة في يي et al. 36من عام 2013. ومن المفيد إذا مورفولوجيا والخصائص البصرية لجسيمات نانوية كذلك تتسم، على سبيل المثال باستخدام المسح الضوئي المجهر الإلكتروني (SEM) والقياسات الضوئية الانقراض. يعرض الشكل 1 البيانات المسجلة من هذه القياسات للممثل نانورود أنواع1.
مخطط تفصيلي للبروتوكول على النحو التالي: في القسم الأول، نحن تصف بناء ملاقط بصرية تقوم على الاستقطاب الدائري. في القسم الثاني، ونحن تصف كيفية استخراج المعلومات من نانوموتور عن طريق تسجيل في ديناميات التناوب وخصائص تشتت. تواتر التناوب والبراونيه التناوب الجسيمات المحاصرين يقاس فوتون ارتباط التحليل الطيفي باستخدام ضوء الليزر المستطار إسقاط تصفيتها من خلال المستقطب خطي على كشف سريع واحد بكسل3. باحتواء البيانات إلى دالة ترابط تلقائي نظرية، يمكن كلا من تواتر التناوب والوقت تسوس نشر براونية التناوب المستخرجة2،3. يتم قياس الخصائص البصرية نانوحبيبات المحاصرين والدورية باستخدام التحليل الطيفي الحقل المظلم، الذي يقدم معلومات تكميلية عن الجسيمات وبيئتها. في القسم الثالث، يصف لنا الإجراء التجريبي لمحاصرة وتناوب nanorods الذهب.
أن بروتوكول وصف حتى هذه النقطة مسار مباشر لنظام استقطاب دائري ملاقط بصرية يعمل للتناوب نانوحبيبات. ومع ذلك، في بعض الأحيان تنشأ قضايا هذا الطلب اهتمام إضافي. في القسم الرابع، فإننا مخطط عدد قليل من المشاكل الشائعة التي واجهتنا وكيفية التصدي لها. هذه تشمل مسائل تتصل بالخصائص البصرية نانوحبيبات مما يؤدي إلى استقرار فخ الفقراء (4.1)، وانخفاض ترددات التناوب بسبب الاستقطاب الدائري الأمثل الناجم عن إنكسار مزدوج beamsplitter (4.2)، تخرج من جسيمات نانوية على سطح الزجاج بسبب عدم كفاية النفور كولومب (4.3)، والانحراف عن الإشارات المميزة ترابط تلقائي (4.4).
ويتمحور حول مجهر مقلوب تجارية الملائمة البصرية الإعداد المبينة في هذا البروتوكول ويستخدم ضوء الليزر الأحمر. ومع ذلك، الأساليب المبينة تنوعاً ويمكن استخدامها لبناء دائري الاستقطاب ملاقط بصرية حول المجاهر الأكثر تجارية أو الصنع، كلا تستقيم ومقلوب، مع فقط طفيف التعديلات. يمكن اختيار الطول الموجي الليزر الملائمة داخل طائفة نير مرئية واسعة–، ما دامت بقية المكونات البصرية وأجهزة كشف الوظيفية في هذا الطول الموجي محددة. ومع ذلك، عند اختيار طول موجه ليزر، حجم ومحيط الطيفية للأصداء الجسيمات معالجته ينبغي نظراً لأن هذا سيؤثر على القوات الملائمة البصرية وتناوب الأداء2،5، حجم الآثار فوتوثيرمال1، و الاستقرار الملائمة26. سبق عملنا بنجاح مع ملاقط الليزر الاستقطاب دائري باستخدام موجات ليزر 660، 785، 830 و 1064 نانومتر.
واحدة من أهم مكونات برنامج الإعداد الملائمة البصرية هو الهدف المجهر. والهدف من هذا البروتوكول هدف جافة مع نا = 0.95. استخدام الجاف والهدف تجريبيا تحقيق أبسط من الإعداد؛ ومع ذلك، أنه يؤدي إلى الانحرافات البصرية بسبب الانكسار في الواجهات خلية العينة. في هذه الحالة، والنتيجة هي بقعة تركيز قليلاً موسع (~1.2 ميكرومتر) بالمقارنة مع الحد حيود (~0.4 ميكرومتر)، ولكن هذا لا يغير إلى حد كبير أداء عامة أو الدوارة لمنهاج العمل. في الرئيسية، يمكن أن تستخدم مجموعة واسعة من الأهداف المجهر، شريطة أن تكون لدى انتقال جيدة في الطول الموجي الملائمة وصيانة جيدة الاستقطاب والمسافة العمل طويلة بما يكفي لأداء تعويض عن طريق كشف الغطاء مجهر وطبقة من المياه. في حالة تعويض اللون في 2D، يمكن نا منخفضة نسبيا، مما يجعل هذه التجربة كاملة أبسط ويوفر نظافة الاستقطاب الدائري في التركيز. ومع ذلك، قد تكون أعلى الليزر القوى المطلوبة مما في حالة هدفا نا عالية. في تجربتنا، أفضل أداء لمحاصرة، التحليل الطيفي التناوب والظلام–حقل يتم الحصول عليها مع الأهداف مع نا 0.7-0.95، ولكن من الممكن استخدام أهداف نا أقل، فضلا عن ارتفاع.
للحصول على فوتون جيدة القياسات الارتباط من دوار الحركة، هناك حاجة إلى جهاز كشف سريع واحد بكسل. اختر جهاز كشف مع عرض النطاق ترددي اثنين على الأقل، يفضل أن تكون أعلى بعشرة إضعاف، مما تواتر التناوب المتوقعة مضروبة في معامل الانحطاط الشكل وحساسية عالية في الطول الموجي الملائمة المستخدمة. وقد استخدمت تضخيم Si نظريتهم، فوتون واحد عد APDs، وبمتس بنجاح في الأجهزة المختلفة في مختبراتنا. يمكن الحصول على معلومات إضافية، على سبيل المثال في فخ صلابة، بقياس وتحليل الجسيمات التشرد متعدية باستخدام تقنيات راسخة مثل قوة التحليل الطيفي5. عدد من المنشورات السابقة وصف أنواع مختلفة من هذا الأسلوب38،39. يمكن إجراء التحليل الطيفي مدافع باستخدام واسعة نطاق مجاناً-مساحة أو الألياف إلى جانب مطيافات والاختيار ينبغي أن تستند على النطاق الطيفي والطول الموجي والأزمنة اللازمة لدراسة المخطط لها.
جزيئات إضافية بطريق الخطأ عند إجراء تجربة ملائمة، قد أدخل في الفخ. هذا ويمكن الكشف عن طريق رصد تواتر التناوب، الذي سوف تتقلب بشدة سبب الاضطرابات. الفحص البصري بالفحص المجهري مدافع يمكن استخدامها للتحقق من وجود الجسيمات إضافية، وفي هذه الحالة يمكن نقل المرحلة لتجنب المزيد من الاضطرابات أو التجربة يحتاج إلى إعادة تشغيل.
النظام المذكور أعلاه وسيلة بسيطة وفعالة لتحقيق الولادة 2D وتناوب الجسيمات النانوية المعدنية. ومع ذلك، لبعض التطبيقات، درجة الحرية الزائدة للتلاعب الذي يأتي مع تعويض 3D مهم، والتكوين الحالي لذلك حد. بيد الولادة 3D والتناوب قد تكون قابلة للتحقيق باستخدام نشر مضادة ملاقط الليزر أو التكوينات الملائمة أكثر غرابة.
على الرغم من أن يمكن أن يكون الأمثل المعلمات الجسيمات ونظام مناقشتها هنا للحد من فوتوثيرمال التدفئة إلى أسفل ك ~ 154، الزيادة في درجات الحرارة المرتبطة بالإثارة plasmonic من الجسيمات النانوية المعدنية يمكن أن يكون مشكلة في بعض التطبيقات. مسار ممكن نحو مزيد من الخفض في الحرارة استخدام جسيمات نانوية عازل عالي-فهرس بدلاً من جسيمات plasmonic. هذه الجسيمات دعم قوية من نوع مي نثر الأصداء ولكن في نفس الوقت يحمل معاملات امتصاص الجوهرية منخفضة. كنا مؤخرا قادرة على تصنيع الغروية nanoparticles Si الرنانة التي قد تكون مفيدة في هذا الصدد40،41.
The authors have nothing to disclose.
هذا العمل أيده كنوت ومؤسسة والنبرغ أليس، مجلس البحوث السويدية ومنطقة تشالمرز “علم مسبق” وتكنولوجيا النانو.
Gold nanoparticles | Purchased or home-grown | ||
Commersial inverted microscope | Nikon | Eclipse TI | |
Trapping laser | Cobolt | Flamenco 05-01 | 660 nm |
Objective | Nikon | CFI Plan Apo Lambda 40X | |
Laser safety googles | Thorlabs | LG4 | |
Assorted optomechanical components for mounting optics. | A range of mounts, posts and components from any company | ||
Lens 1 Keplarian telescope | Thorlabs | AC254-035-A-ML | |
Lens 2 Keplarian telescope | Thorlabs | LA1725-A-ML | |
Silver coated mirrors | Thorlabs | PF10-03-P01 | |
Kinematic mirror mounts | Thorlabs | KM100 | |
Translation stage | Thorlabs | PT1/M | Quantity: 2 |
50/50 R/T Beamsplitter | Chroma | 21000 | |
CMOS camera | Andor | Zyla 5.5 | |
Quarter waveplate (QWP, λ/4) | Thorlabs | AQWP05M-600 | |
Power meter | Thorlabs | PM100USB | |
Photodiode Power Sensors | Thorlabs | S121C | |
Linear polarizer | Thorlabs | LPVIS050 | For laser polarization measurement |
360° rotation mount | Thorlabs | RSP1/M | |
Half waveplate (HWP, λ/2) | Thorlabs | AHWP05M-600 | Used if polarization is not sufficient with only QWP |
Oil DF condenser | Nikon | C-DO Dark Field Condenser Oil | |
30/70 R/T Beamsplitter | Chroma | 21009 | |
Fast Si detector | Thorlabs | PDA36A-EC | |
Data Acquisition Module | National Instruments | USB-6361 | |
Fiber 400 µm core size | Thorlabs | M74L01 | |
xy-translation mount | Thorlabs | LM1XY/M | |
Linear polarizer | Thorlabs | LPVIS050 | |
Spectrometer | Princeton Instruments | IsoPlane SCT320 | |
CCD camera for spectrometer | Princeton Instruments | PyLoN | |
Notch filter | Semrock | NF03-658E-25 | |
Notch filter | Thorlabs | NF658-26 | |
Ultrasonic cleaner bath | Branson | Branson 3510 | |
Microscope slide | Ted Pella | 260202 | |
No. 1.5 Coverslips | VWR | 630-2873 | |
Aceton | |||
Isopropanol | |||
Basic detergent | Hellma | Hellmanex III | Cleaning if particle sticking is an issue |
Secure-Seal Spacer | Thermo Fisher | S24735 | Spacer tape with hole, for making sample cell |
Immersion Oil | Zeiss | 444960-0000-000 | |
PS beads | Microparticles GmbH | PS-R-5.0 | |
Spectrophotometer | Agilent | Cary 5000 UV-Vis-NIR | |
SEM | Zeiss | Ultra 55 FEG SEM | |
Tweezers | Any brand |