Aqui, apresentamos um protocolo de microescala para processamento de amostras de grãos e para incorporar esta abordagem microescala em um pipeline de analítico de alta produtividade. Esta é uma adaptação de taxa de transferência maior de protocolos disponíveis atualmente.
O milho é uma colheita de grão importante nos Estados Unidos e em todo o mundo. No entanto, grãos de milho devem ser processados antes do consumo humano. Além disso, as características de composição e processamento de grãos inteiros variam entre híbridos de milho e podem afetar a qualidade do produto final processado. Portanto, a fim de produzir produtos mais saudáveis de alimentos processados de milho, é necessário saber como otimizar os parâmetros de processamento para particulares conjuntos de germoplasma para dar conta dessas diferenças nas características de composição e processamento de grãos. Isso inclui uma melhor compreensão das técnicas de processamento atual como impactar a qualidade nutricional do produto final de alimentos processados. Aqui, descrevemos um protocolo de microescala que simula o pipeline de processamento para produzir cereais de grandes grãos de sêmola e permite o processamento de amostras de grãos múltiplas simultaneamente. Os grãos de sêmola, intermediários produtos transformados, ou produto final processado, bem como o grão de milho em si, pode ser analisado para conteúdo nutricional como parte de um pipeline de analítico de alta produtividade. Este procedimento foi desenvolvido especificamente para a incorporação de um programa de pesquisa de reprodução de milho, e ele pode ser modificado para outras culturas de grãos. Nós fornecemos um exemplo de análise de ácido ferúlico de limite insolúvel e teor de ácido p-cumarínico no milho. Foram colhidas amostras em cinco estágios de processamento diferente. Demonstramos que a amostragem pode ter lugar em várias fases durante a microescala processamento, que a técnica de processamento pode ser utilizada no contexto de um milho especializado programa de reprodução, e que, no nosso exemplo, a maior parte do conteúdo nutricional foi perdido durante o processamento de produtos alimentares.
Milho (Zea mays L.) é a colheita de grãos mais amplamente cultivada no Estados Unidos1. Em 2016, 71,12 bilhões kg (2,8 bilhões alqueires) de milho foram dedicados ao consumo humano2, indicando a importância do milho na dieta americana. Um dos grandes benefícios do grão de milho é que é um produto relativamente barato, mas também contém fitoquímicos benéficos, como compostos fenólicos, ácidos graxos insaturados e proteínas3. Como tal, produtos alimentares à base de milho podem ser relativamente baratas fontes de fitoquímicos benéficos para os seres humanos.
No entanto, o milho deve ser processado antes do consumo humano. Como resultado, atividades de processamento de impacto muitas vezes o valor nutricional dos alimentos processados final produto4. Por exemplo, durante a produção de salgadinhos e cereais de pequeno-almoço pronto-a-comer (ou seja, cereais frios), grãos de milho são secos moídas para produzir grandes grãos de sêmola. Durante a moagem seca, o farelo e o germe são fisicamente removidos, deixando apenas o material de endosperma. Desde que muitos fitoquímicos localizam-se predominantemente no germe ou o farelo (por exemplo, compostos fenólicos e ácidos graxos insaturados, respectivamente), isto pode resultar em uma diminuição significativa no valor nutricional dos alimentos processados produto4. Por outro lado, etapas de processamento a jusante podem melhorar o valor nutricional. Por exemplo, muitas técnicas de processamento de produtos alimentares incluem cozinhar, assar ou torrar. As tensões térmicas encontradas durante esses estágios podem melhorar a biodisponibilidade de fitoquímicos benéficos5.
De uma perspectiva de nutrição humana e ciência de alimentos, seria interessante saber como o processamento afeta não só o valor nutricional dos produtos alimentares transformados, mas, previsivelmente, também como ajustes de parâmetros de processamento podem afetar outros sensorial qualidades, incluindo cor, textura e sabor. Um protocolo que permite que tais qualidades a serem monitorados durante todo o processamento pode ser usado para selecionar variedades de milho para a melhoria do produto final processado comida de milho. Dois dos principais obstáculos para analisar tais características no passado foram a escala e a taxa de transferência de protocolos disponíveis. Por exemplo, durante a produção de cereais de pequeno-almoço para análise laboratorial, Fast e Caldwell6 sugeriu o uso de 45,4 kg de grãos grandes de descamação. Esta massa de grandes grãos de sêmola excede a quantidade de grãos de sêmola grandes ou grande lasca grão materiais7 que pode ser produzido a partir de ensaios de campo pequeno lote que são típicos em programas de melhoramento de plantas. Assim, o desenvolvimento de um protocolo do laboratório microescala para a produção de produtos alimentares transformados poderia permitir que criadores de (1) plantas melhorar variedades de milho para características nutricionais e sensoriais que são de importância para processadores de alimentos e processadores (2) para eficientemente a projetar e testar estratégias de tratamento alternativo.
Este manuscrito, descrevemos uma modificação do elevado-throughput de processamento protocolo descrito no Kandohla8 que foi usado para produzir flocos de milho torrados de materiais de grão grande lasca a microescala. Apresentamos os resultados de um experimento do exemplo usado neste protocolo de tratamento para estudar a mudança de insolúvel-limite o ácido ferúlico e ácido p-cumarínico no milho. Nossos objetivos nesse estudo específico foram determinar (1) como o teor de ácido fenólico de milho alterado durante a produção de cereais de pequeno-almoço pronto-a-comer, (2) em quais fases de processamento essas alterações ocorreram, e (3) se algum dos nossos experimental híbridos responderam diferentemente para processamento salienta que este protocolo pode ser acoplado com protocolos de química analítica de alta produtividade para a análise eficiente das características nutricionais. Este protocolo também pode ser ajustado para imitar a produção de produtos alimentares transformados de milho ou outros alimentos processados que são produzidos a partir de outros grãos.
Alterações no conteúdo nutricional dos alimentos à base de milho em todo processamento são provavelmente devido à remoção de componentes de ganho e estresse térmico5,10. No entanto, exatamente como o processamento afeta vários nutrientes tinha estudado detalhadamente relativamente pouco antes do desenvolvimento do presente protocolo4,8. Além disso, devido a grande escala da maioria dos protocolos de processamento de laboratório, muitas vezes foi impossível estudar as bases genéticas das características sensoriais e nutricionais em grãos de milho8. Aqui, apresentamos um método de laboratório de microescala para estudar as características nutricionais e sensoriais em milho em todo o processamento de produtos alimentares.
Este protocolo permitido amostragem terá lugar na fase de grão descamação, após o cozimento, após o cozimento e depois as forças de corte encontradas durante o rolamento. Assim, com a análise adicional dos grãos de milho colhido, o protocolo facilita a análise do substrato fase inicial e, bem como as etapas de produto e intermediário de alimento final do processamento para elucidar as mudanças na composição relacionadas à nutrição. Esta característica chave do protocolo permite características nutricionais e sensoriais ser analisado ao longo do processamento, permitindo também que o pesquisador a escolher quais protocolos de química analítica a ser usado para as análises específicas. Outra característica fundamental do presente protocolo é a eficiência deste protocolo microescala. Em primeiro lugar, este protocolo utiliza uma pequena amostra, o que é apropriada em uma configuração (tabela 3) de melhoramento de plantas. Um kg de grãos tendem a produzir aproximadamente 0,3 kg de constituintes de grão grande lasca e aproximadamente um terço do grande grão descamação constituintes produzidos eram necessários para processamento. Em segundo lugar, este protocolo permitiu o processamento laboratorial de aproximadamente 16 amostras por dia, que é muito mais eficiente que o protocolo anterior que exigia de tamanhos de amostra grande6.
Este protocolo poderia ser facilmente modificado para imitar a produção de outros produtos alimentares transformados de milho. Por exemplo, grãos de sêmola grandes são usados na produção de vários alimentos de snack, além de cereais de pequeno-almoço pronto-a-comer9. O protocolo do laboratório para a produção destes alimentos de snack previsivelmente poderia incluir ajustes para tempos de cozedura e cozedura soluções ou ajustes de tempos de cozimento. Também é possível que uma versão adaptada do presente protocolo pode ser usada para o estudo de outros grãos e seus respectivos produtos transformados. Produtos de grãos transformados frequentemente incluem cozinhar, assar ou torrar as fases de transformação que podem ser imitadas usando uma versão adaptada do protocolo aqui apresentado.
Uma limitação importante do protocolo é que tem muito poucos pontos de parada, ou seja, uma vez que começa uma etapa de processamento, it e etapas subsequentes devem ser concluída (tabela 3). Há um ponto de paragem única após a produção dos grãos cozidos de descamação grits. Somente se for necessário, os grãos cozidos poderiam ser colocados em um recipiente fechado (por exemplo, um pote de conservas selado) e refrigerados por no máximo dois dias. No entanto, armazenar os grãos cozidos por períodos mais longos de tempo apareceu para alterar a amostra. Além disso, uma vez que o cozimento começa, há sem pontos de parada até depois que a massa de grão cozido foi rolada, cortar e seca.
Conclusão
Através destes resultados de exemplo (ver bundas-Wilmsmeyer et al 4 para obter mais informações), demonstrámos que o conteúdo nutricional pode ser monitorado durante todo o processamento. Além disso, identificaram-se fases de transformação chave onde ocorreram alterações nutricionais. Além disso, o pequeno tamanho da amostra necessário para este protocolo de processamento permitiu o estudo de vários híbridos dentro do contexto de um programa de reprodução da planta. Usando estes híbridos, identificamos qual conjunto de híbridos mantidas as concentrações mais elevadas de insolúvel-limite o ácido ferúlico e ácido p-cumarínico durante todo o processamento. Essas características são importantes indicações de potencial prebiótico final dos cereais torrados. 11 , 12 , 13 estes resultados podem ser usados diretamente para ajudar criadores de plantas estabelecer populações de reprodução para melhoria potencial prebiótico de produtos transformados de milho.
Uma das principais vantagens deste protocolo de tratamento é que ele não limita as análises nutricionais que podem ser realizadas. Que exista um protocolo fitoquímico para análise do grão, então ele pode ser usado para estudar os produtos transformados. Além disso, porque este protocolo de tratamento permite a transformação de produtos alimentares de escala de laboratório e análises nutricionais para ser conduzido de forma independente, vários fitoquímicos podem ser estudados. Os protocolos analíticos para o estudo do conteúdo fitoquímico devem usar tamanhos de amostra pequena, no entanto, devido à pequena quantidade de produtos intermediários e finais do processamento gerada usando o protocolo de transformação de escala de laboratório.
The authors have nothing to disclose.
Os autores gostaria de agradecer Tom Patterson e a equipe de tecnologias analíticas na Dow AgroSciences para a utilização das suas instalações de laboratório e sua orientação. Este trabalho foi financiado em parte através de presentes da Kellogg Company e Dow AgroSciences e USDA Hatch Grant, prêmio ILLU-802-354. Suporte ao aluno para CJBW foi fornecido pela sociedade distinta de Illinois e o William B. e Nancy L. Ambrose Fellowship em Ciências da cultura.
Canning pressure cooker | Wisconsin Aluminum Foundry Co. | Model 921 | Any can be used, but it should be large enough to accommodate multiple canning jars |
Single burner or large hot plate | Waring Professional | Model SB30 | Any can be used, but it should be large enough so that canning pressure cooker can securely be placed on burner or hot plate |
1 quart wide mouth canning jars | Ball | 1440096258 | Any can be used, but they should be wide mouthed quart jars |
1 L Beaker | Fisher Scientific | 09-841-104 | |
Stir plate | Corning | 6796420D | |
Magnetic stir bar | Fisher Scientific | 14-513-67 | |
1 L Graduated cylinder | Kimble | 20027500 | |
Spatula | Wal-Mart | 552145280 | |
Hot pads | Wal-Mart | 556501140 | |
Scale | Any | NA | Mettler Toledo Model MS105DU or Similar |
Weigh boats | Fisher Scientific | 08-732-113 | |
Sugar | Wal-Mart | 9259244 | |
Salt | Morton (Purchased at Wal-Mart) | 9244849 | |
Liquid malt extract | By the Cup (Purchased on Amazon) | NA | https://www.amazon.com/Barley-Malt-Extract-Syrup-Bottle/dp/B01N4SK72C |
Labeling tape | Fisher Scientific | 15966 | |
Permanent marker | Wal-Mart | 55529894 | |
Convection oven | Wal-Mart | 1598495 | |
Baking pan (usually included with oven) | Wal-Mart | 1598495 | |
Cooking foil | Wal-Mart | 564264789 | |
Tortilla press | E&A Hotel & Restaurant Equipment and Supplies | CTM-2000 | |
Parchment paper | Reynolds (Purchased at Wal-Mart) | 551219672 | |
Pizza cutter | Farberware (Purchased at Wal-Mart) | 553012200 | |
Cooling racks | Flytt (Purchased on Amazon) | NA | https://www.amazon.com/dp/B075HQY627/ref=sspa_dk_detail_7?psc=1&pd_rd_i=B075HQY627&pd_rd_wg=WaJol&pd_rd_r=SF07KCHMP753WAPG6ED4&pd_rd_w=2BOwf |
SAS Version 9.4 | SAS Institute | Version 9.4 | |
R | R Foundation for Statistical Computing | Version 3.4.0 |