طرق التسليم الشفوي الحمض النووي الريبي مزدوج-الذين تقطعت بهم السبل للحث على تدخل الجيش الملكي النيبالي في لحاء وتغذية النبات-ساب الحشرات هيميبتيران

وتشمل الحشرات هيميبتيران بعض الآفات الأكثر اقتصاديا كبيرا من أجريكولتوريبيكاوسي قدرتها تحقيق النمو السكاني المرتفعة، وانتشار الأمراض في النباتات. بمسب، Stål H. حليس ، هو الآفات الدخيلة التي أدخلت بطريق الخطأ في نصف الكرة الغربي في الينتاون، بنسلفانيا من آسيا (الصين وتايوان، وكوريا، واليابان) مع رؤية أول المبلغ عنها في عام 1996¹. منذ إطلاقها، بمسب وقد اكتشفت في 43 دولة، مع السكان أعلى في منتصف المحيط الأطلسي (دي، دكتوراه في الطب، السلطة الفلسطينية، نيو جيرسي، خامسا، وبخار الماء)، وكذلك في كندا وأوروبا، وتمثل تهديدا محتملاً للزراعة². يمكن أن تحرض بمسب كالآفات الحشرة، الأضرار بحوالي 300 مضيفي النباتات المحددة بما في ذلك المحاصيل ذات القيمة العالية مثل التفاح والعنب ونباتات الزينة، والبذور للمحاصيل، وفول الصويا والذرة. بسبب الأضرار المقام الأول الواجب وضع التغذية المعروف لاسيراتي وتدفق حيث يثقب الحيوان المحصول المضيف مع ستيليت إبرة تشبه به للوصول إلى المواد الغذائية من الأنسجة الوعائية^2،3. بمسب هو أيضا الآفات داخلي كما قد وجدوا الإقامة في مناطق المعيشة مثل المدارس والمنازل خلال فصل الخريف من خلال فصل الشتاء². المواد الكيميائية وصدر عن بمسب أيرواليرجينس أفيد الارتكاس التحسسي غير المشروعة في عمال محاصيل الفاكهة. بمسب قد يسهم أيضا في أمراض الحساسية مما يؤدي إلى أكزيما، والتهاب الملتحمة، والأنف في الأفراد الحساسة^4،5. حشرة هيميبتيران آخر، الكاريبي والمحيط الهادئ، سيتري دال- كوياما (هيميبتيرا: ليفييداي)، وآفة خطيرة من الحمضيات، وينقل البكتيريا لحاء المحدودة (Candidatus ليبيريباكتير آسيوي) مما تسبب في هوانجلونجبينج (HLB)، المعروف تخضير الحمضيات المرض^6،7. HLB ذكر أولاً من جنوب الصين وانتشر إلى 40 مختلفة آسيا وأفريقيا، وأوقيانوسيا، وجنوب وشمال أمريكا البلدان⁷. تخضير الحمضيات مشكلة في جميع أنحاء العالم مع تهديد خسائر اقتصادية ومالية بسبب فقدان الحمضيات؛ ومن ثم، تعتبر الإدارة من الكاريبي والمحيط الهادئ أهمية قصوى لمنع ومراقبة HLB.

عادة ما يتطلب اتخاذ تدابير لمكافحة فعالة لهذه الآفات الحشرية عاش تطبيق مبيدات الآفات الكيميائية التي تعتبر قصيرة نسبيا. استراتيجيات مكافحة مبيدات الحشرات الكيميائية كثيرا ما تفتقر إلى استراتيجيات الإدارة البيئية الآمنة أو قد تناقصت قابلية بسبب مقاومة المبيدات الحشرية في مكافحة الآفات السكان^8،9. ومن ثم، المكافحة البيولوجية للآفات بالمبيدات البيولوجية الجزيئية بديل محتمل، ولكن استخدامها على الصعيد العالمي ما زال متواضعا، والأنواع المختلفة من الطفيليات (مثلاً، تريسولكوس japonicus) يمكن أيضا أن تكون فعالة البيولوجية الطبيعية عناصر التحكم. [رني] احتمال ظهور التكنولوجيا لإدارة الآفات الحشرية الغازية مع المبيدات الحيوية الجزيئية¹⁰. [رني] هو عبارة عن إليه تنظيمية جينات وصفاً جيدا أن ييسر إسكات الجينات بوسترانسكريبشونال فعالة من الذاتية فضلا عن غزو دسرناس بطريقة خاصة بالتسلسل، الذي يؤدي في نهاية المطاف إلى تنظيم التعبير الجيني في مرناً مستوى^11،12. باختصار، عندما دسرنا خارجية متغللة في خلية تتم معالجتها في سيرناس بواسطة عضو فوق عائلة “الثالث رناسي” نوكلاس bidentate، يسمى ديسير، الذي هو المصانة تقحم في الديدان والذباب، والنباتات، والفطريات، والثدييات^{13، 14 , 15}-ثم تفكيك هذه الدوبلكس siRNA النوكليوتيدات 21-25 والمتكاملة في مجمع إسكات المستحثة بالحمض النووي الريبي (RISC) دليل الكشف. يسمح هذا المجمع RISC-الجيش الملكي النيبالي واتسون-كريك قاعدة الاقتران لتكمل الهدف مرناً؛ وهذا يؤدي في النهاية إلى الانقسام بالبروتين أرجوناوتي، بروتين مجال متعددة تحتوي على مجال مثل ح رناسي، مما يحط من قدر مرناً المقابلة ويقلل من ترجمة البروتين، مما يؤدي إلى بوسترانسكريبشونال الجينات إسكات^{16 , 17 , 18}.

[رني] لإدارة الآفات يتطلب إدخال دسرنا في فيفو لإسكات الجينات للفائدة، وبالتالي تفعيل المسار siRNA. وتشمل مختلف الأساليب التي استخدمت لإيصال دسرنا إلى خلايا الحشرات والحشرات للحث على المنهجية [رني] تغذية^10،19، مغطس^20،21، microinjection²²، شركات مثل الدهنية ²³، و تقنيات أخرى²⁴. [رني] كان الأولى أظهر في ايليجانس كاينورهابديتيس لإسكات التعبير الجيني unc-22 برصاص وميلو²⁵، متبوعاً بضربه قاضية في التعبير عن الجينات فريزليد melanogaster المورفولوجية²⁶. تستخدم الدراسات الفنية الأولية microinjection لتسليم دسرنا في الحشرات، مثل Apis mellifera^22،27، و بسام أسيرثوسيفون²⁸،²⁹من جرمنيك بلاتيلا، حليس H.³⁰، والحشرات ليبيدوبتيران (استعرضها ترينوس et al. ³¹)-microinjection مفيد لتقديم جرعة صحيحة ودقيقة لموقع اهتمام بالحشرات. أن كان ذلك قد تثير هذه ثقوب التعفين محصنة الجينات ذات الصلة بسبب الصدمة³²، ومن ثم استبعاد التطبيق العملي لها في التنمية الزراعية المبيدات الحيوية.

أسلوب آخر لإيصال دسرنا في فيفو مغطس، الذي ينطوي على ابتلاع أو امتصاص دسرنا بتعليق الحيوانات أو الخلايا عموما في المتوسط خارج الخلية التي تحتوي على دسرنا. مغطس قد استخدمت للحث على كفاءة [رني] في خلايا استنبات الأنسجة S2 المورفولوجية تمنع دوونستريم من Raf1 (DSOR1) mitogen تنشيط بروتين كيناز كيناز (مابك)²⁰، وكذلك في C. ايليجانس الصمت 1-نقاط البيع الجينات³³. بيد أن دسرنا تسليمها باستخدام مغطس أقل كفاءة للحث على [رني] مقارنة microinjection²⁰. أولاً أبدى [رني] وساطة إسكات بحشرة مضغ روتوورم الذرة الغربية (فكر) (ظهرت فيرجيفيرا فيرجيفيرا) عن طريق غرس في دسرنا إلى النظام غذائي أجار اصطناعية¹⁰. موجز تقارير سابقة لها أساليب لتسليم دسرنا غرست في الوجبات الغذائية الطبيعية محددة المفصليات³⁴. طرق التسليم هذه حددت كذلك فعالة نسبيا بوسائل اصطناعية للتسليم؛ مثل قضية ذبابة التسي تسي (مورسيتانس مورسيتانس اللواسن)، حيث لوحظ متساوية ضربة قاضية من المورثات المتصلة بجهاز المناعة عندما تم تسليم دسرنا أما من خلال وجبة الدم أو ميكروينجيكتيد³⁵. وبالمثل، تسليم دسرنا من خلال قطرات في أبل البنى الخفيفة العثة (بوستفيتانا ابيفياس)³⁶، يرقات العثة diamondback (إكسيلوستيلا بلوتيلا)³⁷، فضلا عن عسل النحل^38،39 الناجمين عن كفاءة [رني]. واستخدمت تجارب [رني] الأكثر فعالية في هيميبتيران حقن دسرنا⁴⁰ لأن التسليم الشفوي من دسرنا في الحشرات هيميبتيران شاقة نظراً لأنه يجب أن يتم تسليم من خلال الأنسجة الوعائية للنبات المضيف. كما لوحظ فعالة [رني] في الكاريبي والمحيط الهادئ وقناص زجاجي مجنح leafhopper (جوس)، فيتريبينيس هومالوديسكا: دسرنا تم تسليمها عن طريق أشجار الحمضيات والكرمه قد استوعبت دسرنا في الأنسجة الوعائية من خلال جرعة الجذر، ورقي بخاخ أو حقن الجذع أو الاستيعاب بلفتات^{41،42،43،44،،}من⁴⁵⁴⁶. كما أسفر هذا أول براءة دسرنا ضد ACP (2016، A1 20170211082 لنا). تسليم siRNA ودسرنا استخدام شركات النقل مثل جسيمات نانوية والدهنية يضفي الاستقرار، وزيادة في فعالية دسرنا تم تسليمها سريعاً الناشئة^23،،من^{4748،49 ،50}. فئة جديدة من المركبات المستندة إلى نانوحبيبات التسليم للأحماض النووية في المختبر و في فيفو التي تم تلخيصها خصيصا للتطبيقات العلاجية قد نقلها إمكانات هائلة بمناسبة تسليم ناقلات⁵¹. جسيمات نانوية كوسيلة إيصال دسرنا قد العيوب بما في ذلك القابلية للذوبان، هيدروفوبيسيتي، أو التراكم الأحيائي محدودة⁵²، ولكن عملية تسليم مساعدة مناسبة بوليمر قد تعوض هذه العيوب. وظهرت أيضا التنمية والاستخدام الذاتي إيصال النيوكليوتيدات يسمى ‘النوكليوتيد العقاقير’، وهي واحد الذين تقطعت بهم السبل الدوبلكس الحمض الريبي/⁴⁶.

فيتيلوجينيسيس في المفصليات مفتاح عملية التحكم في الإنجاب وينظم هرمون الأحداث (جون) أو اكديسوني، وهي مستحثات رئيسية لتوليف جيد جداً من الدهون في الجسم؛ يتم أخذ جيد جداً في نهاية المطاف بالبويضات النامية عبر Vg مستقبلات وساطة الالتقام⁵³. Vg هو تجميع مجموعة من البروتينية اكستراوفاريالي، الذي لا غنى عنه لتنمية البروتين صفار البيض الرئيسية،^54،فيتيلين⁵⁵، وذلك، من المهم في الإنجاب والشيخوخة⁵⁶. Vg قد تم إسكاته بنجاح في الديدان الخيطية⁵⁷ ، فضلا عن عسل النحل (Apis mellifera) حيث توسط [رني] استنفاد Vg لوحظ في البالغين والبيض²². [رني] إسكات الجينات بوسترانسكريبشونال وساطة Vg تم اختباره لأنه كان يعتقد استنفاد سيؤدي إلى تأثير المظهرية يمكن ملاحظتها مثل انخفاض الخصوبة وخصوبتها، يحتمل أن تكون المساعدة في مراقبة بمسب. جهامت الجين الذي يشفر S-adenosyl-L–الميثيونين (SAM)-تعتمد جابر حمض س-ميثيلترانسفيراسي، يحفز الخطوة الأخيرة في الطريق الحيوي جابر⁵⁸. في هذا المسار farnesyl تسلسلياً تتحول بيروفوسفات (FPP) من فارنيسول، لحمض فارنيسويك متبوعاً بتحويل فارنيسواتي الميثيل إلى جابر من جهامت. هذا المسار هو المصانة في الحشرات والمفصليات خصيصا للمسخ، عملية تنمويا وينظم الهرمونات^59،،من⁶⁰⁶¹. في موري (ب)، التعبير الجيني جهامت ونشاط جابر السكروز في كلام المجاميع تشير إلى أن قمع النسخي الجينات جهامت حاسمة لإنهاء جابر الحيوي⁵⁸. ولذلك، اختير الجينات جهامت و جيد جداً لاستنفاد المستهدفة باستخدام [رني]. كما تم اختبار [رني] في أشجار الحمضيات للتحكم في الكاريبي والمحيط الهادئ وجوس. تعامل أشجار الحمضيات مع دسرنا عن طريق جرعة الجذر، ووقف الصنبور (حقن الجذع)، فضلا عن الرش ورقي مع دسرناس ضد الحشرات ارجينين محددة كيناز (حزب العدالة والتنمية) النصوص^42،44. تم الكشف عن تطبيق موضعي دسرنا جميع أنحاء أديم أشجار الحمضيات، التي تشير إلى تقديم بكفاءة من خلال الأنسجة الوعائية في النباتات، وأسفرت عن زيادة في معدل الوفيات في الكاريبي والمحيط الهادئ وجوس^{41،42، 45}.

في الدراسة الحالية، وقمنا بتحديد طريقة تسليم النظام غذائي طبيعي لعلاجات مثل دسرنا. بعد ذلك استخدمت هذه التقنية المطورة حديثا لإسكات جهامت و Vg أظهرت مرناً باستخدام الجينات محددة دسرناس في الحوريات بمسب ك سابق⁶². هذه البروتوكولات التسليم الجديدة أظهرت هنا تحل محل نظم إيصال الحمض النووي الريبي التقليدية التي تستخدم في الرش الموضعي أو ميكروينجيكشنز. قد تستخدم الخضروات والفواكه وصنبور الجذعية، التنقيع التربة والطين الماصة في تسليم دسرنا، وبالغ الأهمية للتطوير المستمر لإدارة الآفات والممرضات المبيدات الحشرية الحيوية.