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Behavior

Solletico, una tecnica per indurre influenza positiva quando si maneggia ratti

Published: May 08, 2018
doi:
10.3791/57190
, , , ,
1Center for the Study of Animal Well-being, Department of Integrative Physiology and Neuroscience,Washington State University, 2Canadian Council on Animal Care, 3Department of Animal Sciences, Center for Animal Welfare Science, College of Agriculture,Purdue University, 4Department of Animal and Aquacultural Sciences, Faculty of Biosciences,Norwegian University of Life Sciences

Summary

Questo articolo viene illustrato l’applicazione standardizzata di manipolazione giocoso, una solletico tecnica progettata per imitare il gioco selvaggio del ratto. Questa tecnica è efficace nel ridurre i timore reazioni agli esseri umani e generando positiva influenza quando ratti vengono gestiti per le comuni attività di allevamento e medica e ricerca procedure come l’iniezione.

Abstract

Gestione di piccoli animali come i ratti può causare parecchi effetti contrari. Questi includono la paura degli esseri umani, la resistenza alla manipolazione, rischio aumentato per sia gli animali e le mani dei loro gestori, benessere degli animali in diminuzione e meno dati di ricerca valido. Per ridurre al minimo gli effetti negativi sui risultati sperimentali e relazioni uomo-animale, ricerca animali spesso sono abituata al manipolati. Tuttavia, i metodi di assuefazione sono molto variabili e spesso di efficacia limitata. Più potente, è possibile per gli esseri umani imitare gli aspetti di giocoso comportamento selvaggio degli animali durante la manipolazione. Quando applicato ai ratti di laboratorio in modo sistematico, questa estrema maneggevolezza, indicato come solletico, costantemente dà luogo a risposte comportamentali positive. Questo articolo fornisce una descrizione dettagliata di un ratto standardizzato solletico tecnica. Questo metodo può contribuire a future indagini gli stati affettivi positivi negli animali, rendono più facile per gestire i ratti per attività di allevamento comuni come gabbia cambiando o procedure mediche/ricerca come l’iniezione ed essere implementato come una fonte di arricchimento sociale. È concluso che questo metodo può essere utilizzato per in modo efficiente e praticabile ridurre fearfulness ratti degli esseri umani e migliorare il loro benessere, come pure in modo affidabile modello gli stati affettivi positivi.

Introduction

Gestione di piccoli animali, come domestici ratti (Rattus norvegicus) tenuti in laboratori e come animali domestici, può causare un aumento significativo negli indicatori comportamentali e fisiologici di stress1, come pure che ha avversione risposte indicative di stress emotivo2. Gestione ratti può innescare risposte basate sulla paura verso gli esseri umani3,4, che possono rendere più difficile il trattamento ulteriore, aumentare il rischio di lesioni per gestore e degli animali e limitare la validità dei dati sperimentali5.

Per evitare effetti negativi della gestione sui risultati sperimentali e le relazioni uomo-animale, è pratica comune per consentire qualche tempo per gli animali giovani neo-acquisiti a habituate per interazione umana prima della loro assegnazione ai trattamenti sperimentali. Durante questo periodo di acclimatazione, custodi possono esporre ratti per una serie di eventi che possono essere altamente variabili nella forma e nella durata. Questi possono includere l’esposizione passiva al popolo, toccando, sollevamento, petting, holding, ne, e che offrono cibo tratta. Anche se le combinazioni di tali procedure sono stati segnalati per ridurre la paura di esseri umani6, non è chiaro quali pratiche specifiche sono più efficaci per l’utilizzo da guardiani animali occupati. Ci sono rapporti che ratti possono avere risposte negative, o almeno nessuna risposta favorevole, ad alcune di queste tecniche individuali2,7,8,9.

Al contrario, prova abbondante sostiene la conclusione che il solletico, una tecnica di manipolazione che imita il comportamento selvaggio giocoso della ratti, è una forma robustamente benefica di contatto sociale, soprattutto per i ratti giovani10, 11,12,13. I ratti sono mammiferi altamente sociale, che risulta dall’osservazione del tempo trascorrono giocando insieme come juveniles14 e loro forte motivazione a ristabilire e mantenere il contatto sociale con conspecifici15,16, 17. Ratto solletico attinge la natura sociale giocosa dei ratti per convertire la gestione in un’esperienza positiva. Questo concetto è stato originariamente sviluppato come un modello per studiare le basi neurobiologiche degli stati affettivi positivi evocati da gioco sociale comportamento7. Da allora, ratto solletico è stato utilizzato in più di 56 esperimenti diversi, di cui 22 rispetto solletico altro gestione tecniche13.

Gioco selvaggio del ratto è caratterizzata da due comportamenti chiavi: “contatto dorsale” e “pin” (Figura 1)18,19. Durante il gioco selvaggio, un ratto avvia il gioco facendo contatto dorsale con nuca del partner. Il destinatario risponde facendo rotolare supino è bloccato dal comitato permanente di iniziatore sopra19. Il gioco continua con i ratti facendo a turno in ogni posizione, sulla parte superiore e inferiore a18. I gestori di umani sono in grado di imitare i due componenti chiavi di gioco selvaggio dall’alternanza tra il contatto con la nuca di un topo (contatto dorsale) e superficie ventrale (pin) utilizzando vigorosi, rapidi movimenti delle dita simili a quelli utilizzati quando solletico un bambino. Naturalmente, il solletico non è una copia esatta del gioco selvaggio ratto perché ratti non possono appuntare la mano dell’uomo durante il solletico. Infatti, il livello di coinvolgimento delle persone in gioco selvaggio e solletico può differire20,21. Nonostante questo, sembra che solletico richiama gli stessi meccanismi di ricompensa come gioco selvaggio tra conspecifici. Solletico è attivamente sollecitato dagli animali e può servire come una ricompensa per operant apprendimento, contribuendo prova che solletico sostanzialmente è gratificante per giovani ratti7,11,12, 13 , 22. anche se ratti sono stati segnalati anche per imparare un’attività operante in cambio di dolci carezze come la ricompensa, erano più veloci per avvicinare la mano di una persona che offre il solletico rispetto ad accarezzare il7.

I perni utilizzati in solletico possono sembrare simili a comuni procedure di costrizione fisica, ma ci sono prove che ratti percepiscono questi tipi di gestire in modo diverso. Quando i ratti sono ripetutamente trattenuti, come per una procedura dell’iniezione, secernono porfirine eccessiva conseguente chromodacryorrhea (“Lacrime rosse”)8. Chromodacryorrhea si verifica in risposta a fattori di stress acuti e provoca la pelle e il pelo intorno agli occhi e il naso a macchiarsi un colore rossastro23. Quando ripetutamente tenuto premuto e trattenuto sul retro come in un pin, i ratti hanno mostrato meno attrazione per gli esseri umani rispetto a quando solleticato12. Questi risultati implicano che le restrizioni breve ripetuti e comunicati durante solletico sono percepiti diversamente che ritenuta non giocoso. Così, la precisa tecnica utilizzata in solletico ha implicazioni importanti per la generazione di uno stato affettivo positivo al contrario di contribuire alla gestione dello stress.

L’effetto di solletico su stato affettivo del ratto di monitoraggio può essere facilmente realizzata partecipando a vocalizzazioni dei ratti. Ratti in genere producono due categorie di vocalizzazioni ultrasoniche (USVs), alle intorno a 22 kHz e 50 kHz, oltre a vocalizzazioni udibili. Il USVs 22 kHz si verificano in genere quando anticipare eventi che ha avversione e sono accompagnati da cervello elevata attività colinergica24. Di conseguenza, 22 kHz USVs sono considerati per indicare uno stato affettivo negativo di ansia. Il USVs 50kHz, soprattutto del tipo di modulazione di frequenza “Trillo” (Figura 2), sono generalmente associati con gratificante situazioni e stimoli e sono accompagnati da aumentata del cervello dopaminergici attività24,25. Di conseguenza, espressione di abbondanti-50kHz USVs è considerato riflettere un positivo stato affettivo24,26,27,28. Infine, vocalizzazioni udibili sono solitamente associati e pertanto utilizzati come marcatori di, dolore fisico e disagio. La produzione differenziale di queste tre forme di vocalizzazioni offre quindi una registrazione affidabile delle modifiche nello stato affettivo di ratti26. Ratti producono USVs presso intorno 22 kHz durante l’esposizione ai predatori, l’esposizione agli stimoli dolorosi come piede scossa e Inter-uomo combattimento28. Carezze è stata segnalata anche a suscitare più 22 kHz USVs in ratti ingenui, dedotti come indicando influenza negativa2. Al contrario, quando il solletico dagli esseri umani, come quando impegnati in gioco selvaggio con altri ratti, ratti producono numerosi-50kHz USVs. Ne consegue che il tasso di 50 kHz USVs fornisce una misura graduata della risposta affettiva positiva generata da solletico29,30.

Descrizioni esistenti di “come un ratto il solletico” sono piuttosto brevi e possono portare a risultati variabili. Ulteriormente, novizio “ticklers ratto” può essere eccessivamente sperimentale nei loro tentativi di imitare il gioco selvaggio. Le parole “tickle vigorosamente” sono più facili da capire quando dimostrato visivamente. Pertanto, l’obiettivo di questo articolo è quello di fornire una descrizione dettagliata e la dimostrazione di come mimare interazioni giocose positivo dei ratti in modo efficace e coerenza che suscita in modo affidabile le risposte positive dalla maggior parte dei ratti quando vengono maneggiati. Questo protocollo descrive una tecnica standardizzata di solletico e spiega come solletico può essere combinato con le procedure come moderazione e iniezione per ridurre potenzialmente spiacevoli esperienze affettive.

Protocol

Tutti gli esperimenti sono stati effettuati in conformità della istituti nazionali di salute Guida per la cura e uso di animali da laboratorio31,32 alle strutture accreditati dalla AAALAC International e sono stati approvati da parte dello stato di Washington Comitato di uso e Università istituzionali cura degli animali. Il seguente protocollo possa esporre il personale agli allergeni animali di laboratorio. Dispositivi di protezione individuale devono essere indossato come consigliato dalla salute istituzionale e fornitori di sanità e programma di sicurezza. Il protocollo descrive le procedure sotto condizioni abitative tipici del laboratorio, ma potrebbe essere adattato per l’utilizzo in strutture di biosicurezza più elevati (ad esempio utilizzando una cappa di biosicurezza, ecc.). 1. preparazione delle attrezzature e l’installazione Finestra di dialogo Gestione Preparare gabbia a casa di un animale o altra custodia per solletico, d’ora in avanti chiamato la finestra di dialogo di gestione. Assicurarsi che la finestra di dialogo gestione è grande abbastanza per fornire lo spazio per mano del tickler e per i ratti per muoversi mentre impedendo loro di saltare fuori. Assicurarsi che la finestra di dialogo di gestione sia priva di ostacoli. Così, se lo svolgimento di solletico dalla gabbia, rimuovere eventuali oggetti come capanne, bastoni e carta increspata di rosicchiamento. Linea della finestra di dialogo Gestione piano con biancheria da letto33. Altri tipi di copertura pavimento morbido possono essere utilizzati ma non sono altrettanto efficaci a suscitare-50kHz vocalizzazioni13. Posizionare la finestra di dialogo di gestione su un tavolo o da appoggio ad un’altezza che permette mano al gestore raggiungere comodamente l’area intero piano della finestra di gestione. Ridurre al minimo l’effetto di novità da habituating i ratti per la finestra di dialogo gestione prima del solletico, se necessario. Timer: Per indicare l’inizio e la fine del 15 attacchi s, posizionare un dispositivo di temporizzazione vicino la finestra di dialogo di gestione dove possono essere facilmente lette. In alternativa, un segnale di tempo uditivo possono essere trasmessi al tickler attraverso delle cuffie. Registrazione di vocalizzazione Se vocalizzazioni vengono registrati per quantificare i tipi differenti di vocalizzazione per scopi di ricerca, usare un microfono in grado di catturare il suono a banda larga 10-120 kHz, collegato a un dispositivo in grado di registrare suoni ad alta frequenza. Sospendere o fissare il microfono nella parte superiore o sul lato del riquadro, abbastanza basso chiaramente rilevare le chiamate e di evitare confusione con le chiamate dai ratti in gabbie vicine, ma fuori portata fisica dei ratti. Se vocalizzazioni solo bisogno di essere monitorati per confermare la corretta tecnica di solletico, quindi utilizzare un rilevatore di pipistrello e impostarlo sul lato della scatola. Se si utilizza un rivelatore di eterodina, semplice, è possibile impostare il dispositivo a 50 kHz. Guanti da laboratorio: utilizzare una mano nuda o sottilmente Inguantata solletico. La tecnica di solletico è stata sviluppata utilizzando una mano nuda.  Tuttavia, una mano guantata sottilmente è inoltre efficace a indurre il comportamento giocoso e produzione USV-50kHz, consentendo il gestore di rilevare la quantità di pressione applicata al corpo del ratto e di sentire le risposte del ratto attraverso il guanto. 2. procedura di solletico Mettere i guanti di laboratorio, se richiesto. Portare alla gabbia a casa a una tabella o un banco da lavoro. Trasferire delicatamente ratto nella finestra di gestione se solletico non è condotta in dalla gabbia. Avviare il timer e l’audio registrazione se necessario. Per un’applicazione coerente, si alternano tra 15 s di contatto delle mani e 15 s rilascio dal contatto per un totale di 2 min. Questa durata di interazione è stata trovata sufficiente per aumentare l’attrazione dei ratti a esseri umani11. Per iniziare la sessione di solletico con una versione di s 15, posizionare la mano immobile all’interno di un lato della finestra di gestione. La presenza della mano permette di ratti sollecitare l’interazione indirizzando lecca e luce Capz (stuzzichini) verso la mano, indicando interesse del ratto per interagire22. In questo caso, spostare la mano dal ratto, che possa sollecitare chasing giocoso della mano di ratto. In alternativa, lasciare la mano fuori dalla scatola durante il rilascio di s 15. Seguire il rilascio con 15 s di solletico, avviare l’interazione con un contatto dorsale (2-4 s). Con una sola mano, toccare vigorosamente nuca del ratto (superficie dorsale del collo) con la punta delle dita utilizzando movimenti delle dita rapida come comunemente eseguiti in solletico umano. Evitare il contatto con la groppa come questa zona del corpo è mirata durante incontri aggressivo34. Seguire il contatto dorsale con un pin. Posizionare il pollice e il dito medio sotto le zampe anteriori del ratto; sollevare il ratto, solo abbastanza alto per consentire rapidamente trasformando il ratto sulla sua schiena, garantendo nel contempo la coda non ottenere torti.Nota: Può contribuire a spingere leggermente sulla parte posteriore del ratto con il mignolo quando si gira il ratto sul dorso. Tenere il ratto liberamente, ma con fermezza; essere assertivo ma non forte. Una volta che il ratto è sulla sua schiena sul pavimento, tenendo il corpo premuto liberamente muovere le dita velocemente e vigorosamente ma delicatamente sul ventre, come è comunemente usato in umana solletico. Anche se la stimolazione è rapida e assertivo, tenere il pinning Spira (2-4 s/pin) per ridurre al minimo le risposte negative. Consentire il topo a sé a destra e seguire rapidamente con un contatto dorsale. Continuare ad alternare perni e contatti dorsale. In media, ci dovrebbe essere 4 o 5 perni/15 s35. Non raccogliere il topo con entrambe le mani. Durante i 15 s di solletico, sempre tenere le dita in movimento e a contatto con il corpo del ratto, anche nelle transizioni tra perni e contatti dorsale. Eseguire tre ulteriori 15-s solletica e rilasci 15-s per un totale di 2 min. Se si utilizza una finestra di dialogo di gestione, tornare ratto alla sua gabbia a casa. Se si utilizza la gabbia a casa, collocare oggetti di arricchimento nella gabbia. Pulire la finestra di dialogo Gestione con carta assorbente per rimuovere le feci e le urine non assorbita dalla biancheria da letto. Ripetere con la gabbia successiva dei ratti, se necessario. 3. solletico contemporaneamente più ratti Ratti possono essere solleticati come un gruppo di36. Se la durata del trattamento non è rilevante, alternativo solletico ogni ratto per 15 s. La durata della sessione di solletico può essere esteso di là di 2 min come necessario affinché ogni ratto riceve quattro periodi di contatto delle mani intervallata da rilascio di solletico. Se la durata del trattamento è rilevante per i risultati della ricerca, quindi utilizzare le procedure seguenti: Per coppie, solleticare un ratto per 15 s seguita immediatamente da solletico secondo ratto per i prossimi 15 s (cioè., durante il rilascio del primo ratto), e così via. Il tickler non dispone di un periodo di riposo. Per terzine, utilizzare la procedura descritta in 3.2.1 per solleticare due dei ratti e solleticare il terzo uno allo stesso tempo come uno degli altri con l’altra mano. Per gruppi di 4 o più ratti, solleticare ogni ratto o coppia di ratti per 15 s. La durata della sessione di solletico può essere esteso di là di 2 min come necessario.

Representative Results

Fattori che interessano o che interessano potenzialmente, risposte a solletico sono riassunti nella tabella 1. Risultati positivi da ratto solletico segnalati dalla più misure di assistenza sociale del ratto e influenza positiva. Risultati comuni includono aumento della produzione di-50kHz USVs, il comportamento di approccio maggiore e una maggiore facilità di manipolazione. Segnalati effetti di ratto solletico a livello genetico e cellulare includono alterata espressione genica nel ipotalamo37e aumentato la neurogenesi nel giro dentato dell’ippocampo38,39. I risultati indicativi di ridotta ansia generalizzata e la paura degli esseri umani sono anche riportati come ridotta latenza all’approccio in 9 differenti esperimenti13, meno congelamento dopo paura condizionata40,41e aumentato le voci al centro di un’arena di campo aperto di ratti alloggiati individualmente36. Per ulteriori informazioni vedere LaFollette et al., che presentano una revisione sistematica della letteratura solletico che identifica 22 rapporti che studiano i risultati di ratto solletico rispetto ad altre tecniche13. Successivo, specifici esempi di risultati che possono essere ottenuti quando la tecnica solletico è accoppiata con moderazione e procedure di iniezione intra-peritoneale (IP) sono descritti. Ratti Sprague-Dawley (maschi; 85-94 giorni di età; n = 48) solletico per 2 min, immediatamente prima e dopo iniezione salina IP al giorno per 10 giorni, soprattutto se combinato con il solletico giovanile esperienza (2 min/giorno da 25-45 giorni di età), ha prodotto solo più-50kHz USV prima (GLM ANOVA, F3, 44 = 9,59, p < 0,0001; Figura 3A) e subito dopo (F3, 44 = 8.74, p = 0,0001; Figura 3B) iniezione (Tukey-Kramer, p < 0,05) rispetto ai ratti esposti a un braccio-mano passiva10. Durante la breve consegna effettiva dell’iniezione, produzione di 50 kHz USVs è stato frenato (media ± SE, 15 ± 1.4 USVs/min) e gestione trattamento non ha avuto effetto sul loro tasso di10. Si è concluso che il solletico, quando applicato sia prima che dopo una procedura dell’iniezione, ha indotto uno stato affettivo positivo che ha moderato il aversiveness della procedura, soprattutto per coloro che erano stati esposti a solletico come juveniles. Per scoprire se solletico sarebbe efficace se ridotto a prima o dopo un’iniezione piuttosto che entrambi e, se così, quali tempo sarebbe meglio, risposte di ratto a solletico prima, dopo e prima-dopo iniezione sono state confrontate. Tassi di USVs 50kHz e udibile chiamate sono stati misurati come indicatori di positivo e negativo influenzare, rispettivamente12. Ratti Sprague-Dawley (maschi; 32-41 giorni di età; n = 96) erano sia trattenuto e dato un’iniezione quotidiana di IP Salina (INJ) o trattenuto senza ricevere un’iniezione (controllo, CON) ed esposti a uno dei seguenti trattamenti: nessun solletico, i ratti non erano toccato prima e dopo la procedura di ritenuta (TN); solleticato per 2 min destra prima (TB), dopo (TA), o prima e dopo (TBA) ritenuta12. In 2 minuti prima di moderazione, ratti da trattamenti che ha ricevuto il solletico prima il sistema di ritenuta (TB, TBA) prodotto il USVs più di 50 kHz (GLMM ANOVA, F3,88 = 49.19, p < 0,0001; Figura 3). TA e TN ratti non hanno differito nel prezzo del USVs prodotta prima della procedura di moderazione. Durante la procedura, qualsiasi ratto che ricevuto solletico (TA, TB, TBA) prodotto più USV 50kHz che quelli che erano non solletico (TN; F3,88 = 50,67, p < 0,0001; Figura 3D). Fra i ratti solleticati, quelli che ricevono il solletico prima della procedura (TB, TBA) prodotto più-50kHz USVs durante il fermo rispetto a quelli in seguito il solletico (TA; p < 0,05). Nel periodo 2 min dopo la procedura, ratti in tutti i gruppi solleticati (TA, TB, TBA) prodotto più USVs 50kHz che quelli che erano non solletico (TN; F3,88 = 53,64, p < 0,0001; Figura 3E). Inoltre, durante la procedura, ratti solleticato prima ritenuta (TB, TBA) ha prodotto meno chiamate udibile rispetto ai ratti che hanno ricevuti non solletico (TN), mentre ratti solleticati in seguito (TA) non hanno differito da quelli negli altri gruppi (F3,88 = 3.67, p= 0,02; Figura 3F). I risultati dimostrano che solletico ratti prima vieta loro per un’iniezione di IP prodotto segni di maggiore influenza positiva attraverso i periodi prima, durante e dopo la procedura di solletico solo dopo fermo12. Guardiani uno dei seguenti trattamenti trattamento applicato ai ratti (Sprague-Dawley maschi; n = 32) da 57 a 74 giorni di età: (1) l’uso minimo una volta a settimana a gabbia cambiare; (2) l’esposizione a una braccio-mano passiva per 2 minuti al giorno; (3) 2 min di solletico ogni giorno, per imitare sociale giocare; (4) 2 minuti al giorno di moderazione sul retro del ratto, simulando il blocco e di un dominante11. Nel minuto successivo un IP iniezione, ratti dal Tickled e passivi trattamenti abbiamo trascorso più tempo l’allevamento nella metà anteriore della gabbia, vicino a dove si trovava il ricercatore, rispetto ai ratti da Minimal e ritenuta trattamenti (GLM ANOVA, F3, 27 = 5,70, p = 0,004; Figura 3). Inoltre, ratti Tickled pronunciate più-50kHz USVs che i ratti nel trattamento passivo quando esposto ad una mano familiare o sconosciuta per 3 min in un test di approccio umano (Log-trasformate media ± SE chiamate/min, Minimal: 0,7 ± 0,26, passivo: 0,6 ± 0.18, solleticato: 1,8 ± 0,30, Moderazione: 1,4 ± 0.28; F3,28 = 4,04, p = 0,02). Pertanto, la semplice presenza di una braccio-mano passiva assistita da assuefazione dei ratti agli esseri umani rispetto a gestione minima, ma solletico era il metodo più efficace per la produzione di una risposta positiva verso gli esseri umani11. Figura 1: ardimentosa ratto giocare comportamento. (A) contatto dorsale; (B) Pin18. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura. Figura 2:-50kHz vocalizzazioni ultrasoniche della frequenza modulata “Trillo” tipo. Cinque vocalizzazioni di Trillo sono state prodotte in 1 s da un topo durante il solletico. Le linee orizzontali a 17 – 25- e 70-kHz sono state prodotte da apparecchiature elettroniche in camera (ad es., computer, microfono, fotocamera). Figura 3: risposte dei ratti esposti a solletico prima o in combinazione con procedure sperimentali quali le iniezioni intra-peritoneale di (IP). Tasso (media ± SE chiamate/min) di 50 kHz USVs prodotta (A) prima e (B) dopo una procedura dell’iniezione di ratti maschi adulti esposti a minima manipolazione (M) o solletico (T) come i giovani e una braccio-mano passiva (P) o solletico (T) immediatamente prima e dopo iniezione (producendo quattro combinazione di trattamento: M-P, T-P, M-T, T-T); da Cloutier et al. 10. frequenza di 50 kHz USVs (media ± SE chiamate/min) prodotta (C) prima, (D) durante e (E) dopo ritenuta (con o senza un’iniezione di IP) una volta al giorno per 10 giorni consecutivi di juvenile ratti maschii che non ricevuto nessun solletico (TN) o solletico prima (TB), dopo (TA), o entrambe prima e dopo (TBA) la procedura; e (F) il tasso di chiamate udibile prodotta durante il fermo; da Cloutier et al. 12. (G) durata (media ± SE s) di allevamento nelle vicinanze il ricercatore durante il 1 min dopo un’iniezione di IP da maschi ratti esposti a minimal, passivo, solletico o ritenuta trattamento da custodi; da Cloutier et al. 11. bar con diverse lettere (a, b, c) indicare le differenze nei confronti a coppie (Tukey-Kramer, p < 0,05). Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura. Fattore di Effetto Riferimenti Intrinseca Età Nessuna differenza di vocalizzazioni ultrasoniche-50kHz (USVs) fra i ratti di età compresa tra 24-44 e 89-92 giorni vecchi 18, 29, 42 Diminuzione-50kHz USVs per ratti da 71 giorni vecchi a 148 giorni vecchi 29 17 maschi di giorno vecchio fatto molti USVs 50kHz più di 7-9 mese vecchi maschi 43 Ratti solleticati come sia i giovani che gli adulti hanno mostrato i risultati più positivi rispetto ai ratti solo il solletico come giovani o adulti. 10 Sesso Ratti maschii più-50kHz USVs a 44 e 71 giorni, ma le femmine produrre ulteriori-50kHz USVs a 148 giorni 29 I ratti maschii di prodotto più-50kHz USVs rispetto alle femmine a 44 e 58 giorni. 43 Nessuna differenza di sesso in-50kHz USVs nel 96 giovanile lungo Evans topi o ratti Wistar giovani 52 42, 44 Ratti Wistar giovanili femminili prodotto ulteriori 22 kHz USVs rispetto ai maschi 44 Differenze inter-individuali Ratti che pronunciate più-50kHz USVs ha mostrato approccio in diminuzione tempo di self-administered solletico, aumentato polarizzazione di giudizio positivo dopo il solletico e aumentata proliferazione delle cellule ippocampali dopo solletico 27, 37, 45 Ratti più giocosi prodotta più-50kHz USVs 43 Ceppo Non segnalati, ma aneddotiche suggeriscono in ratti da ceppi diversi e allevatori differiscono nella loro risposta al solletico. Ratto linee divergono quando scelto al momento della alta vs bassa tasso di USVs-50kHz in risposta al solletico. 22, 26, 42, 46 Precedente esperienza di solletico Aumento della produzione di ultrasuoni USVs 50kHz 12 Estrinseca Biancheria da letto Ratti prodotta più-50kHz USVs quando il solletico su vs familiare biancheria da letto senza biancheria da letto 33 Stress Solletico ratti 1 ora, ma non di 23 ore, dopo lo sforzo del fermo ridotta produzione USVs-50kHz 47, 48 Temporizzazione Solletico ratti prima iniezione era più efficace nell’aumento-50kHz USVs di solletico dopo l’iniezione 12 Sesso del gestore Nessun effetto trovato Panksepp, J. 2014, dati non pubblicati Familiarità del ratto con gestore Ratti prodotta più-50kHz USVs e trascorso più tempo vicino un familiare rispetto ad un tickler sconosciuti 11 Gestore di solletico esperienza / vigor di solletico da gestore Produzione interessato di-50kHz USVs ma non la preferenza e l’approccio di comportamento 2011 Cloutier, S., dati non pubblicati Durata di pin dal gestore / frequenza di alternanza tra contatti dorsale e pins Frequenza più bassa di stuzzichini (interpretata come sollecitazione del gioco) è stato diretto a una mano imponenti 15-s perni (ritenuta) che una mano dando solletica con più contatti dorsale e pin per 15 s 11 Odoranti (ad es., profumo, shampoo, crema da barba) utilizzato dal gestore Non segnalato Dimensione del gruppo sociale Alloggi individuali aumentato le risposte positive ai solletico rispetto alla stabulazione in gruppo nella maggior parte degli esperimenti. Solletico ratti stabulati in gruppo con i compagni di gabbia in gabbia casa ridotto questa differenza 7, 22, 27, 36 Intensità luminosa Solletico a 1000 lux ridotto-50kHz USVs rispetto a 25 lux. 43 Rumore Non segnalato Pulizia prima di solletico della gabbia Produzione indotta di 22 kHz USVs in alcuni ratti 12 Ora del giorno Nessun effetto sulla produzione di USVs-50kHz quando eseguito all’inizio o alla fine del periodo di luce. Solletico ratti all’inizio/fine della luce vs periodo medio del periodo chiaro o scuro non è ancora stato confrontato 2011 Cloutier, S., dati non pubblicati Tabella 1: Elenco dei fattori che influenzano, o che interessano potenzialmente, le risposte dei ratti al solletico, una tecnica di estrema maneggevolezza che riproducevano gioco selvaggio del ratto.

Discussion

Questo protocollo descrive una tecnica per ratto solletico, una tecnica di estrema maneggevolezza che imita il comportamento di gioco selvaggio di ratto che è efficace nel generare vocalizzazioni indicativi di influenza positiva ed aumentare il comportamento di approccio quando ratti vengono gestiti per allevamento o medical comuni e procedure come iniezione del IP di ricerca.

Gioco sociale, una forma di contatto sociale, in genere positivo è stato proposto per assistere nella taratura di reazioni emotive a spaventose situazioni42,43e generare la resilienza di ansia e depressione44. Dal ratto che imitano sociale gioca, solletico sembra avere allo stesso modo gli effetti benefici7. Così, per l’applicazione di solletico essere riuscito a indurre gli stati affettivi positivi, è importante tenere a mente che la mano è destinata a fungere da “il socio del gioco” durante il solletico. La mano è attraente perché simula i comportamenti che ratti si aspettano e godono da un altro ratto durante il gioco selvaggio. Quindi, sollevamento e tenendo il topo con entrambe le mani non è che imita il gioco di ratto e non possono avere lo stesso effetto. Infatti, i ratti del laboratorio impareranno a evitare restrizioni non giocoso in cui un gestore li tiene con una mano e li tratti con l’altra mano45. Durante ratto solletico, è anche importante spostare la lancetta con fiducia e assertivo, pur essendo vivace e giocoso. Mantenendo il pinning Spira (2-4 s/pin) dovrebbe ridurre al minimo le risposte negative perché nel gioco selvaggio tra ratti, ripetuto blocco porta ad immissione in circolazione di 22 kHz USVs18.

Anche se ratti giovani sono più giocosi e mostrano le risposte più forti di solletico di ratti adulti18, solletico in età adulta ha anche benefici10. Solletico ratti quando i giovani inoltre è stato trovato per avere benefici più tardi in vita36, suggerendo che i ratti esperienza un prolungato effetto positivo sulla loro reazione emotiva alla presenza umana. Le differenze del sesso in risposta al solletico siano incoerenti, con rapporti di nessuna differenza di sesso in ratti giovani46,47, giovani maschi producendo più-50kHz vocalizzazioni e meno 22 kHz vocalizzazioni giovanile delle femmine29 ,48,39e femmine più anziane producendo più-50kHz vocalizzazioni oltre i maschi della stessa età29, simile ai risultati per gioco sociale49.

L’efficacia della tecnica solletico può essere valutata utilizzando schemi di movimento di ratto e vocalizzazione. Ratti saranno sgranocchiare e leccare le dita del gestore durante i periodi di 15-s di rilascio segue solletico11. Stuzzichini sono morsi di luce, non pregiudizievole che sono stati descritti come comportamento di gioco-sollecitazione in giovani ratti22. Quando il gestore si sposta la mano intorno alla casella di movimentazione, ratto seguirà e inseguono. Ratti, specialmente giovani, saranno anche eseguire, scorrazzano intorno alla casella tra periodi solletico e mostrano un netto aumento in attività dopo un incontro solletico, simile all’attività in esecuzione che caratterizza il gioco selvaggio. Se il topo rimane immobile durante il rilascio, regolazione della tecnica del solletico, quali la riduzione della durata del pin o dando meno perni, è probabilmente necessario. È meglio dare perni di breve durata per la prima sessione di solletico. Durata e numero di pin può essere aumentata come i ratti si abitua al solletico. Ratti proferire USVs 50kHz, tra cui Trilli, durante il solletico e tra periodi solletico. Un aumento graduale nel numero di Trilli prodotta durante i rilasci 15-s può essere visto sopra le prime due settimane di solletico quotidiana prima di stabilizzarsi47. Differenze individuali consentono solleticati ratti per essere diviso in alta e bassa chiamanti differenzialmente di rispondere allo stress, ansia e anedonia46,47,50.

Ratto solletico è stato utilizzato con successo per indurre effetto positivo come valutati produzione sulla base di 50 kHz USVs durante solletico13. Recentemente è stato implementato come una tecnica per ridurre la paura degli esseri umani nei ratti e attenuare i loro aversiveness di medica e le procedure di ricerca come l’iniezione. La prova suggerisce che, quando fornito per solo 2 minuti al giorno per animale, solletico è un metodo efficace e pratico per ridurre l’evitare gli esseri umani11. Considerando che ratti giovani giocheranno insieme per circa 60 minuti al giorno51,52,53, solletico per 2 min al giorno è pratico ma presumibilmente troppo breve per replicare i pieni effetti del gioco sociale fra i ratti. I proprietari di ratto dell’animale domestico, che in genere hanno più tempo per la gestione delle loro ratti che custodi di laboratorio, possono fornire ratti con ulteriori solletico finché i ratti continuano a rispondere positivamente. Basato su Burgdorf et al. 44 , 45, i primi 15 min di gioco selvaggio sembra essere il più positivo per i ratti. A sua volta, può essere più efficace a solleticare ratti per periodi fino a 15 min, soprattutto se per un giustificato motivo non può essere tenute in un gruppo sociale. Tuttavia, basato sul gioco come “formazione per l’inaspettato”38, una tecnica più varia di quanto il metodo qui descritto potrebbe essere necessario per mantenere la giocosità di più sessioni di solletico. Sessioni aggiuntive solletico ogni giorno possono anche essere utile come altre attività biologicamente importanti come il sonno e l’alimentazione non sono alterati. Oltre a contribuire a migliorare il benessere di laboratorio e ratti dell’animale domestico, la tecnica descritta di solletico standardizzata utilizzabile in continua ricerca mirata a capire gli effetti di gioco sociale e dei suoi componenti in comportamentali, sociali e il cervello sviluppo.

Quando solletico è stato effettuato che circondano iniezione, particolarmente quando combinato con precedente esperienza di solletico (finali 40-50 giorni prima), ha aumentato tariffe USV-50kHz prima e dopo l’iniezione e ridotto i tassi di chiamata udibile durante iniezione10 . Solletico così sembra avere attenuato gli effetti negativi delle iniezioni di IP, soprattutto nei ratti abituati a solletico come juveniles10. Anche se solletico non impedì il disagio connesso con l’iniezione come produzione valutati sulla base delle chiamate udibile, aumentato-50kHz USVs rispetto alla condizione di controllo, prima, durante e dopo la procedura di moderazione12. Secondo i dati USV-50kHz, il più efficace punto di tempo per l’applicazione di solletico era appena prima piuttosto che dopo la procedura di moderazione12. Solletico ratti prima dell’iniezione ha avuto un riporto effetto quella positiva elevata influenzano durante la procedura12. Solletico può pertanto minimizzare potenziali effetti negativi di procedure mediche di routine sul benessere del ratto e comportamento. Più ricerca è necessaria determinare come la tecnica potrebbe essere accoppiata in modo efficace con altre tecniche di iniezione e altre procedure medico/sperimentale.

Nel complesso, abbiamo dimostrato che risultati solletico di ratto in risultati positivi come aumento della produzione di USV 50kHz e comportamento di approccio, come pure in diminuzione elusione degli esseri umani e resistenza alle manipolazioni. Si consiglia di ratto solletico come un metodo praticabile per migliorare il benessere di ratto e modellazione stati affettivi positivi.

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Sylvie Cloutier, Megan LaFollette, Brianna Gaskill e Ruth Newberry desidera dedicare questo articolo alla memoria di Jaak Panksepp, il nostro amato co-autore, scomparso durante le fasi finali di completamento di questo manoscritto. Ricordiamo Jaak affettuosamente come “il padre di ratto solletico” – le sue intuizioni in emozioni animali formano l’ispirazione fondamentale per questo lavoro. Questo materiale è parzialmente basato su lavoro supportato da un Washington stato Università veterinaria estate Research Fellowship, un premio di valorizzazione del benessere animale dall’Animal Welfare Institute e un “Grant for Laboratory Animal Science” dall’americano Associazione per la scienza degli animali da laboratorio. Pubblicazione di questo articolo è stata sponsorizzata da Petco animale rifornimenti, Inc. Vorremmo ringraziare Carol Dowell e Purdue University programma di animali di laboratorio per averci permesso di solleticare loro ratti per le riprese.

Materials

Table or workbench No specific brand is recommended.
Handling box (rat home cage or another enclosure) No specific brand is recommended.
Bedding or or other type of soft cover No specific brand is recommended.
Gloves (thin laboratory gloves) Optional.
Timing device Deltaworks Interval Timer:Timing for HIIT Training, Workouts
https://itunes.apple.com/us/app/interval-timer-timing-for-hiit-training-workouts/id406473568?mt=8		 Optional. Any timer will do, although it is convenient to use an interval timer if you are tickling multiple rats.
Ultrasonic microphone such as a bat detector or USB microphone Magenta Electronics LTD Bat4 Bat Detector
https://www.magenta2000.co.uk/acatalog/Bat_Detector_Bat4.html		 Optional. The Magenta bat detector is relatively inexpensive and easy to use, but can only detect vocalizations at one range at a time.
Dodotronic Ultramic 200K
http://www.dodotronic.com/ultramics/?v=7516fd43adaa		 Optional. This microphone has worked well in our experiments. There are many other options for ultrasonic microphones.
Bioacoustic software CIBRA SeaWave
http://www-3.unipv.it/cibra/seawave.html		 Optional. Free software with limited recording capabilities.
CIBRA SeaPro
http://www-3.unipv.it/cibra/seapro.html		 Optional. This software has extensive recording capabilities, and has worked well in our studies. There are many other software packages that work with bioacoustic microphones.
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References

  1. Gartner, K., Buttner, D., Dohler, K., Friedel, R., Lindena, J., Trautschold, I. Stress response of rats to handling and experimental procedures. Lab Anim. 14 (3), 267-274 (1980).
  2. Brudzynski, S. M., Ociepa, D. Ultrasonic vocalization of laboratory rats in response to handling and touch. Physiol Behav. 52 (4), 655-660 (1992).
  3. Davis, H., Pérusse, R. Human-based social interaction can reward a rat’s behavior. Anim Learn Behav. 16 (1), 89-92 (1988).
  4. Hurst, J. L., West, R. S. Taming anxiety in laboratory mice. Nat Methods. 7 (10), 825 (2010).
  5. Sherwin, C. M. The influences of standard laboratory cages on rodents and the validity of research data. Anim Welf. 13 (1), 9-15 (2004).
  6. Maurer, B. M., Doering, D., Scheipl, F., Kuechenhoff, H., Erhard, M. H. Effects of a gentling programme on the behaviour of laboratory rats towards humans. Appl Anim Behav Sci. 114 (3-4), 554-571 (2008).
  7. Burgdorf, J., Panksepp, J. Tickling induces reward in adolescent rats. Physiol Behav. 72 (1-2), 167-173 (2001).
  8. Cloutier, S., Newberry, R. C. Use of a conditioning technique to reduce stress associated with repeated intra-peritoneal injections in laboratory rats. Appl Anim Behav Sci. 112 (1-2), 158-173 (2008).
  9. Werner, C. M., Anderson, D. F. Opportunity for interaction as reinforcement in a T-maze. Pers Soc Psychol Bull. 2 (2), 166-169 (1976).
  10. Cloutier, S., Wahl, K., Baker, C., Newberry, R. C. The social buffering effect of playful handling on responses to repeated intraperitoneal injections in laboratory rats. J Am Assoc Lab Anim Sci. 53 (2), 168-173 (2014).
  11. Cloutier, S., Panksepp, J., Newberry, R. C. Playful handling by caretakers reduces fear of humans in the laboratory rat. Appl Anim Behav Sci. 140 (3-4), 161-171 (2012).
  12. Cloutier, S., Wahl, K. L., Panksepp, J., Newberry, R. C. Playful handling of laboratory rats is more beneficial when applied before than after routine injections. Appl Anim Behav Sci. 164, 81-90 (2015).
  13. LaFollette, M. R., O’Haire, M. E., Cloutier, S., Blankenberger, W. B., Gaskill, B. N. Rat tickling: A systematic review of applications, outcomes, and moderators. PLOS ONE. 12 (4), e0175320 (2017).
  14. Lawlor, M. M. Comfortable quarters for rats in research institutions. Comf Quart Lab Anim. , 26-32 (2002).
  15. Hurst, J. L., Barnard, C. J., Nevison, C. M., West, C. D. Housing and welfare in laboratory rats: welfare implications of isolation and social contact among caged males. Anim Welf. 6 (4), 329-347 (1997).
  16. Hurst, J. L., Barnard, C. J., Nevison, C. M., West, C. D. Housing and welfare in laboratory rats: the welfare implications of social isolation and social contact among females. Anim Welf. 7 (2), 121-136 (1998).
  17. Patterson-Kane, E. G., Hunt, M., Harper, D. Rats demand social contact. Anim Welf. 11 (3), 327-332 (2002).
  18. Panksepp, J. . Affective neuroscience: The foundations of human and animal emotions. , (1998).
  19. Panksepp, J. The ontogeny of play in rats. Dev Psychobiol. 14 (4), 327-332 (1981).
  20. Lampe, J. F., Burman, O., Würbel, H., Melotti, L. Context-dependent individual differences in playfulness in male rats. Dev Psychobiol. 59 (4), 460-472 (2017).
  21. Melotti, L., Bailoo, J. D., Murphy, E., Burman, O., Wurbel, H. Play in rats: association across contexts and types, and analysis of structure. Anim Behav Cogn. 1 (4), 489-501 (2014).
  22. Panksepp, J., Burgdorf, J. 50-kHz chirping (laughter?) in response to conditioned and unconditioned tickle-induced reward in rats: Effects of social housing and genetic variables. Behav Brain Res. 115 (1), 25-38 (2000).
  23. Mason, G. J., Hampton, C., Würbel, H., Wilson, D. Non-invasively assessing disturbance and stress in laboratory rats by scoring chromodacryorrhoea. Altern Lab Anim. 32 (32), 153-159 (2004).
  24. Brudzynski, S. M. Communication of adult rats by ultrasonic vocalization: biological, sociobiological, and neuroscience approaches. ILAR J. 50 (1), 43-50 (2009).
  25. Wintink, A. J., Brudzynski, S. M. The related roles of dopamine and glutamate in the initiation of 50-kHz ultrasonic calls in adult rats. Pharmacol Biochem Behav. 70 (2), 317-323 (2001).
  26. Burgdorf, J., Panksepp, J., Brudzynski, S. M., Kroes, R., Moskal, J. R. Breeding for 50-kHz positive affective vocalization in rats. Behav Genet. 35 (1), 67-72 (2005).
  27. Burgdorf, J., Kroes, R. A., Moskal, J. R., Pfaus, J. G., Brudzynski, S. M., Panksepp, J. Ultrasonic vocalizations of Rats (Rattus norvegicus) during mating, play, and aggression: behavioral concomitants, relationship to reward, and self-administration of playback. J Comp Psychol. 122 (4), 357-367 (2008).
  28. Knutson, B., Burgdorf, J., Panksepp, J. Ultrasonic vocalizations as indices of affective states in rats. Psychol Bull. 128 (6), 961-977 (2002).
  29. Panksepp, J., Burgdorf, J. “Laughing” rats and the evolutionary antecedents of human joy?. Physiol Behav. 79 (3), 533-547 (2003).
  30. Burgdorf, J., Panksepp, J. The neurobiology of positive emotions. Neurosci Biobehav Rev. 30 (2), 173-187 (2006).
  31. National Research Council. . Guide for the care and use of laboratory animals. , (1996).
  32. National Research Council. . Guide for the care and use of laboratory animals. , (2011).
  33. Natusch, C., Schwarting, R. K. W. Using bedding in a test environment critically affects 50-kHz ultrasonic vocalizations in laboratory rats. Pharmacol Biochem Behav. 96 (3), 251-259 (2010).
  34. Pellis, S. M. Agonistic versus amicable targets of attack and defense. Aggress Behav. 14 (2), 85-104 (1988).
  35. Panksepp, J., Yovell, Y. Preclinical modeling of primal emotional affects (SEEKING, PANIC and PLAY): gateways to the development of new treatments for depression. Psychopathology. 47 (6), 383-393 (2014).
  36. Cloutier, S., Baker, C., Wahl, K., Panksepp, J., Newberry, R. C. Playful handling as social enrichment for individually- and group-housed laboratory rats. Appl Anim Behav Sci. 143 (2-4), 85-95 (2013).
  37. Hori, M., Hayashi, T., Nakagawa, Y., Sakamoto, S., Urayama, O., Murakami, K. Positive emotion-specific changes in the gene expression profile of tickled rats. Mol Med Rep. 2 (2), 157-161 (2009).
  38. Yamamuro, T., et al. Neurogenesis in the dentate gyrus of the rat hippocampus enhanced by tickling stimulation with positive emotion. Neurosci Res. 68 (4), 285-289 (2010).
  39. Wohr, M., Schwarting, R. K. W. Affective communication in rodents: ultrasonic vocalizations as a tool for research on emotion and motivation. Cell Tissue Res. 354 (1), 81-97 (2013).
  40. Hori, M., et al. Effects of repeated tickling on conditioned fear and hormonal responses in socially isolated rats. Neurosci Lett. 536 (1), 85-89 (2013).
  41. Hori, M., et al. Tickling during adolescence alters fear-related and cognitive behaviors in rats after prolonged isolation. Physiol Behav. 131, 62-67 (2014).
  42. Pellis, S., Pellis, V. . The playful brain: venturing to the limits of neuroscience. , (2009).
  43. Spinka, M., Newberry, R. C., Bekoff, M. Mammalian play: training for the Unexpected. Q Rev Biol. 76 (2), 141-168 (2001).
  44. Burgdorf, J., Kroes, R. A., Beinfeld, M. C., Panksepp, J., Moskal, J. R. Uncovering the molecular basis of positive affect using rough-and-tumble play in rats: a role for insulin-like growth factor I. Neuroscience. 168 (3), 769-777 (2010).
  45. Werner, C. M., Anderson, D. F. Opportunity for interaction as reinforcement in a T-maze. Pers Soc Psychol Bull. 2 (2), 166-169 (1976).
  46. Burgdorf, J., et al. The effects of selective breeding for differential rates of 50-kHz ultrasonic vocalizations on emotional behavior in rats. Dev Psychobiol. 51 (1), 34-46 (2009).
  47. Mällo, T., et al. Tickling-induced 50-kHz ultrasonic vocalization is individually stable and predicts behaviour in tests of anxiety and depression in rats. Behav Brain Res. 184 (1), 57-71 (2007).
  48. Panksepp, J., Burgdorf, J. Laughing rats? Playful tickling arouses high-frequency ultrasonic chirping in young rodents. Am J Play. 2 (3), 357-372 (2010).
  49. Pellis, S. M., Field, E. F., Smith, L. K., Pellis, V. C. Multiple differences in the play fighting of male and female rats. Implications for the causes and functions of play. Neurosci Biobehav Rev. 21 (1), 105-120 (1997).
  50. Burgdorf, J., Wood, P. L., Kroes, R. A., Moskal, J. R., Panksepp, J. Neurobiology of 50-kHz ultrasonic vocalizations in rats: electrode mapping, lesion, and pharmacology studies. Behav Brain Res. 182 (2), 274-283 (2007).
  51. Panksepp, J. Rough and tumble play: A fundamental brain process. Parent-Child Play. , 147-184 (1993).
  52. Panksepp, J., Siviy, S., Normansell, L. The psychobiology of play: theoretical and methodological perspectives. Neurosci Biobehav Rev. 8 (4), 465-492 (1984).
  53. Pellis, S. M., Pellis, V. C. Rough-and-tumble play and the development of the social brain. Curr Dir Psychol Sci. 16 (2), 95-98 (2007).

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Cloutier, S., LaFollette, M. R., Gaskill, B. N., Panksepp, J., Newberry, R. C. Tickling, a Technique for Inducing Positive Affect When Handling Rats. J. Vis. Exp. (135), e57190, doi:10.3791/57190 (2018).
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