ショウジョウバエのニューロン樹状分枝複雑さの定量解析

樹状突起、ニューロンの分岐予測であるは、他のニューロン^1,2からニューロンの感覚およびシナプス入力を含むフィールドをカバーします。樹枝状結晶はシナプスの形成の重要なコンポーネントおよびニューロンに電気刺激の伝播し同様、シナプスの入力の統合において重要な役割を果たします。樹状分枝 (da) は、新しいシナプスを作成する新しい樹状分枝ニューロンを形成するプロセスです。Da 支店密度などグループ化パターンの形態と開発多段階の生物学的プロセスの結果、神経機能に相関の高い。このプロトコルの目的はの神経 dendritric 楔形の複雑さの定量分析のためのメソッドを提供するショウジョウバエ。

樹状突起の複雑さは、シナプスの種類、接続、およびパートナーのニューロンからの入力を決定します。分岐パターンおよび樹枝状結晶の密度は樹状フィールド^3,4上に収束する信号処理に関与しています。樹状突起は、開発調整の柔軟性を持っています。例えば、シナプス合図では、体性感覚ニューロン発達段階と成熟した神経系⁵のデンドライト組織に影響を及ぼす。神経接続の確立は、形態形成と樹状突起の成熟に依存します。樹状突起の奇形は神経機能障害に関連付けられます。研究は、da ニューロンの形態形成の異常がアルツハイマー病 (AD)、パーキンソン病 (PD)、ハンチントン病 (HD) を含む複数の神経変性疾患、ルー ・ ゲーリック病の病因に貢献することを示されている/筋萎縮性側索硬化症 (ALS)^6,7,8。シナプス変化は衰退とニューロン機能^7,8の減損とのコンサートで、広告の初期の段階で表示されます。ただし、デンドライト病理学がこれらの神経変性疾患の病因に貢献する方法の具体的な内容は、とらえどころのないままです。

規制当局、タンパク質^9,10、転写因子、細胞表面の受容器^{11,12 配位子の Wnt ファミリーなどの複雑なネットワークをエンコードする遺伝子によって樹状突起の発達の制御します。}.ショウジョウバエda ニューロンから成る 4 つのクラス (クラス I、II III、IV)、クラス IV の da ニューロンは最も複雑な分岐パターンを持っているし、より良い理解形態^{13、強力な実験的システムとして採用されています。 14}。初期形態形成における過剰発現や RNAi はクラス IV の da ニューロンの遺伝子のサイレンシングは分岐パターンとデンドライト剪定¹³の変化の結果します。神経細胞の樹状突起パターン形成の定量分析のための実用的な方法を開発することが重要です。

我々 は以前にSOX5のショウジョウバエ相同を黙らせる、 Sox102F、導いた短い樹状突起の da ニューロンとクラス IV da ニューロン¹⁵の複雑さを軽減します。ショウジョウバエにおける神経樹状パターン形成の複雑さ (NDAC) の定量分析の手順を紹介します。このプロトコルは、以前説明した方法論からの適応は、da ニューロンの開発を試金する簡潔な方法を提供します。ロバストな画像のラベル付け、3 齢幼虫の体壁^16,17,18,19の da ニューロンを示しています。NDAC と体内の発達の違いを調査したい人のための貴重なプロトコルです。