麻酔下のマウスから脳脊髄液のコレクションのための改良法

脳脊髄液は神経科学研究の分析のための貴重な体液です。CSF (ない赤血球とだけいくつかの白い血液細胞) 数の細胞を含む血液の血漿から作られた主、ほとんどタンパク質無料します。中枢神経系 (CNS) と密接な接触で流体の一つだ、それは周辺システムに脳と脊髄からの多くの電解質渡すことができます。ヒトでは、CSF サンプル病の診断で支援するために収集することができますまたは臨床試験で研究目的のため脊髄をタップ (または腰椎穿刺) としてはマイナーな侵襲的なプロシージャ: CSF 流体は、これらに直接アクセスすることがなく中枢神経系に対する変更を反映できます組織。したがって、近年、診療所の研究目的のためアルツハイマー病や他の痴呆^1,2,3などの神経変性疾患の患者から髄液のサンプルを得られています。潜在的クリニック^2,3で病気の診断を支援するため髄液のサンプルを使用して開発している多くのバイオ マーカー分析があります。ただし、病^4,5を具体的に診断する機密性の高い、一貫性のある結果を生成するこれらのアッセイの信頼性に関する多くの議論があります。だから、高い感度と特異性の神経変性疾患を診断する標準的な技術の生産を支援するより良いアッセイおよび CSF で見つけることができる、ターゲットの開発のための大きい必要があります。病気の人間の脳脊髄液サンプルの潜在的な重要性、神経科学研究の齧歯動物から CSF のコレクションも興味のです。

マウスは医学生物学の重要な動物のおよび潜在的な治療上の化合物とひと臨床試験の前に概念実証研究のテストを可能にします。マウスのそれは、小動物では、脳への近さのため髄液のサンプルを得ることが困難槽は、小脳と延髄の背側表面の開口部を介して取得するマウスにおける CSF コレクションの通常の方法は。これにより、難易度を分析することは困難は脳脊髄液サンプルを収集し、血液細胞からの汚染のリスクを増加させる、血管に近接。これらの難しさのためほとんどの研究者が分析 (通常 5-7 μ として記載) のため髄液の少量を取得できるだけで、血液細胞による CSF 試料の汚染分析^6,7,8の最大の関心事^,9. 血液汚染することができます結果を隠すし、本当に中枢神経系の状態を反映します。マウスから収集された量は、通常は (重複 3 通の) 1 つだけ測定のために十分に、限られたサンプルの収集研究を影響さらに、酵素免疫測定法 (ELISA) を使用します。したがって、脳脊髄液のサンプルは通常、十分なサンプルを複数のアッセイを実行するために複数のマウスからプールされます。豊富なプロトコルを開発、マウスから脳脊髄液の汚染されていないコレクション目的と大きくとげっ歯類を用いた神経科学研究の改善に有益になります。

このプロトコルでは、豊富な技術で (10-15 μ L の平均) 麻酔下マウスから CSF のコレクションで詳しく説明し、CSF コレクション血¹⁰からの汚染を最小限に抑えるための現在知られている方法の改善します。CSF のコレクションのための堅牢なプロトコルは、病を診断するに役立つだけでなく、中枢神経系に影響を与える疾患の根底にあるメカニズムに研究を向上させるために使用できるバイオ マーカーの CSF ベースの試金の開発に役立ちます。