Перекрывающиеся пептид библиотека для сопоставления Qa-1 Epitopes в протеине

QA-1 принадлежит к группе неклассических гистосовместимости комплекс 1В (MHC-Ib) молекул в мышах. Его человеческие гомолога является HLA-E. Предыдущие доказательства свидетельствуют, что КК-1 молекулы имеют важные биологические функции. Во-первых Qa-1 молекулы играют важную роль в обследовании клетки для структурной и функциональной целостности. В этой связи Qa-1 молекулы развивались несколько стратегий для наблюдения за нормальное функционирование клетки. Одна такая стратегия позволяет Qa-1 молекул образует комплексы с обработанной лидер пептид (epitope), т.е. КК-1 определяющим модификатор (Qdm), который обрабатывается от классической молекул MHC-Ia в эндоплазматический ретикулум¹. Эти комплексы Qa-1/Qdm позднее отображения на поверхности клетки и привязку к тормозной NKG2A рецепторов на клетки подавляют НК убийство деятельности². Если выражение молекул MHC-Ia теряется, ячейки (например злокачественных клеток) становится чувствительным к НК убийство². Эта стратегия позволяет Qa-1 молекулы для формирования новых комплексов Qa-1/epitope на поверхности клеток, что является несовершенным в TAP (транспортер, связанные с обработкой антигена)³ и/или ERAAP (aminopeptidase эндоплазматического ретикулума, связанные с антиген обработка)⁴ (оба недостатки часто происходят в злокачественных клеток). Ячейка, которая выражает эти новые комплексы Qa-1/epitope можно затем признал и устраняется epitope специфичные Qa-1-ограничено CD8⁺ T клетки. Во-вторых Qa-1 молекулы побудить иммунной правила⁵. В этой связи Qa-1/epitope комплексов было показано, чтобы стимулировать CD8⁺ регулирования T (Treg) клетки, которые имеют важное значение для предотвращения иммунной опосредованного ущерба self ткани^{6,,78 ,9,10}. В-третьих Qa-1-ограничено CD8 Treg клеток было показано ограничение иммунного ответа против вирусной инфекции¹¹⁺ .

Таким образом конкретные увеличения CD8 эпитопа специфики Qa-1-restrictred⁺ T клетки является потенциально перспективной стратегией для ликвидации аномальных клеток, для повышения иммунной регуляции и контроля за масштабами вирус индуцированной иммунных реакций. Хотя он не был определен ли увеличение epitope конкретных Qa-1-ограничено CD8⁺ T клетки могут повысить иммунной наблюдения и ограничить вирус индуцированной иммунных реакций, наши лаборатории и другие четко показали, что иммунизации с epitopes Qa-1 можно дополнить функции Qa-1-ограничено CD8⁺ Treg для патогенных аутоиммунные CD4 клеток конкретных⁺ T клеток, приводит к эффективного контроля над CD4⁺ Т клеток опосредованной аутоиммунных заболеваний в разнообразие животных моделей таких экспериментальных аллергический энцефаломиелит (животной модели человеческого рассеянный склероз)^6,10,⁷-индуцированной коллагена артрит (животной модели человеческого ревматоидный артрит), и ⁸-ожирением диабетом (животной модели человеческого типа 1 диабетом). Кроме того, мы обнаружили, что иммунизации с epitope Qa-1 ткани конкретных приводит к конкретным контроля иммунной опосредованного воспаления в этой ткани путем увеличения CD8 клетки⁺ Treg¹². Выше успехи доклинические исследования указывают на необходимость всесторонней оценки Qa-1 epitope иммунизации для лечения иммунной системы заболеваний тканей конкретным и потенциально для лечения других заболеваний, связанных с недостатками в водопроводной и ERAAP.

Соответственно существует спрос на технологию, которая может быстро и надежно анализировать Qa-1 epitopes в протеине. В этой связи был описан ограниченное количество биологически важных epitopes Qa-1. Большинство этих epitopes Qa-1 были определены интуитивно во время изучения CD8⁺ T мобильных ответы на бактерии¹³, дефицит крана³клетки, клетки в ERAAP⁴и клетки, которые вызывают ЕАЕ^{6, 9}. Таким образом высокая пропускная способность технику желательно для идентификации биологически важных epitopes Qa-1 в определенных белков. Ниже мы описываем перекрывающихся пептида (OLP) библиотека стратегию, которая сопоставляет функциональных эпитопов Qa-1 в протеине с помощью Qa-1-ограниченной CD8⁺ Т-клеток линии для OLP бассейн (OLP_pool) белка.