מיקום מתאים ואיפוק של איבר הינד עכברוש עבור הדמיה ברזולוציה גבוהה ממוקד של עצם באמצעות מיקרו-ארכיטקטורה In Vivo שחושב מיקרו טומוגרפיה

פרוטוקול זה מספק לצופים ראשונה מנחה מפורט עבור הרדמה. ראויה, השמה, איפוק של העכברוש במהלך ויוו µCT סריקה של האיבר האחוריות. קווים מנחים אלה מאפשרים למשתמשים של ויוו µCT סריקת מערכות להשיג ברזולוציה גבוהה תמונות באיכות גבוהה של עצם השוקה זה יעובד על כימות של עצם תלת-ממדי מיקרו-ארכיטקטורה. שלבים קריטיים בפרוטוקול הדרושים כדי להבטיח נאות מיצוב ואיפוק לערב ההרדמה המתאים של החולדה, כמו גם הרחבת האיבר הינד הרחק כל מבנים קריטיים אחרים עד שזה מתוח, אבל לא במצב לא טבעי. לתוצאות ההדמיה אופטימלית, זה הכרחי כי החולדה עכשיו לרמה של רגיעה מוחלטת, palpebral, פדלים רפלקסים אובדים. בנוסף, צריך להיות מורחב הרגל סריקה, כל כף הרגל והקרסול צריך לרסן קצף. השיטות המתוארות לעיל כדי להשיג מיקום אופטימלי של הרגל סריקה תבטיח: 1) הגפיים האחוריות של חולדות בתוך מחקר באופן עקבי מונחה עצמים באותו כיוון, וכך מאפשר את קרן רנטגן לעבור באותו האזור של כל רגל בעת סיבובו סביב המדגם; 2) התנועה הן בהתנדבות והן לא רצונית של האיבר הינד לא תתרחש, ובכך לחסוך את פוטנציאל התנועה חפצים לשבש איכות התמונות שנרכשו; 3) חסימות של אובייקטים (קרי, הזנב) הם למנוע, ובכך לחסוך את פוטנציאל חלקי נפח אפקטים לייצר מדידות BMD ו- TMD לא מדויק. קווים מנחים אלה ניתן לשנות כל העכברוש בודדים, כמו קצב חילוף החומרים איזופלוריין, מיצוב יכול להשתנות בהתאם למתח וגוף גודל ²². הנפוץ ביותר ויוו סריקה המכונות מיועדות מודלים בעלי חיים קטנים (קרי, עכברים, חולדות, ארנבים, שרקנים) ויהיה להחלפה שלבים בעלי חיים כדי לאפשר סריקה של גדלים בעלי חיים שונים. לכן, הם יכולים להכיל מגוון רחב של משקל הגוף.

למרות ויוו µCT סריקה היתרי העכברוש לטאבים, rescanned אם התמונות שנרכש הסריקה הראשונית הן באיכות ירודה, חזר על סריקת תחשוף את החולדה מינונים נוספים של הרדמה קרינה ו איזופלוריין עבור תקופה ממושכת של זמן. חודשי חשיפה לקרינה חוזרות ונשנות של 600 mGy ממוקד על עצם השוקה עכבר מעל לארבעה חודשים אינה גורמת תופעות לוואי העצם מיקרו-ארכיטקטורה בהשוואה של הגפיים האחוריות contralateral ¹, אבל זה לא לברר את הבטיחות של שתי הסריקות ונשנים הירושה מיידית. מגבלות נוספות בטכניקה המתוארת כוללים את הצורך להרחיב את האיבר הינד מתוח עם כוחות שהוחלה עליו לשמור את זה עדיין, אשר מוגן ע י כמה שינויים במבנה העצמות. בעוד חומרת פיקוח של האיבר הינד במהלך סריקה תלויות כל מטרת מחקר, מחקרים קודמים מהמעבדה שלנו מעורבים חודשי חוזרות ויוו µCT הדמיה של הגפיים האחוריות אחד הביא הבדל בקליפת המוח פרמטר המיקרו-ארכיטקטוני, אקסצנטריות, בהשוואה האיבר הינד contralateral זה לא עברה סיומת חוזרות ונשנות, ייצוב וסריקה ¹. האקסצנטריות היא מידה של המבנה האליפטי של עצם קורטיקלית, שינו תומך בתגובה לשינויים. לכן, כאשר בשיטה זו של מיצוב, הרחקה של האיבר הינד עבור חזר ויוו µCT הדמיה, התחשבות צריכה להיעשות כאשר הערכת ופרשנות משתנה תומכות בפרמטרים המיקרו-ארכיטקטוני.

בעוד ההנחיות לעיל סופקו על הדמיה וניתוח של רקמת העצם, התאמות קלות בפרוטוקול חייבים להיעשות כאשר הדמיה ברקמה הרכה של האיבר האחוריות. באופן ספציפי, הדרך שבה הוא האיבר הינד מורחב מן הגוף, מרוסן חייב להילקח בחשבון, כפי ההליך הנוכחי misshapes את הכיוון של הרקמות הרכות (שריר, רקמת שומן) לתוך מיקום חריג משך זמן הסריקה. לכן, כאשר חיוץ מודל זה לשימוש בתחום ההדמיה של רקמות רכות של האיבר הינד, כמה שינויים צריכה להיעשות כדי הטכניקה איפוק כדי להפחית או למנוע את השינויים המיקום של הרקמות אחת ביחס לשניה.

יתר על כן, ההנחיות נכתבו במיוחד מבוסס על ניסיונם של קבוצת המחקר שלנו, עם זאת, ניתן לשנותן כדי להכיל אחרים סורקים µCT זמין מסחרית ויוו . שיטות אחרות המוצעות למיקום ושינוי לרסן את האיבר האחוריות עשויות להיות זמינות על-ידי היצרן של µCT ויוו מערכת סריקה. הנמכרים ביותר ויוו µCT יחידות רשימה פוליסטירן פוליפרופילן, צינורות פלסטיק עם שיניים שעווה להחזיק בליטת כף הרגל כמו מקובל חומרים ושיטות הרחקה הרגל סריקה. עם זאת, השיטה המובאת פרוטוקול זה לספק יותר מבוקרת ועקבית מיצוב איפוק של הרגל סרוקים, באופן עקבי מפיקה תמונות באיכות גבוהה. המנחים המובאים בשיטה הנוכחית דורשים ציוד מיוחד צורך בהרדמה של העכברוש, כגון מכשיר אידוי, צינורות, מסכות, אינדוקציה צ’יימברס, חמצן. למרות הציוד מזוהה עם עלות גבוהה יותר במקצת לעומת זריקות הרדמה, זה מאפשר לחוקרים את היכולת במהירות ובדיוק לגרום הרדמה בעומק מסוים של תודעה, אשר מספק יתרון על פני האלטרנטיבה שיטות.

באמצעות ההנחיות המפורטות בשיטת ההווה וידאו, חוקרים ברזולוציה גבוהה ויוו µCT בטכנולוגיות לחקור את התייחסותם עניין להיות מסוגל כראוי באופן עקבי אוריינט ואת לרסן איבר הינד עכברוש גבוה איכות צילום רנטגן הדמיה. זה לספק רצף בתחום ייבוא תמונות ויוו µCT לשמש כצעד לקראת אופטימיזציה של עקביות ודיוק בתוך מחקרים, לאפשר השוואות בין עיונים בספרות. באופן דומה, לפרוטוקולים של שיטות אלה ניתן להרחיב לשימוש מיני מכרסמים אחרים, לרבות עכברים, על אף כמה שינויים נדרשים ^2,10. לדוגמה, הריסון של כף הרגל בצינור קצף יכולה לכלול את הקרסול כדי למזער את האפשרות של תנועת הרגל במהלך הסריקה. בנוסף, כף הרגל מלא תתאים בעל קצף. לפיכך, האצבעות לא להאריך מתוך הסוף של בעל כפי שהם עושים כאשר אבטחת כף הרגל של חולדה. בנוסף, הגוף של העכבר אינו דורש הריסון אותו עם סרט כמו החולדה. קונוס קטן האף יכול לשמש לשמירה על הרדמה בעכברים במהלך הסריקה. אם קונוס קטן יותר מהאף אינה זמינה, אחד יכול לאבטח את הכפפות nitrile מעל קונוס האף זמין, עושים חתך קטן בתא כפפות כדי לספק מקום שאינו מתאים לאף של העכבר כדי לספק הרדמה תוך שמירה על כלב ים סביב האף.

בעוד עצם השוקה proximal הוא האתר המרכזי של החקירה של שינויים העצם-מבנה בחולדה, הנחיות נכונה ועקבית המיקום של אתרים אחרים השלד כגון עצם הירך וכן לחוליות המותניים צריכה ייחקרו וכי הוקמה עבור עקביות בספרות. עם זאת, כאשר התחייבות להמשך המחקר מעורבים ההדמיה של חוליות המותניים, שיקולים להתבצע כפי הדמיה של עמוד השדרה מספק חשיפה לקרינה האיברים הסמוכים ורקמות.