Un modelo de isquemia cardíaca crónica en cerdos usando un Constrictor Ameroid

los procedimientos descritos aquí fueron aprobados por el corazón nacional, pulmón, sangre Instituto Animal atención y Comité de uso de los institutos nacionales de salud y cumplir con las políticas descritas en la política de servicio de salud pública en Atención humana y uso de animales de laboratorio, la ley de Bienestar Animal y la guía para el cuidado y uso de animales de laboratorio. Nota: el propósito de este procedimiento quirúrgico es conseguir un modelo animal de isquemia crónica que puede utilizarse para desarrollar tratamientos que son clínicamente relevantes para los pacientes con CAD severa. Esto no puede lograrse usando un modelo en vitro. 1. animales utilizar cerdos Yorkshire macho pesa entre 12 y 15 kg. 2. pre-quirúrgica procedimientos para un antibiótico profiláctico, utilice amoxicilina y clavulanato de potasio (15 mg/kg) por vía oral dos veces al día comenzando 24 horas antes de la cirugía. Nota: Este antibiótico oral se inicia antes de la cirugía para asegurarse de que el cerdo trague y también asegurarse de que no tengan una reacción alérgica al medicamento postoperatoriamente. Retener la comida y el agua de cerdo 12 h antes de la cirugía. En el día de la cirugía, anestesiar el cerdo con un cóctel de glicopirrolato (0.01 mg/kg), ketamina (33 mg/kg) y midazolam (0.5 – 0.75 mg/kg) dado intramuscular (IM). Colocar un catéter de 20 G intravenoso (IV) en una vena de la oreja e intubar al animal con un tubo endotraqueal 7.0 de p. Nota: Ajustar el tamaño del catéter IV y el tubo endotraqueal como apropiado para el tamaño del cerdo. Eliminar el vello (depilación) en el lado izquierdo del cerdo desde el hombro hasta el ombligo y desde la línea media abdominal a la columna vertebral. Administrar las profilaxis con antibióticos (piperacilina y tazobactam: 100 mg/kg IV) y medicación del dolor (buprenorfina sostenido lanzamiento: 0,2 mg/kg subcutánea (SC) o un transdérmico de fentanilo parches 25-50 μg/h). Nota: El antibiótico IV se da porque los animales se ayunaban durante 12 h antes de la cirugía y no reciben el mencionado antibiótico oral durante este tiempo. Transporte del cerdo a la sala de operaciones y conectar el tubo endotraqueal a la máquina de anestesia, equipada con un sensor de corriente lateral para controlar los gases de las vías respiratorias. Mecánicamente ventilar el cerdo usando un volumen tidal de 10 mL/kg como punto de partida y no exceder una presión de vía aérea de 30 cm H 2 O. sistema la frecuencia respiratoria entre 10-20 respiraciones por minuto (bpm) y ajuste como sea necesario para mantener el fin-de marea (2) CO Niveles de PetCO 2) entre 28 y 35 mm Hg. mantener la anestesia con isoflurano (1-3%) o sevoflurano (2-5%). Colocar el lado derecho del cerdo hacia abajo en la mesa de operaciones. Coloque todos los sondeos necesarios para monitorear la temperatura del cuerpo (BT), Electrocardiograma (ECG), oximetría de pulso (SpO 2), etc. preparar el sitio quirúrgico mediante tres peelings alternas con 2% de clorohexidina y el 70% de alcohol (se aplica en un movimiento circular, comenzando con el centro y moviéndose hacia afuera). Cubra el sitio quirúrgico con técnica aséptica 21. 3. Procedimiento quirúrgico exponen el corazón a través de una toracotomía izquierda. Hacer una incisión en la piel paralelamente a la 4 th y 5 th intercostal espacio unos 8-9 cm de largo con una hoja de bisturí Nº 10. Corte a través del dorsal ancho y Serrato ventralis músculos usando un par de tijeras de Metzenbaum curvas y pinza Adson Brown. Uso de electrocauterización para mantener la hemostasia necesaria. Entrar en la cavidad pleural a través de los músculos intercostales entre el 4 to y 5 costillas de th con el corte de tijeras de Metzenbaum a lo largo del aspecto anterior del 4 nivel de la costilla. Para reducir la posibilidad de dañar accidentalmente el pulmón, apague el ventilador en la exhalación justo antes de entrar en la cavidad pleural. Una vez que ha sido violada la cavidad pleural, vuelva a encender el ventilador. Utilice un pequeño separador de Finochietto para separar las costillas, exponiendo el corazón. Uso Debakey pinzas para sujetar y levantar el pericardio. Utilice tijeras de Potts para hacer un pequeño orificio en el pericardio, permitiendo que el aire entrar en el espacio pericárdico. Continúe la incisión con las tijeras de Potts en el cruce de las arterias LAD y LCX. Pinza Babcock de uso para retraer la orejuela auricular izquierda. Con Debakey y pinzas de ángulo recto pequeño, disecar la arteria LCX del tejido circundante antes o próximo a la rama obtusa marginal de 1 st. Lugar dos bucles de vasos debajo de la arteria disecada de la LCX, uno en cada extremo. Sostenga un constrictor de ameroid de 3,0 mm de tamaño con el fórceps de pequeño ángulo recto y levante los lazos del buque para guiar suavemente la arteria LCX a través de la apertura de la constrictor. Por lo que la apertura es hacia arriba, gire suavemente el constrictor. Eliminar los bucles de vasos. Vea la figura 1. Nota: Adecuada disección de la arteria es esencial para evitar que se doblen. Seleccione el constrictor de tamaño apropiado para el animal individual. El constrictor tamaño apropiado rodean cerca del buque sin inicialmente constricting los vasos. Los cerdos domésticos pesan entre 12 y 15 kg requieren ameroid constrictor 2.5-3.5 mm de tamaño. La localización del ameroid constrictor en el recipiente depende en el tamaño deseado de la zona isquémica. Volver a aproximar el pericardio y cierre con suturas de polipropileno 4-0. Restablecer la presión negativa torácica mediante la inserción de una sonda Fr 12 o su equivalente en el espacio pleural con el fin de salida hacia fuera entre las capas de cierre, generalmente dos espacios intercostales posteriores al sitio de la toracotomía. Nota: Observe el atelectasia del pulmón antes de cerrar las costillas. Si se observan signos de inflado, volver a inflar los pulmones manualmente hasta una presión de 30 mm Hg. Cierre del tórax mediante suturas polipropileno 1 de la capa intercostal, suturas de polipropileno 0 de Serrato y capa fascial, suturas polipropileno 2-0 para la capa subcutánea y las suturas de polipropileno 3-0 para la capa subcuticular. Grapas o la sutura de la piel. Acople una llave de tres vías al final del tubo del pecho y Evacue el aire en el pecho con un 40-60 cc jeringa hasta logra un sello negativo. Rodar al animal sobre su lado del esternón o contrario para facilitar el quitar todo el aire. Una vez el pecho mantiene la presión negativa, retire el tubo de tórax y el punto de salida de la sutura. Si los animales están alojados individualmente postoperatoriamente, la incisión puede ser vendada durante varios días. 4. En el post-operatorio tras cierre, infiltrarse en la incisión a lo largo de ambos lados del sitio de la toracotomía con bupivacaína 0.25%. Destetar al animal apagado el ventilador y apague la anestesia. Retirar el tubo endotraqueal una vez que el animal respira por cuenta propia y de la deglución. Vigilar el animal hasta que se recuperó completamente (despierto y esternal). No debe existir ninguna anormalidad o arritmias en el ECG, la BT deben ser 38.7-39,8 ° C, la SpO 2 debe ser de 95-100% y la frecuencia respiratoria debe ser 32-58 bpm. Administrar amiodarona (100 mg, por vía oral dos veces al día) y Bisulfato de clopidogrel (75 mg, por vía oral una vez al día) para prevenir la trombosis y arritmias. Continuar con amoxicilina y clavulanato de potasio (15 mg/kg) por vía oral dos veces al día para operación después de 10 días. Dolor postoperatorio se controla con buprenorfina SR (liberación sostenida) 0,2 mg/kg. SQ cada tres días. La buprenorfina SR puede complementarse con carprofeno (4,4 mg/kg) una vez y luego (2.2 mg/kg) PO o IM BID. Mantener todo el material de ropa de cama y forrajeo de los animales ' s área de la vivienda hasta que la incisión haya sanado completamente.