アメロイド収縮を使用して豚の慢性心筋虚血モデル

ここで説明している手順国立心臓、肺、血液研究所動物愛護および国立衛生研究所利用委員会によって承認され、の公衆衛生サービス ポリシーに記載されているポリシーに準拠思いやりのあるケアと実験動物の動物福祉法とケアのためのガイドの使用および実験動物の使用。 注: この手術の目的は、重篤な冠動脈疾患患者に臨床的に関連する治療法の開発に使用することができます慢性の心筋虚血の動物モデルを生成します。これは 生体外 モデルを使用して実行できない。 1 です動物 男性ヨークシャー豚重さ 12 〜 15 キロの間を使用して、。 2. pre-surgical プロシージャ アモキシシリンとクラブラン酸カリウム 15 mg/kg を手術前に 24 h を始めて、1 日 2 回経口使用予防的抗生物質のため 。 注: この経口抗生物質が手術豚はそれを飲み込むことを確認し、また、薬へのアレルギー反応に対して手術後がないことを確認する前に開始します。 食品と手術前に 12 h 豚から水を差し控える。 手術の日、麻酔のケタミン (33 mg/kg)、ミダゾラム (0.5 – 0.75 mg/kg)、およびアトロピン (0.01 mg/kg) の筋肉 (IM) を与えられたのカクテルが豚。 は耳静脈内 20 G の静脈内投与 (IV) カテーテルを置き 7.0 Fr 気管内チューブと動物を挿管します 。 注: IV カテーテルとブタのサイズに応じて気管内チューブのサイズを調整します。 臍に肩と脊柱に腹部正中線から豚の左側の毛 (ひげ) を削除します。 予防的抗生物質を投与する (ピペラシリンとタゾバクタム: 100 mg/kg IV) 薬を痛みと (ブプレノルフィン持続リリース: 0.2 mg/kg 皮下 (SC) やフェンタニル経皮パッチ 25 50 μ g/h). 注: IV 抗生物質を投与動物手術前 12 時間絶食し、今回の間に前述のように経口抗生物質が届かないので。 は手術室に豚を輸送、気管内チューブを気道ガスを監視する副流センサーを搭載した麻酔器に接続します。機械的に換気開始点として 10 mL/kg の一回換気量を使用して豚と 30 cm H 2 o. セット分 (bpm) あたり 10-20 呼吸間呼吸の気道圧を超える、呼気終末 CO 2 (を保つために必要に応じて調整28 と 35 mm hg 維持イソフルラン (1-3%) と (2-5%) セボフルラン麻酔の間 PetCO 2) レベル。 は、オペレーティング テーブルの上に豚の右側を配置します。体温 (BT)、心電図 (ECG)、パルス酸素濃度計 (スポ 2) 等 を監視するためすべての必要なプローブを添付 2% クロルヘキシジン、70% アルコールで交互ボディス クラブ 3 経由で手術部位を準備 (において、外側に移動してセンターで始まる円運動). 無菌 21 を使用して手術部位をドレープします。 3。手術 左開胸により心を公開します。 皮膚切開を 4 番目 に平行になるよう、5 番目 の肋間スペース約 8-9 cm 長さ号 10 メス刃を使用しています。 はリブロース筋肉デカールバサミ Metzenbaum、ブラウン アドソン鑷子のペアを使用して広背筋と前鋸をカットします。必要に応じて止血を維持するために電気焼灼器を使用します。 は、4 番目 と 4 番目 の肋骨の前方の面に沿って Metzenbaum はさみ切断と 5 番目 のリブの間の胸腔内肋間筋を入力します。誤って肺の損傷のチャンスを減らすためには、胸腔内に入る直前に息を吐くのこのベンチレーターを切る。胸腔内が破られて、一度オンに戻すベンチレーター。 心を公開する離れて、肋骨を広げるため小さな Finochietto リトラクターを使用します。 使用 Debakey 鉗子をつかみ、心膜を持ち上げます。ポッツはさみを使って、心膜、心膜のスペースを入力する空気の小さい穴を作る。LAD と LCX の動脈の接合点ポッツ ハサミで切開を続ける。 使用バブコック鉗子左心耳を撤回します。LCX 動脈の前にまたは近位端の周囲の組織から 1 st の鈍縁枝を解剖 Debakey と小さな直角鉗子を使用します。 は、切り裂かれた LCX 動脈、各端に 1 つ下 2 つの容器のループを配置します。サイズ 3.0 mm アメロイド収縮を持つ小さな直角鉗子、収縮の開口部を通して LCX 動脈をゆっくりとガイド船ループを持ち上げます。開口部を向いているので、ゆっくり括約筋を回転させます。容器ループを削除します。 図 1 を参照してください 。 注: 適切な動脈解離は、よじれを防ぐために不可欠です。個々 の動物に適切なサイズの収縮を選択します。適切なサイズの収縮が密接にせず最初船船を取り囲みます。アメロイド constrictors サイズ 2.5-3.5 ミリメートル 12 〜 15 キロの重量を量る国内の豚が必要です。船舶のアメロイド収縮の場所は虚血領域のサイズに依存します。 心膜を再近似し、4-0 ポリプロピレン縫合糸で閉じる。 12 Fr の胸腔チューブまたはそれと同等を閉鎖、一般に 2 つの肋間開胸術サイトに後方の層の間を終了終了と胸膜腔に挿入することで呼吸器の負圧を再確立します 。 注: は、肋骨を閉じる前に無気肺を観察します。30 mmhg の圧力まで手動で肺を膨らませる過少膨張の兆候が認められた場合。 は、肋間神経の層、皮下層の 2-0 ポリプロピレン縫合糸と真皮層の 3-0 ポリプロピレン縫合糸鋸と筋膜層のポリプロピレン縫合糸 0 1 ポリプロピレン縫合糸を使用して、胸を閉じます。ホチキス止めや皮膚を縫合します。 胸管の端に 3 ウェイ ストップ コックを接続および否定的なシールを達成するまで、40-60 cc 注射器で胸に空気を避難させます。すべてのエアコンの取り外しを容易にするその胸骨または反対側に動物をロールバックします。胸は、負圧を維持して、一度胸管を外し、出口部を縫合します。切開することができます数日間包帯をされる動物は単独で手術後建物される場合。 4。術後 閉鎖、0.25% ブピバカインで開胸術サイトの両側に沿って切開に潜入します。 人工呼吸器を動物を引き離すし、麻酔をオフに。動物は独自に呼吸したら気管内チューブを削除し、嚥下します。 (目を覚まし、胸骨)、それは完全に回復するまで、は動物を監視します。異常はないはず、不整脈心電図、BT は 38.7-39.8 ° C をする必要がありますまたは SpO 2 は 95-100% にする必要があります、呼吸数は 32 58 bpm をする必要があります。 管理アミオダロン (100 mg、1 日 2 回経口投与)、血栓症や不整脈を防ぐためにクロピドグレル硫酸水素 (75 mg、1 日 1 回経口投与)。アモキシシリンとクラブラン酸カリウム 15 mg/kg 1 日 2 回経口投与を続行します。10 日後の操作。術後の痛みは、ブプレノルフィン SR (持続的なリリース) で制御 0.2 mg/kg。SQ 3 日おき。ブプレノルフィンの SR は一度カルプロフェン 4.4 mg/kg で補うことができ、(2.2 mg/kg) PO または IM 入札します。 動物の寝具と採材をすべてを保つ ' 住宅地切開は完全に治癒するまで s。