Ein chronischer kardialer Ischämie-Modell bei Schweinen, die mit einem Ameroid Constrictor

die hier beschriebenen Verfahren wurden vom National Heart, Lung, und Blut Institut Animal Care und Use Committee an den National Institutes of Health zugelassen und entsprechen den Richtlinien in der öffentlichen Gesundheitspolitik Service auf Humane Pflege und Verwendung von Labortieren, das Tierschutzgesetz und die Anleitung für die Pflege und Verwendung von Labortieren. Hinweis: Dieses chirurgische Verfahren soll ein Tiermodell der chronischen myokardialen Ischämie zu produzieren, die verwendet werden können, um Therapien zu entwickeln, die für Patienten mit schweren CAD klinisch relevant sind. Dies kann nicht erreicht werden, mit einem in-vitro- Modell. 1. Tiere verwenden männliche Yorkshire Schweine wiegen zwischen 12 und 15 kg. 2. Pre-surgical Verfahren für eine prophylaktische Antibiotika verwenden mündlich zweimal täglich ab 24 h vor der Operation, Amoxicillin und Clavulanat Kalium (15 mg/kg). Hinweis: Diese orale Antibiotika wird vor der Operation, um sicherzustellen, dass das Schwein es zu schlucken und auch sicherstellen, dass sie keine allergische Reaktion auf das Medikament postoperativ haben gestartet. Zurückzuhalten, Nahrung und Wasser vom Schwein 12 h vor der Operation. Am Tag der Operation zu betäuben das Schwein mit einem Cocktail von Ketamin (33 mg/kg), Midazolam (0,5 – 0,75 mg/kg) und Glykopyrrolat (0,01 mg/kg), intramuskuläre (IM) gegeben. 20 G intravenöse (IV) Katheter in eine Vene Ohr und Intubation das Tier mit einer 7,0 Fr endotracheal Schlauch. Hinweis: Passen Sie die Größe der IV-Katheter und den Endotrachealtubus entsprechend der Größe des Schweins. Das Haar (Rasur) auf der linken Seite des Schweins aus der Schulter, um den Nabel und der Abdominal-Mittellinie an der Wirbelsäule entfernt. Verwalten die prophylaktische Antibiotika (Piperacillin und Tazobactam: 100 mg/kg IV) und Schmerzen Medikamente (Buprenorphin nachhaltig Release: 0,2 mg/kg subkutan (SC) oder ein transdermales Fentanyl patch 25-50 µg/h). Hinweis: Die IV-Antibiotikum wird gegeben, weil die Tiere für 12 h vor der Operation nüchtern sind und während dieser Zeit keine der zuvor genannten oralen Antibiotikum erhalten. Transportieren das Schwein zum OP-Saal und verbinden den Endotrachealtubus mit der Anästhesiemaschine mit einem passiven Sensor ausgestattet, um die Atemwege Gase zu überwachen. Mechanisch lüften Sie das Schwein ein Tidalvolumen von 10 mL/kg als Ausgangspunkt verwenden und nicht überschreiten Sie einer Atemwegsdruck von 30 cm H 2 O. Set der Atemfrequenz zwischen 10-20 Atemzügen pro Minute (Bpm) und nach Bedarf zu Ende-Gezeiten CO 2 (anpassen PetCO 2) Ebenen zwischen 28 und 35 mm Hg. Maintain die Narkose mit Isofluran (1-3 %) oder Sevofluran (2-5 %). Positionieren das Schwein rechts unten auf dem Operationstisch. Fügen Sie alle notwendigen Sensoren zur Überwachung der Körpertemperatur (BT), Elektrokardiogramm (EKG), Pulsoximetrie (SpO 2) usw. Vorbereiten der Operationsstelle über drei wechselnde Peelings mit 2 % Chlorohexidine und 70 % Alkohol (gelten in einem Kreisbewegung beginnend mit Zentrum und Umzug nach außen). Drapieren der Operationsstelle mit aseptischen 21. 3. Chirurgischen Eingriff aussetzen das Herz durch einen linken Thorakotomie. Machen einen Hautschnitt parallel zu der 4 th und 5 th Zwischenrippenmuskeln Raum ca. 8-9 cm in der Länge mit einem Skalpellklinge Nr. 10. Schnitt durch die Latissimus Dorsi und Serratus Ventralis Muskeln mit ein paar gebogene Metzenbaumschere und Brown Adson Pinzette. Elektrokauterisation Blutstillung bei Bedarf weiterhin verwenden. Geben Sie den pleuralen Raum durch die Zwischenrippenmuskeln zwischen 4 th und 5 th Rippen mit dem Metzenbaum Schere schneiden entlang des vorderen Aspekt der 4 th Rippe. Um die Chance einer versehentlich Beschädigung der Lungenkrebs zu reduzieren, schalten Sie den Ventilator auf dem Ausatmen kurz vor Eintritt in den pleural Raum aus. Sobald der Pleurahöhle verletzt worden ist, schalten Sie den Ventilator. Verwenden einen kleine Finochietto Retraktor, um die Rippen auseinander, zu verbreiten das Herz aussetzen. Verwendung Debakey Pinzette fassen und heben Sie das Perikard. Potts Schere ein kleines Loch in das Perikard, so dass Luft in den Perikardialraum eindringen zu verwenden. Weiter Schnitt mit der Schere Potts über der Kreuzung der LAD und LCX Arterien. Einsatz Babcock Zange, die linken atrial Appendage zurückzuziehen. Mit Debakey und kleinen rechten Winkel Zangen, sezieren die LCX-Arterie aus dem umgebenden Gewebe vor oder proximalen zum stumpfen marginal Zweig 1 St. Legen Sie zwei Schiff Schlaufen unter der seziert LCX-Arterie, eine an jedem Ende. Halten Sie eine Größe 3,0 mm Ameroid Constrictor mit kleinen rechten Winkel Zangen und heben Sie die Schiff Schleifen um sanft die LCX-Arterie durch die Öffnung der Würger führen. Sanft Drehen der Würger, sodass die Öffnung nach oben zeigt. Die Schiff-Schleifen zu entfernen. Siehe Abbildung 1. Hinweis: Angemessene Dissektion der Arterie unbedingt Abknicken zu verhindern. Wählen Sie die entsprechende Größe Constrictor für das einzelne Tier. Der entsprechenden Größe Würger wird das Schiff eng umschließen, ohne zunächst Verengung des Schiffes. Hausschweine, die mit einem Gewicht zwischen 12 und 15 kg erfordern Ameroid constrictor Größe 2,5 bis 3,5 mm. Der Speicherort von Ameroid Constrictor auf dem Schiff richtet sich auf die gewünschte Größe des ischämischen Bereich. Re ungefähre das Perikard und mit 4: 0 aus Polypropylen Nähte schließen. Wiederherstellung den thorakalen Unterdruck durch Einfügen eines 12 Fr Thoraxdrainage oder Äquivalent in den Pleuraraum mit der Ende verlassen zwischen den Schichten des Verschlusses, in der Regel zwei Intercostalneuralgie Leerzeichen nach Thorakotomie Website. Beachten Sie die Lunge für Atelektase vor dem Schließen der Rippen. Wenn Sie irgendwelche Anzeichen von zu niedrigem Druck beachten, wieder aufzublasen Lungen manuell bis zu einem Druck von 30 mm Hg. In der Nähe der Brust mit 1 Polypropylen Nähte für die Intercostalneuralgie Schicht, 0 Polypropylen Nahtmaterial für den Serratus und Faszien Schicht, 2-0 Polypropylen Nahtmaterial für die subkutane Schicht und 3-0 aus Polypropylen Nahtmaterial für die Subcuticular Schicht. Heften oder Naht die Haut. Zum Jahresende die Thoraxdrainage ein drei-Wege-Absperrhahn beimessen und die Luft in der Brust mit einer 40-60 cc Spritze zu evakuieren, bis eine negative Abdichtung erreicht ist. Rollen Sie das Tier auf die Brustbein oder Gegenteil Seite zur Erleichterung die Luft zu entfernen. Sobald die Brust Unterdruck hält, entfernen Sie die Thoraxdrainage und Naht der Austrittsstelle. Wenn die Tiere einzeln postoperativ untergebracht sind, kann der Schnitt für mehrere Tage bandagiert werden. 4. Postoperative nach Schließung, infiltrieren die Schnittführung entlang beider Seiten des Standortes Thorakotomie mit 0,25 % Bupivacain. Das Tier aus dem Beatmungsgerät zu entwöhnen und schalten Sie die Narkose. Den Endotrachealtubus zu entfernen, sobald das Tier auf seine eigene Atmung und schlucken. Überwachen das Tier, bis es vollständig wiederhergestellt ist (wach und sternale). Es dürfen keine Auffälligkeiten oder Arrhythmien auf dem EKG, die BT sollte 38,7-39,8 ° C SpO 2 sollte 95-100 % und die Atemfrequenz sollte 32-58 Bpm. Verwalten Amiodaron (100 mg, oral zweimal am Tag) und Clopidogrel Bisulfate (75 mg oral einmal täglich), Thrombose und Rhythmusstörungen zu verhindern. Fahren Sie mit Amoxicillin und Clavulanat Kalium (15 mg/kg) mündlich zweimal täglich für 10 Tage nach der Operation. Postoperativer Schmerzen erfolgt mit Buprenorphin SR (verzögerter Freisetzung) 0,2 mg/kg. SQ alle drei Tage. Buprenorphin SR werden mit Carprofen (4,4 mg/kg) einmal ergänzt kann und dann (2,2 mg/kg) PO oder IM Angebot. Halten alle Bettwäsche und Nahrungssuche Material aus dem Tier heraus ' s Gehäuse Fläche, bis der Schnitt vollständig geheilt ist.