Un modèle d’ischémie cardiaque chronique chez les porcs à l’aide d’un Constrictor Améroïde

les procédures décrites ici ont été approuvés par le National Heart, Lung et Blood Institute et animalier Comité de l’urbanisme à la National Institutes of Health et sont conformes aux politiques énoncées dans la politique de Service de santé publique sur Tous les soins et l’utilisation des animaux de laboratoire, la Loi sur la protection des animaux et le Guide pour le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire. Remarque : le but de cette intervention chirurgicale consiste à produire un modèle animal d’ischémie myocardique chronique qui peut être utilisé pour développer des traitements qui sont cliniquement pertinents pour les patients atteints de grave CAD. Cela ne peut être accompli en utilisant un modèle in vitro. 1. animaux utiliser male Yorkshire porcs pesant entre 12 et 15 kg. 2. procédures de pré-opératoire pour un antibiotique prophylactique, utiliser amoxicilline et clavulanate de potassium (15 mg/kg) par voie orale deux fois par jour commençant 24 heures avant la chirurgie. Remarque : Cet antibiotique par voie orale est démarré avant la chirurgie pour s’assurer que le cochon il avalera et pour aussi s’assurer qu’ils n’auront pas une réaction allergique aux médicaments post-opératoires. Retenir la nourriture et l’eau du porc 12 h avant la chirurgie. Le jour de la chirurgie, anesthésier le cochon avec un cocktail de kétamine (33 mg/kg), midazolam (0,5 – 0,75 mg/kg) et glycopyrrolate (0,01 mg/kg), donné par voie intramusculaire (IM). Placer le cathéter intraveineux (IV) 20 G dans une veine de l’oreille et intuber l’animal avec un tube endotrachéal de 7.0 Fr. Remarque : Ajuster la taille du cathéter IV et la sonde endotrachéale en fonction de la taille du cochon. Enlever les poils (rasage) sur le côté gauche du porc de l’épaule jusqu’à l’ombilic et de la médiane abdominale à la colonne vertébrale. Administrer les antibiotiques prophylactiques (pipéracilline et tazobactam : 100 mg/kg IV) et les médicaments de la douleur (buprénorphine sustained release : 0,2 mg/kg sous-cutanée (SC) ou un transdermique de fentanyl patch 25-50 µg/h). Remarque : L’antibiotique IV est donné parce que les animaux sont soumis à un jeûne pendant 12 h avant la chirurgie et ne reçoivent pas l’antibiotique oral mentionné précédemment au cours de cette période. Le cochon dans la salle d’opération de transport et connecter la sonde endotrachéale à la machine d’anesthésie équipée d’un détecteur de fumée pour surveiller les gaz des voies respiratoires. Mécaniquement ventiler le cochon à l’aide d’un volume de marée de 10 mL/kg comme point de départ et ne pas dépasser une pression de 30 cm H 2 O. Réglez le taux respiratoire entre 10-20 respirations par minute (bpm) et ajuster au besoin pour tenir la fin d’expiration (2) CO PetCO 2) niveaux entre 28 et 35 mm Hg. maintenir l’anesthésie isoflurane (1-3 %) ou sévoflurane (2-5 %). Placer la cochon à droite vers le bas sur la table d’opération. Fixer toutes les sondes nécessaires pour surveiller la température du corps (BT), électrocardiogramme (ECG), oxymétrie de pouls (SpO 2), etc. préparer le site chirurgical via trois gommages alternantes avec alcool chlorhexidine et 70 % à 2 % (s’applique à un mouvement circulaire commençant par le centre et le déplacement vers l’extérieur). Drapé du site chirurgical à l’aide d’une technique aseptique 21. 3. Intervention chirurgicale exposer le cœur à travers une thoracotomie gauche. Faire une incision de la peau en parallèle à la 4 ème et 5 ème intercostale espace environ 8-9 cm de longueur à l’aide d’une lame de bistouri Swann-Morton n° 10. Couper à travers le grand dorsal et le serratus ventralis muscles à l’aide d’une paire de ciseaux de Metzenbaum courbes et pince Adson Brown. Bistouri électrique permet de maintenir l’hémostase au besoin. Entrer dans la cavité pleurale par les muscles intercostaux entre le 4 ème et 5 ème côtes avec la coupe de ciseaux de Metzenbaum le long de la face antérieure de la 4 ème côtes. Pour réduire le risque d’endommager accidentellement le poumon, désactiver le ventilateur sur l’expiration, juste avant d’entrer dans la cavité pleurale. Dès que la cavité pleurale a été arrachée, remettez le ventilateur en marche. Utiliser un petit enrouleur de Finochietto pour répandre les côtes, exposant le cœur. Forceps Debakey utilisation de saisir et de soulever le péricarde. Potts ciseaux permet de faire un petit trou dans le péricarde, permettant à l’air d’entrer dans l’espace péricardique. Continuer l’incision avec des ciseaux de Potts sur la jonction des artères LAD et LCX. Pince de Babcock utilisation de rétracter l’auricule gauche. À l’aide de Debakey et querre petites pinces, disséquer l’artère LCX des tissus environnants avant ou proximale à la branche marginal obtus 1 st. Placer deux boucles de navire sous l’artère LCX disséqué, un à chaque extrémité. Tenir un constricteur d’Améroïde taille 3,0 mm avec la pince petit angle droit et soulevez les boucles de navire pour guidez l’artère LCX grâce à l’ouverture de la constrictor. Faites tourner doucement le constrictor afin que l’ouverture soit vers le haut. Retirer les boucles de navire. Voir la Figure 1. NOTE : Adéquate dissection de l’artère est essentielle pour ne pas s’enrouler. Sélectionnez le constricteur de taille approprié pour l’animal. Le constricteur de taille approprié sera étroitement encercler le navire sans le contraindre au départ du navire. Les porcs domestiques pesant entre 12 et 15 kg exigent Améroïde constricteurs taille 2,5 à 3,5 mm. L’emplacement de la constrictor Améroïde sur le navire dépend de la taille souhaitée de la zone ischémique. Re-rapprocher le péricarde et fermer avec des sutures en polypropylène de 4-0. Rétablir la pression thoracique négative en insérant un tube de poitrine 12 Fr ou l’équivalent dans la cavité pleurale avec l’extrémité sort par entre les couches de fermeture, généralement deux espaces intercostaux postérieures au site thoracotomie. Remarque : Observer le poumon pour atelectasis avant de fermer les côtes. Si on observe des signes d’un sous-gonflage, regonfler les poumons manuellement jusqu’à une pression de 30 mm Hg. Fermer la poitrine à l’aide de sutures en polypropylène 1 pour la couche intercostale, 0 sutures en polypropylène pour le serratus et couche aponévrotique, sutures en polypropylène 2-0 pour la couche sous-cutanée et sutures en polypropylène de 3-0 pour la couche sous-cuticulaires. Agrafer ou suture de la peau. Fixer un robinet d’arrêt à trois voies à l’extrémité du tube poitrine et évacuer l’air dans la poitrine avec une seringue de 40-60 cc jusqu’à l’obtention d’un sceau négatif. Rouler l’animal sur son flanc sternum ou inverse afin d’enlever tout l’air. Une fois la poitrine maintient une pression négative, enlever le drain thoracique et le site de la sortie de la suture. Si les animaux est logés séparément après l’opération, l’incision peut être bandée pendant plusieurs jours. 4. Post-opératoire après la fermeture, s’infiltrer dans l’incision le long des deux côtés du site thoracotomie avec 0,25 % bupivacaïne. Sevrer l’animal éteint le ventilateur et hors tension de l’anesthésie. Retirer la sonde endotrachéale dès que l’animal respire seul et la déglutition. Surveiller l’animal jusqu’à ce qu’il est entièrement récupéré (éveillé et sternal). Il ne devrait y avoir aucune anomalie ou arythmies sur l’ECG, le BT doivent atteindre 38,7-39,8 ° C, le SpO 2 devrait être de 95 à 100 % et le taux respiratoire doit être bpm 32-58. Administrer amiodarone (100 mg, par voie orale deux fois par jour) et bisulfate de clopidogrel (75 mg, par voie orale une fois par jour) pour prévenir la thrombose et des arythmies. Continuer avec l’amoxicilline et clavulanate de potassium (15 mg/kg) par voie orale deux fois par jour pendant post-opération de 10 jours. La douleur postopératoire est contrôlée avec la buprénorphine SR (libération prolongée) 0,2 mg/kg. SQ tous les trois jours. La buprénorphine SR peut être complété avec le carprofène (4,4 mg/kg) une fois et puis les PO (2,2 mg/kg) ou IM. Garder tout matériel de literie et d’alimentation de l’animal ' s zone de logement jusqu’à ce que l’incision est complètement guérie.