Karıştırılmış Biyoreaktörler güç girişi Pervane mili üzerine döndürme sırasında davranır tork ile ölçülebilir. Bu el yazması bir hava taşıyan etkili mekanik mühürler gözlenen sürtünme kayıpları azaltmak ve küçük ölçekli damarlarının güç giriş ölçümlerin doğruluğu artırmak için nasıl kullanılabileceği açıklanmaktadır.
Karıştırılmış Biyoreaktörler güç girişi önemli bir ölçek-up parametresidir ve çark şaft üzerinde döndürme sırasında davranır tork ile ölçülebilir. Ancak, güç girişi küçük ölçekli damarlarının deneysel belirlenmesi hala genellikle kullanılan burçlar, yatakları ve/veya şaft cıvataları ve ticari olarak kullanılabilir tork metre doğruluğunu içinde nispeten yüksek sürtünme kayıpları nedeniyle zordur. Böylece, yalnızca sınırlı veri için küçük ölçekli biyoreaktörler, özellikle tek kullanımlık sistemleri, farklı tek kullanımlık sistemleri ve geleneksel karşılıkları arasındaki karşılaştırmaları zorlaştırır literatürde mevcuttur.
Bu el yazması, boyutsuz Reynolds sayısı (Re) tarafından açıklanan türbülans koşullar geniş bir dizi üzerinden güç girişi benchtop ölçekli Biyoreaktörler ölçmek bir protokol sağlar. Söz konusu sürtünme kayıpları etkili bir hava taşıyan kullanılarak azaltılır. Kurmak, davranış ve tork tabanlı güç değerlendirmek hakkında yordam giriş ölçümü, hücre kültürü tipik ajitasyon koşullar düşük orta türbülans için özel odaklı (100 < Re < 2·104), ayrıntılı olarak açıklanmıştır. Çeşitli çoklu kullanım ve tek kullanımlık Biyoreaktörler güç girişi olması P aralığı0 ≈ 0,3 ve P0 ≈ 4.5 maksimum Reynolds numaraları için belirlenen (Newton sayı, P0olarak da bilinir) boyutsuz güç numarası tarafından sağlanan farklı Biyoreaktörler.
Gaz-sıvı dağılımı2 homojenizasyon1,2,3gibi birçok birimi operasyonlara ilgilidir çünkü güç girişi bir anahtar mühendislik karakterizasyonu ve ölçek-up Biyoreaktörler parametredir , 4 , 5, ısı transferi6 ve katı süspansiyon7. Güç girişi kesme stres, özellikle etkiler büyüme ve makaslama hassas hücre kültürleri8,9,10,11ürün oluşumu ile de ilişkilidir.
Karıştırılmış Biyoreaktörler güç girişi ölçümü temel alır için elektrik gücüyle en yaygın teknikleri12,13,14, Kalorimetre12,15 (yani sabit ısı çizmek dengesi veya ajitasyon aracılığıyla dinamik Isıtma) veya karıştırıcı üzerine tork. İkinci deneysel dinamometreler, tork metre veya Çalkalayıcı, tek veya çok aşamalı Rushton türbinleri1,16,17 de dahil olmak üzere çeşitli için uygulanan gerilim ölçü aygıtları tarafından belirlenebilir , 18 , 19 , 20 , 21 , 22 , 23 , 24 , 25, tiz bıçak çarklar19,20,23,26,27, InterMig19,21 ve Scaba çarklar28 , 29. ayrıntılı bir inceleme Ascanio vd (2004)30tarafından sağlanır.
Tork (T), güç girişi (P) EQ karıştırıcı dönüş hızı N olan 1’den, tahmin edilebilir.
(1)
Ajitasyon (içinde yatakları, mühürler ve motor kendisi) içinde meydana gelen kayıplar için hesap için etkili tork (Teff) boş beden (TD) ve (TL sıvı ölçülen değeri arasındaki fark olarak tespit edilmelidir ). Son olarak, farklı kışkırtıcıları karşılaştırmak için EQ burada ρL sıvı yoğunluğu gösterir ve fan çapı d gösterir 2 tarafından tanımlanır, boyutsuz güç numarası (P0, Newton numarası olarak da bilinir), kullanılabilir.
(2)
Güç numarası Reynolds sayısı (yani türbülans) bir işlevidir ve tam olarak çalkantılı koşullar altında sabit olur iyi bilinmektedir. Fan Reynolds sayısı EQ sıvı viskozitesi ηL nerede 3 tarafından tanımlanır.
(3)
Yine de, küçük ölçekli Biyoreaktörler güç giriş ölçümlerde hala nispeten yüksek sürtünme kayıpları fan boşluğunun mekanik yatakları ve en ticari olarak kullanılabilir tork metre sınırlı doğruluğu içinde nedeniyle zor olan. Sonuç olarak, yalnızca birkaç raporları gücü hakkında17,18,22,24,31,32benchtop ölçekli Biyoreaktörler olmuştur ölçümlerde Yayınlandı girdi. Preassembled, belgili tanımlık imalatçı tarafından sterilize edilmiş ve kullanıma hazır33,34teslim tek kullanımlık Biyoreaktörler güç girişi hakkında veri eksikliği vardır. Yeniden kullanılabilir karşılıkları aksine çoğu tek kullanımlık Biyoreaktörler karşılaştırmaları zor yapmak özel olarak tasarlanmış fanlar tarafından heyecanlı.
Bu açığı kapatmak için güç giriş ölçümleri ile özel laboratuvar ölçekli karıştırıcı odaklanmak için güvenilir bir yöntem son zamanlarda35geliştirilmiştir. Sürtünme kayıpları tarafından neden olduğu, boş kaplar içinde ölçülen tork değerleri etkili bir hava taşıyan kullanımı azaltıldı. Sonuç olarak, geniş bir çalışma koşullarda düşük orta türbülans için (100 < Re < 2·104) soruşturma olması ve çeşitli çoklu kullanım ve tek kullanımlık Biyoreaktörler güç girişi sağlanmıştır.
Bu da çalışmanın ayrıntılı ölçüm iletişim kuralı daha önce gelişmiş yöntem sağlar ve ayarlamak, davranış ve güç tork tabanlı giriş ölçüm laboratuvar ölçekli Biyoreaktörler içinde değerlendirmek nasıl açıklar. Özel ticari olarak mevcut tek ve çoklu kullanabilirsiniz sistemleri üzerinde odaklanmıştır. Bir otomatik ölçüm yordam deneysel çaba azaltmak için kullanılır.
(Özel) güç girişi mühendislik karakterizasyonu için önemini ve ölçekleme-yukarı/aşağı biyoreaktörler, rağmen sadece bir kaç yayın benchtop ölçekli biyoreaktörler, deneysel araştırmalarda özellikle tek kullanımlık sistemlerinde Tek basamaklı litre hacim aralığı, literatürde bulunabilir. Veri bu olmaması için bir neden böyle küçük ölçeklerde doğru güç giriş ölçümlerin zorluklar görülebilir. Bazı bu zorlukların üstesinden gelmek için çalışmanın taşıyan sürtünme kayıpları en aza indirmek için bir hava taşıyan tarafından desteklenen göre tork güç giriş ölçümler için detaylı bir protokol sağlar. Yönteminin uygulanabilirliği üç piyasada bulunan tek kullanımlık Biyoreaktörler yanı sıra Multi-kullanma Biyoreaktörler ölçeklerde 1 L ve 10 L çalışma birimi arasında kullanarak gösterilmiştir.
Tork tabanlı ölçümleri ile bizim deneyime dayalı, adresine en kritik faktörler: 1) azaltılması ölü tork rulmanlar ve mühürler, içinde sürtünme kayıpları özellikle laboratuvarda en aza indirerek ölçekli Biyoreaktörler ve 2) seçimi bir İstenen biyoreaktör boyutu ve ajitasyon koşulları için uygun tork ölçer. Önceki35gösterildiği ölü tork bir hava taşıyan kullanılarak önemli ölçüde azaltılabilir. Bu da çalışmanın, gözenekli karbon malzemeden yapılmış bir düşük maliyetli hava burç kullanıldı. Test boş kaplar içinde kalan tork ilâ 900 rpm fan ipucu hız-in ilâ 3 m·s-1için karşılık gelen, ajitasyon oranları ile 0.5 mN·m altında genellikle vardı. Buna ek olarak, ile yapılı-içinde mekanik şaft rulman biyoreaktör #6 ölü tork, örneğin, 9,4 mN·m ve 20 mN·m arasında oldu ve yaklaşık 3 mN·m karşılaştırılabilir değerler için biyoreaktör #732de bildirilmistir. Bir büyüklük önerilen deneysel kurulumunda elde edilen değerler daha yüksek olmasıdır.
Hava taşıyan yanı sıra kullanılan tork metre en kritik bileşenidir. Statik ve dinamik tork, dönüş hızı ve döndürme açı ölçmek için tasarlanmış bir ticari olarak kullanılabilir tork metre bu çalışma için seçildi. Maksimum çalışma hacimleri 10 L ve karşılık gelen Çalkalayıcı ile faiz Biyoreaktörler göz önüne alındığında, 0,2 nominal bir tork N·m seçildi. Göreli standart sapma ile yüksek tekrarlanabilirlik < %5 çoğaltır ve güvenilir ölçümler için etkili tork düşük nominal tork sadece % 1 karşılık gelen 2 mN·m olarak elde edilebilir bulundu. Bu nedenle, mevcut çalışmada uygulanan sensör ölçüm aralığı önemli ölçüde yayınlanmış41karıştırma üzerinde Alman GVC-VDI çalışma grubu üyelerinin inter-laboratory bir çalışmaya dayanarak sonuca daha geniş oldu.
Yine de, karıştırıcı hız aralığı tork sensör çözünürlüğü, nominal tork ve girdap oluşumu açısından dikkatle seçilmelidir. İkinci kez unbaffled Biyoreaktörler yüksek hızlarda heyecanlı oluşur ve tork ölçer zarar verebilir. Minimum ve maksimum uygulanabilir karıştırıcı hızları faktörler bu çalışmada açıklanan yöntemin sınırlama. Ek olarak bizim önceki35, bu çalışmada da dahil biyoreaktör #3, iki aşamalı impellers 42 mm fan çapı göre heyecanlı üretici tarafından sağlanan cam biyoreaktör ailesindeki en küçük üyesi iş. Buna benzer güç karakteristik geometrik olarak benzer biyoreaktör #4 içinde sunulan deneysel Kur ile elde edildi. Tork M ile ölçekler önemli olduğu bu d5 verilen sıvı yoğunluğu, fan geometri (yani güç sayı) ve dönüş hızı (bkz: EQ 1 ve EQ 2) için. Sonuç olarak, bir yaklaşık % 40 daha düşük fan tork sonuç % 10 daha küçük fan çapı, örneğin. Yine de, 1 L 2 L ölçekli ölçeğinde daha yüksek dönme hızları kullanılabilir tork ölçer ile üretilen tork gidermek için işlemi sırasında gerekli idi. Biyoreaktör #3 yerleşik perdeler, nedeniyle hiçbir girdap oluşumu gözlenmiştir, ancak bu unbaffled gemiler ile ilgili bir sorun olabilir. İki ölçek arasında bulunan güç rakamlarla ofset sürekli ölçüm yanlışlıklar (ek geometrik farklılıklar) sınırlı sensör çözünürlüğün neden olduğu düşük neden olabilir ki vurgulanmalıdır. Daha fazla soruşturma önerilen kurulum hala mümkün olan en küçük ölçek üzerinde nihai sonuçlara ulaşmak için gereklidir.
Yine de, aynı iletişim kuralını güç giriş ölçüm sonuçları 1 L ve bizim laboratuvar 10 L arasında çalışma hacimleri ile farklı üreticilerin çeşitli cam kaplar için kullanıldı. Bu farklı biyoreaktör sistemleri karakterizasyonu için kullanılan yöntemi Aktarılabilirliği vurgular. Kontrol ünitesi yazılımı tarafından sağlanan otomasyon sistemi ve evrensel Matlab dile göre otomatik bilgi işlem içinde tarifi Yönetimi’ni kullanarak otomatik ölçümler deneysel çaba azaltılabilir.
Sükroz kullanarak, ucuz Newton model ortamı, geniş aralığı Reynolds sayıları içeren, unutulmamalıdır Ayrıca, (100 < Re < 6·104), karıştırıcı ve ölçek üzerinde bağlı olarak, kaplıydı. Ayrıca çok düşük fan hızlarını kullanıyor olsa bile türbülans aralığın alt sınırı genellikle hayvan hücre kültürleri ile su gibi kitle iletişim araçları için alakasız vurgulanmalıdır. Ancak, türbülans Sönüm ve hatta Newton davranışlar sonuç suyu viskozite önemli artışlar mantarlar – için tarif edilmistir ve hücre tabanlı kültürler bitki. Örneğin, belirgin viskozite ilâ 400-fold kültürleri bitki su için karşılaştırıldığında çok Reynolds sayıları daha düşük yol açan bildirilen42, olmuştur.
Son olarak, biyoreaktör #7 ilk vaka çalışması olarak kullanarak, bu önerilen deneysel Kur laboratuvar ölçekte güç girişi üzerinde tasarım değişiklikleri etkisini incelemek için kullanılabilir gösterilmiştir. Hızlı prototipleme teknikleri ile birlikte, bu gelecekte yapılacak çalışmalar bölümlerini oluşturacak fan tasarım çalışmaları için güçlü bir araç olabilir.
The authors have nothing to disclose.
Yazarlar Dieter Häussler ve Beat Gautschi deneysel set sırasında onların yardım için yukarıya teşekkür etmek istiyorum. Ayrıca İngilizce kanıt okuma Caroline Hyde için sana şükrediyoruz.
T20WN torque meter | HBM Hottinger Baldwin Messtechnik GmbH |
Nominal torque 0.2 Nm | |
Spider-8 | HBM Hottinger Baldwin Messtechnik GmbH |
HBM Spider8 is no longer available for sale. QuantumX DAQ system (especially the QuantumX modules MX840A and MX440A) are recommended. |
|
Catman easy software | HBM Hottinger Baldwin Messtechnik GmbH |
Version 4.2.2 | |
Air bearing | IBS precision engineering | 13 mm air bushing | |
Stainless steel impeller shaft | Bioengineering AG | Shaft tolerance -0.0076 mm | |
Brushless motor AKM2 | Kollmorgen | ||
Metal bellow coupling | Uiker AG | ||
Finesse RDPDmini control unit | Finesse, a part of Thermo Fisher Scientific | No longer supported (the replacement product G3Lab universal controller can be used) | |
Sucrose | Migros Schweiz AG | Food grade | |
Matlab software | Mathworks | Version R2017a | |
Finesse μTruBio PC software | Finesse, a part of Thermo Fisher Scientific | Version 3.1 (no longer supported) | |
SmartGlass 1L | Finesse, a part of Thermo Fisher Scientific | referred to as Bioreactor 1L in Table 2 | |
SmartGlass 3L | Finesse, a part of Thermo Fisher Scientific | referred to as Bioreactor 3L in Table 2 | |
SmartVessel 3L | Finesse, a part of Thermo Fisher Scientific | referred to as Single-Use 3L Bioreactor in Table 2 | |
Mobius CellReady 3L | Merck Millipore | referred to as Cell Ready Single-Use 3L Bioreactor in Table 2 | |
UniVessel SU 2L | Sartorius Stedim Biotech | referred to as Single-Use 2L Bioreactor in Table 2 |