Энергопотребление в перемешиваемой биореакторах может быть измерена через момент, который действует на валу колеса во вращение. Эта рукопись описывает, как воздушный подшипник может использоваться для эффективного уменьшения потерь на трение в торцовых уплотнений и повысить точность ввода измерений мощности в мелких сосудах.
Энергопотребление в перемешиваемой биореакторах является важным параметром масштабирования и может быть измерена через момент, который действует на валу колеса во вращение. Однако экспериментальное определение энергопотребление в мелких сосудах по-прежнему сложной из-за потерь относительно высоким коэффициентом трения внутри обычно используется втулки, подшипники и/или уплотнения вала и точность коммерчески доступных крутящий момент метров. Таким образом только ограниченные данные для малых биореакторах, в частности одноразового использования систем, имеющихся в литературе, затрудняет сопоставление между различными системами одноразового использования и их обычные аналоги.
Эта рукопись предоставляет протокол о том, как измерить энергозатраты в биореакторах benchtop масштаба в широком диапазоне условий турбулентности, которые могут быть описаны безразмерное число Рейнольдса (Re). Вышеупомянутые трения потери эффективно уменьшаются с помощью воздушного подшипника. Процедура о том, как настроить, проводить и оценивать на основе крутящий момент мощность входных измерения, с особым упором на условиях типичной агитация культуры клеток с низкой до умеренной турбулентности (100 < Re < 2·10-4), подробно описан в. Входная мощность нескольких многоцелевого использования и одноразовые биореакторов предоставляется по номеру безразмерные мощности (также называемый номером Ньютон, P0), который определяется в диапазоне P0 ≈ 0,3 и ≈0 P 4.5 для максимального числа Рейнольдса в различных биореакторов.
Входная мощность является параметром ключевых инженерных характеристика и наращивание биореакторов потому, что она относится к многие группы операций, таких как гомогенизации1,2,3, газ жидкость дисперсии2 , 4 , 5, тепловой передачи6 и твердых подвеска7. Вход питания связан также с касательное напряжение, которое может особенно влияют на рост и формирование продукта сдвига чувствительных клеток культур8,9,10,11.
Наиболее распространенные методы для измерения мощности ввода в перемешиваемой биореакторах основаны на электроэнергии рисовать12,13,14, калориметрия12,15 (т.е. стационарные тепла баланс или динамическое Отопление через агитации) или крутящий момент после агитатор. Последний может быть экспериментально определяется Динамометры, крутящий момент метров или тензодатчиков, применяемые для различных мешалки, в том числе одно- или многоступенчатые Rushton турбины1,16,17 , 18 , 19 , 20 , 21 , 22 , 23 , 24 , 25, скатных лезвие крыльчатки19,,2023,26,27, InterMig19,21 и Scaba крыльчатки28 , 29. подробный обзор обеспечивается Асканио et al. (2004)30.
От крутящего момента (T) мощность (P) может быть оценена из уравнение 1, где N — скорость вращения мешалки.
(1)
Для обеспечения учета потерь, понесенных в агитации (в подшипники, уплотнения и сам двигатель), эффективного крутящего момента (Teff) должны определяться как разница между значения, измеренного в пустой сосуд (TD) и (TЛ жидкости ). Наконец номер безразмерные мощности (P0, также известный как Ньютон номер), который определяется уравнение 2 где ρL обозначает плотность жидкости и d представляет собой диаметр рабочего колеса, может использоваться для сравнения различных мешалки.
(2)
Хорошо известно, что число питания зависит от числа Рейнольдса (т.е. турбулентности) и становится постоянным полностью турбулентных условиях. Крыльчатка число Рейнольдса определяется Eq. 3, где ηL является жидкой вязкости.
(3)
Тем не менее по-прежнему сложной из-за потерь относительно высоким коэффициентом трения внутри механических подшипников валов крыльчатки и ограниченной точностью наиболее коммерчески доступных крутящий момент метров ввода измерения мощности в малых биореакторах. Следовательно лишь в нескольких докладах о мощности входного, измерения в масштабе benchtop биореакторов были опубликованы17,18,22,24,,3132. Существует также нехватка данных о мощности ввода в биореакторах одноразового использования, которые поставляются в сборе, производителей стерилизованных и готовые к использованию в33,34. В отличие от их многоразовые коллегами большинство одноразовые биореакторов взволнованный, специально разработанные роторы, затрудняет сравнение.
Для того, чтобы ликвидировать этот разрыв, надежный метод для ввода измерений мощности с особым упором на Лабораторные мешалки шкала была разработана недавно35. Крутящий момент измеренные в пустые сосуды, которые были вызваны потери на трение, эффективно были сокращены путем использования воздушного подшипника. Следовательно, широкий спектр оперативных условий с низкой до умеренной турбулентности (100 < Re < 2·104) могут быть расследованы и вход питания нескольких многоцелевого использования и одноразовые биореакторов была предоставлена.
Настоящее исследование предоставляет подробные измерения протокол ранее разработанного метода и описывает, как настроить, проведения и оценки на основе крутящий момент мощность входных измерения в масштабе лабораторных биореакторах. Особое внимание уделяется коммерчески доступных сингл и многообразие использования систем. Процедура автоматического измерения используется для уменьшения экспериментальных усилий.
Несмотря на важность (конкретные) мощность для технических характеристик и масштабирование вверх/вниз биореакторов, только в несколько публикаций на экспериментальные исследования в биореакторах benchtop масштаба, особенно одноразового использования системы в однозначном литр объема диапазон, можно найти в литературе. Одной из причин отсутствия данных можно увидеть в трудности Точная сила ввода измерений в таких малых масштабах. Для преодоления некоторых из этих трудностей, настоящее исследование предоставляет подробный протокол крутящий момент на основе мощности входного измерений, которые поддерживаются воздушного подшипника для сведения к минимуму потерь на трение в подшипниках. Применимость метода было продемонстрировано с помощью трех коммерчески доступных биореакторов одноразового использования, а также биореакторов многоцелевого использования в масштабах между 1 Л и 10 Л рабочего объема.
Основываясь на нашем опыте с измерения крутящего момента на основе, являются наиболее важными факторами, по адресу: 1) уменьшения мертвых крутящего момента путем минимизации потерь на трение внутри подшипников и уплотнений, в частности в лаборатории масштаб биореакторов и 2) при выборе подходящий крутящий момент метр для желаемого биореактор размер и агитации условий. Как было показано ранее35, мертвые крутящий момент могут быть значительно сокращены путем использования воздушного подшипника. В настоящем исследовании низкая стоимость воздуха втулки изготовлены из материала Пористый углерод был использован. Как правило, остаточного крутящего момента в пустые сосуды испытания были ниже 0.5 mN·m с агитации ставки до 900 об/мин, соответствующий крыльчатка подсказка со скоростью до 3 m·s-1. В отличие от мертвых крутящий момент реактор #6 с встроенный механический вал подшипников, например, между 9.4 mN·m и 20 mN·m, и сопоставимых значений около 3 mN·m были также зарегистрированы для биореактора #732. Это примерно один порядок величины выше, чем значения, полученные в предлагаемом экспериментальной установки.
Помимо воздушных подшипников, крутящий момент метр используется является важнейшим компонентом. Для этого исследования был выбран коммерчески доступных крутящий момент метра, предназначенный для измерения статических и динамических крутящий момент, скорость вращения и угол поворота. Учитывая биореакторов интерес с максимальной рабочей тома 10 Л и соответствующие мешалки был выбран номинальный крутящий момент 0,2 Нм. Было установлено, что высокая воспроизводимость с относительной стандартное отклонение реплицирует < 5% и надежных измерений могут быть получены для эффективного крутящего момента, как низко как 2 mN·m, соответствующий только 1% номинального крутящего момента. Таким образом диапазон измерений датчика, применяемые в настоящем исследовании была значительно шире, чем результаты, которые были опубликованы на основе межлабораторные исследования членов Рабочей группы немецких ГВК-VDI на смешивание41.
Тем не менее диапазон скорости мешалки следует тщательно отобраны в отношении резолюции крутящий момент датчик, номинальный крутящий момент и формирование вихревой. Последние часто встречается в unbaffled биореакторов взволнованный на высоких скоростях и может привести к повреждению крутящий момент метр. Минимальные и максимальные возможности агитатор скорости можно сдерживающими факторами метода, описанного в настоящем исследовании. В дополнение к нашим предыдущим работают35, это исследование также участвуют реактор #3, наименьший элемент в семье биореактор стекла, предоставленный производителем, который агитировал в двухступенчатом крыльчатки с диаметром 42 мм. Характеристика сопоставимой мощности, в геометрически подобных биореактор #4 был получен с представленной экспериментальной установки. Это заметно, поскольку крутящий момент весы с M 5 d для заданной плотности жидкости, крыльчатка геометрии (т.е. мощность номер) и скорость вращения (см. уравнение 1 и 2 эквалайзера). Следовательно примерно 40% меньше крыльчатка крутящий момент результаты от 10% меньшего диаметра рабочего колеса, например. Тем не менее выше скорость вращения в масштабе 1 Л, чем в масштабе 2 L необходимы во время операции для разрешения производства крутящий момент измерителем крутящего момента. Из-за встроенных перегородки биореактор #3 без формирование вихревой наблюдалось, но это может стать проблема с unbaffled судов. Следует подчеркнуть, что постоянное смещение в мощность чисел, которая была найдена между двумя шкалами может привести от неточностей измерения, вызванных ограниченной датчик резолюции (помимо геометрические различия). Дальнейшее расследование, обязаны делать окончательные выводы о минимальном масштабе, при котором предлагаемая программа установки все еще возможно.
Тем не менее тот же протокол был использован для питания ввода измерений в различных стеклянных сосудов от различных производителей с объемами работы между 1 и 10 Л в нашей лаборатории. Это подчеркивает передаваемости используемый метод для характеристики различных биореактор систем. Экспериментальных усилий может быть уменьшена автоматизированных измерений с использованием рецепт управления в рамках системы автоматизации, предоставляемые программное обеспечение блока управления и автоматизированной обработки данных, основанный на универсальный язык Matlab.
Кроме того, следует отметить, что, используя сахарозу, содержащих, дешевые ньютоновской модели СМИ, широкий диапазон Рейнольдс чисел (100 < Re < 6·10-4), в зависимости от агитатор и масштаба, было покрыто. Следует также подчеркнуть, что нижний предел диапазона турбулентности обычно не имеет значения для культур клеток животных с водой, как средства массовой информации, даже если используются крыльчатка очень низкой скорости. Однако значительное увеличение вязкости бульон, который приводит к турбулентности затухания и даже неньютоновских поведение были описаны для грибов – и растительных культур на основе ячеек. Например очевидным вязкости в завод культур до 400-fold сравнению с водой были сообщил42, что приводит к гораздо ниже числах Рейнольдса.
Наконец используя биореактор #7 как первое тематическое исследование, было продемонстрировано что предлагаемая экспериментальной установки может использоваться для изучения влияния изменения дизайна на вход питания на лабораторных. В сочетании с методами быстрое прототипирование это может быть мощным инструментом для крыльчатка дизайн исследования, которые станут частью будущей работы.
The authors have nothing to disclose.
Авторы хотели бы поблагодарить Дитер Häussler и бить Гаутчи за их помощь в ходе экспериментальной набор вверх. Мы признательны также Caroline Гайд для английского доказательство чтения.
T20WN torque meter | HBM Hottinger Baldwin Messtechnik GmbH |
Nominal torque 0.2 Nm | |
Spider-8 | HBM Hottinger Baldwin Messtechnik GmbH |
HBM Spider8 is no longer available for sale. QuantumX DAQ system (especially the QuantumX modules MX840A and MX440A) are recommended. |
|
Catman easy software | HBM Hottinger Baldwin Messtechnik GmbH |
Version 4.2.2 | |
Air bearing | IBS precision engineering | 13 mm air bushing | |
Stainless steel impeller shaft | Bioengineering AG | Shaft tolerance -0.0076 mm | |
Brushless motor AKM2 | Kollmorgen | ||
Metal bellow coupling | Uiker AG | ||
Finesse RDPDmini control unit | Finesse, a part of Thermo Fisher Scientific | No longer supported (the replacement product G3Lab universal controller can be used) | |
Sucrose | Migros Schweiz AG | Food grade | |
Matlab software | Mathworks | Version R2017a | |
Finesse μTruBio PC software | Finesse, a part of Thermo Fisher Scientific | Version 3.1 (no longer supported) | |
SmartGlass 1L | Finesse, a part of Thermo Fisher Scientific | referred to as Bioreactor 1L in Table 2 | |
SmartGlass 3L | Finesse, a part of Thermo Fisher Scientific | referred to as Bioreactor 3L in Table 2 | |
SmartVessel 3L | Finesse, a part of Thermo Fisher Scientific | referred to as Single-Use 3L Bioreactor in Table 2 | |
Mobius CellReady 3L | Merck Millipore | referred to as Cell Ready Single-Use 3L Bioreactor in Table 2 | |
UniVessel SU 2L | Sartorius Stedim Biotech | referred to as Single-Use 2L Bioreactor in Table 2 |