ويمكن قياس مدخلات الطاقة في المفاعلات الحيوية المقلبة من خلال عزم الدوران الذي يعمل على رمح المكره خلال التناوب. هذه المخطوطة توضح كيف يمكن استخدام تأثير هواء لفعالية تقليل خسائر الاحتكاك التي لوحظت في الأختام الميكانيكية وتحسين دقة قياسات الطاقة الإدخال في الأوعية الصغيرة.
مدخلات الطاقة في المفاعلات الحيوية المقلبة معلمة زيادة هامة ويمكن قياسها من خلال عزم الدوران الذي يعمل على رمح المكره خلال التناوب. تصميم تجريبي لمدخلات الطاقة في السفن الصغيرة غير لا يزال تحديا بسبب خسائر الاحتكاك مرتفع نسبيا داخل البطانات المستعملة عادة والمحامل و/أو الأختام رمح ودقة متر عزم الدوران متاحة تجارياً. وهكذا، تتوفر بيانات محدودة فقط لصغار المفاعلات الحيوية، نظم خاصة تستخدم مرة واحدة، في الأدب، مما يجعل من الصعب إجراء مقارنات بين مختلف النظم تستخدم مرة واحدة ونظيراتها التقليدية.
هذه المخطوطة يوفر بروتوكول حول كيفية قياس مدخلات الطاقة في المفاعلات الحيوية مقياس benchtop عبر طائفة واسعة من الظروف الاضطراب، الذي يمكن وصفه بعدد رينولدز هو (Re). يتم خفض الخسائر المذكورة آنفا الاحتكاك فعلا باستخدام تأثير الهواء. إدخال الإجراء على كيفية إعداد وإجراء وتقييم قوة عزم الدوران على أساس القياس، مع التركيز بصفة خاصة على ظروف الانفعالات نموذجي الثقافة الخلية مع منخفضة للاضطراب المعتدل (100 < Re < 2·104)، يتم وصف بالتفصيل. مدخلات الطاقة من المفاعلات الحيوية متعددة الاستخدام، وتستخدم مرة واحدة عدة يتم توفيرها من قبل عدد هو السلطة (وتسمى أيضا عدد نيوتن، ف0)، التي يتم تحديدها في نطاق ف0 ≈ 0.3 وف0 ≈ 4.5 لأرقام رينولدز الحد الأقصى في المفاعلات الحيوية المختلفة.
مدخلات الطاقة معلمة هندسة رئيسية لتوصيف ورفع مستوى المفاعلات الحيوية لأنها تتعلق بكثير من وحدة العمليات، مثل التجانس1،2،3، تشتت الغاز السائل2 , 4 , 5و نقل الحرارة6 وتعليق صلبة7. مدخلات الطاقة يرتبط أيضا بإجهاد القص، الذي يمكن خاصة تؤثر على النمو وتكوين المنتج في القص الخلية الحساسة الثقافات8،9،،من1011.
الأساليب الأكثر شيوعاً لقياس مدخلات الطاقة في المفاعلات الحيوية المقلبة تعتمد على الطاقة الكهربائية من رسم12،،من1314، القياس12،15 (أي ثابتة الحرارة الرصيد أو التدفئة الحيوي من خلال التحريض) أو العزم على المحرض. هذا الأخير يمكن أن تجريبيا يحددها المولدات، وعزم الدوران متر أو الانفعال، التي تم تطبيقها على مجموعة متنوعة من محرضين، بما في ذلك واحدة أو متعددة المراحل راشتون توربينات1،،من1617 , 18 , 19 , 20 , 21 , 22 , 23 , 24 , 25وبليد ضارية الضواغط19،20،23،،من2627، إينتيرميج،من1921 وسابا الضواغط28 , 29-يرد استعراض مفصل حسب أسكانيو et al. (2004)30.
من عزم الدوران (T)، يمكن تقدير مدخلات الطاقة (P) من مكافئ. 1, حيث N هو سرعة الدوران للمحرض.
(1)
لحساب الخسائر التي تحدث في الانفعالات (في المحامل والأختام والمحرك نفسه)، ينبغي تحديد عزم الدوران الفعال (تيالمؤسسة) كالفرق بين القيمة المقاسة في السفينة الفارغة (تد) وفي السائل (Tلام ). وأخيراً، يمكن استخدام السلطة هو العدد (ف0، يعرف أيضا باسم نيوتن عدد)، التي تعرف بمكافئ. 2 حيث ρL يدل كثافة السائل ويمثل د قطرها المكره، مقارنة محرضين مختلفة.
(2)
فمن المعروف جيدا أن عدد القوة هو دالة لعدد رينولدز (أي الاضطرابات) وتصبح ثابتة تحت ظروف مضطربة تماما. ويعرف المكره عدد رينولدز مكافئ. 3، حيث ηL هو لزوجة السائل.
(3)
ومع ذلك، قياسات الطاقة الإدخال في المفاعلات الحيوية صغيرة الحجم لا يزال تحديا بسبب خسائر الاحتكاك مرتفع نسبيا داخل المحامل الميكانيكية من مهاوي المكره ودقة محدودة من عزم الدوران متاحة تجارياً آخر متر. ونتيجة لذلك، سوى عدد قليل من التقارير حول الطاقة إدخال القياسات في مقياس benchtop المفاعلات الحيوية قد نشرت17،،من1822،24،،من3132. وهناك أيضا نقص في البيانات عن مدخلات الطاقة في المفاعلات الحيوية تستخدم مرة واحدة، التي يتم تسليمها من قبل الشركات المصنعة ستنشئ، معقمة وجاهزة للاستخدام33،34. على عكس نظرائهم القابل لإعادة الاستخدام، يتم تحريكها معظم المفاعلات الحيوية تستخدم مرة واحدة من الضواغط مصممة خصيصا، مما يجعل من الصعب إجراء مقارنات.
من أجل سد هذه الفجوة، وضعت طريقة موثوقة لقياسات الطاقة الإدخال مع التركيز بوجه خاص على مختبر مقياس النمامون مؤخرا35. عزم الدوران القيم المقاسة في الأوعية الفارغة، التي نجمت عن خسائر الاحتكاك، خفضت فعلياً باستخدام تأثير الهواء. ونتيجة لذلك، طائفة واسعة من الظروف التشغيلية مع منخفضة للاضطراب المعتدل (100 < Re < 2·104) يمكن التحقيق فيها، وتم توفير مدخلات الطاقة للعديد من المفاعلات الحيوية متعددة الاستخدام، وتستخدم مرة واحدة.
يوفر بروتوكول قياس مفصلة للأسلوب السابق المتقدمة هذه الدراسة وتوضح هذه المقالة كيفية إعداد وإجراء وتقييم قياس طاقة المعتمدة على عزم إدخال في مختبر مقياس المفاعلات الحيوية. التركيز بصفة خاصة على النظم المتاحة تجارياً أحادية ومتعددة الاستعمال. يتم استخدام إجراء قياس الآلي لتقليل الجهد التجريبي.
على الرغم من أهمية مدخلات الطاقة (المحددة) لوصف الهندسة والقياس-أعلى/أسفل للمفاعلات الحيوية، سوى عدد قليل من المنشورات في تحقيقات تجريبية في benchtop مقياس المفاعلات الحيوية، لا سيما استخدام واحد نظم في يمكن العثور على رقم واحد لتر حجم مجموعة، في الأدب. واحد أسباب هذا النقص في البيانات يتبين في الصعوبات التي تواجهها السلطة دقة القياسات الإدخال في هذه الجداول الصغيرة. بغية التغلب على بعض هذه الصعوبات، توفر هذه الدراسة بروتوكول مفصل للسلطة العزم على أساس قياسات الإدخال المعتمدة بواسطة تأثير هواء لتقليل خسائر الاحتكاك في حمل. إمكانية تطبيق الأسلوب تجلى استخدام ثلاثة من المفاعلات الحيوية تستخدم مرة واحدة متاحة تجارياً، فضلا عن المفاعلات الحيوية المتعددة الاستخدامات في الميزان بين 1 لتر و 10 لتر حجم العمل.
استناداً إلى تجربتنا مع العزم على أساس القياسات، أهم العوامل لعنوان: 1) الحد من عزم الدوران الميت بتقليل خسائر الاحتكاك داخل محامل والأختام، لا سيما في مختبر مقياس المفاعلات الحيوية، و 2) اختيار متر عزم دوران مناسبة لظروف المساحة والانفعالات مفاعل حيوي المطلوب. كما ثبت في وقت سابق35، يمكن تخفيض عزم الدوران الميت هائلة باستخدام تأثير الهواء. واستخدمت في هذه الدراسة، جلبه هواء منخفضة تكلفة مصنوعة من مادة الكربون المسامية. عزم الدوران المتبقية في الأوعية الفارغة اختبارها كانت عادة أقل من 0.5 mN·m مع معدلات الانفعالات ليصل إلى 900 لفة في الدقيقة، المقابلة للمكره بسرعة نصيحة من m·s يصل إلى 3-1. وفي المقابل، كان عزم الدوران الميت من مفاعل حيوي #6 مع حمل رمح الميكانيكية المدمج، على سبيل المثال، بين 9.4 mN·m و 20 mN·m، وقيم قابلة للمقارنة من mN·m حوالي 3 أفيد أيضا عن مفاعل حيوي #732. وهذا أمر واحد تقريبا من حجم أعلى من القيم التي تم الحصول عليها في الإعداد التجريبية المقترحة.
وإلى جانب تأثير الهواء، المقياس عزم الدوران يستخدم هو العنصر الأكثر أهمية. تم اختيار مقياس عزم دوران متاحة تجارياً التي تم تصميمها لقياس عزم الدوران والدينامية وسرعة الدوران وزاوية الدوران لهذه الدراسة. ونظرا للمفاعلات الحيوية ذات الأهمية مع أحجام العمل الحد الأقصى 10 لتر ومشاغبين المقابلة، عزم دوران اسمية من 0.2 اختير N·m. ووجد أن إمكانية تكرار نتائج عالية مع الانحراف المعياري النسبي ليتطابق < 5%، ويمكن الحصول على قياسات موثوقة الشاقولية فعالة منخفضة قدر mN·m 2، الموافق 1% فقط من عزم الدوران الاسمية. ومن ثم قياس الاستشعار المطبقة في هذه الدراسة فكان أوسع كثيرا من النتائج التي صدرت استناداً إلى دراسة المختبرات لأعضاء الفريق العامل المعني بخلط41VDI GVC الألمانية.
ومع ذلك، يجب تحديد نطاق سرعة المحرض بعناية فيما يتعلق بقرار مجس عزم الدوران وعزم الدوران الاسمية وتشكيل دوامة. هذه الأخيرة غالباً ما يحدث في المفاعلات الحيوية أونبافليد المهتاجين سرعات أعلى ويمكن أن تسبب ضررا لمقياس عزم الدوران. يمكن أن يحد من كلا سرعات المحرض ممكناً الحد الأدنى والحد الأقصى العوامل للطريقة الموضحة في هذه الدراسة. وبالإضافة إلى أعمالنا السابقة العمل35، هذه الدراسة المعنية أيضا مفاعل حيوي #3، العضو الأصغر في الأسرة مفاعل حيوي الزجاج توفيرها من قبل الشركة المصنعة، التي يتم تحريكها من الضواغط ذات مرحلتين مع أقطار 42 مم. تم الحصول على سمة سلطة قابلة لمقارنة لأن في مفاعل حيوي مماثل هندسيا #4 مع الإعداد التجريبية المقدمة. هذا ملحوظ نظراً لعزم الدوران جداول مع م د5 لكثافة السائل المعطى والهندسة المكره (أي عدد القوة) وسرعة الدوران (انظر 1 مكافئ. ومكافئ. 2). ونتيجة لذلك، ما يقارب 40% أقل المكره العزم ناتجة عن قطرها المكره أصغر 10%، على سبيل المثال. على الرغم من ذلك، كانت أعلى سرعات الدوران في الجدول 1 لتر من الجدول 2 ل المطلوبة أثناء عملية حل عزم الدوران المنتجة مع متر عزم الدوران متاحة. سبب يحير المدمج لمفاعل حيوي #3، لوحظ لا تشكيل دوامة، ولكن هذا يمكن أن تصبح مشكلة مع سفن أونبافليد. وينبغي التشديد على أن ثابت الإزاحة في أرقام السلطة التي عثر عليها بين الجدولين يمكن أن تنجم عن أخطاء القياس الناجمة عن قرار مجس محدودة (بالإضافة إلى الاختلافات هندسية). مزيد من التحقيقات مطالبون باستخلاص استنتاجات نهائية بمقياس الحد الأدنى الذي يتم الإعداد المقترحة لا يزال ممكناً.
على الرغم من ذلك، تم استخدام البروتوكول نفسه لقياسات الطاقة الإدخال في الأوعية الزجاجية المختلفة من الشركات المصنعة المختلفة مع أحجام العمل بين 1 لتر و 10 لتر في المختبر. وهذا يسلط الضوء على إمكانية تحويل الطريقة المستخدمة لتوصيف نظم مختلفة مفاعل حيوي. ويمكن تخفيض الجهد التجريبي بالقياسات التلقائية باستخدام إدارة الوصفة داخل نظام التشغيل الآلي التي يقدمها البرنامج وحدة التحكم وفي التجهيز الآلي للبيانات استناداً إلى لغة Matlab عالمية.
علاوة على ذلك، تجدر الإشارة إلى أنه، باستخدام السكروز المشتملة على، وسائط الإعلام، ونموذج النيوتونية رخيصة إعداد مجموعة واسعة من رينولدز (100 < Re < 6·104)، اعتماداً على المحرض والنطاق، وكانت مغطاة. ينبغي أيضا التأكيد على أن الحد الأدنى لنطاق الاضطراب عادة ما تكون غير ذات صلة للثقافات الخلية الحيوانية مع وسائط الإعلام مثل المياه، حتى إذا تم استخدام سرعات المكره منخفضة جداً. ومع ذلك، زيادات كبيرة في لزوجة مرق، مما يؤدي إلى اضطراب السلوك التخميد، وحتى غير نيوتن قد ورد وصف للفطريات-ومصنع الثقافات يستند إلى الخلية. على سبيل المثال، اللزوجة الظاهر في الثقافات المصنع ليصل إلى 400-fold مقارنة بالمياه قد ذكرت42، الأمر الذي يؤدي إلى انخفاض كثير أرقام رينولدز.
وأخيراً، استخدام مفاعل حيوي #7 كدراسة حالة أولى، وقد ثبت أنه يمكن استخدام الإعداد التجريبية المقترحة لدراسة أثر تعديلات التصميم على مدخلات الطاقة على نطاق المختبر. في تركيبة مع تقنيات النماذج الأولية السريعة، وهذا يمكن أن تكون أداة قوية للمكره تصميم الدراسات، التي سوف تشكل أجزاء من العمل في المستقبل.
The authors have nothing to disclose.
الكتاب يود أن يشكر ديتر Häussler، وفاز جاوتشي لمساعدتهم خلال المجموعة التجريبية أعلى. ونحن ممتنون أيضا لكارولين هايد لإثبات اللغة الإنجليزية قراءة.
T20WN torque meter | HBM Hottinger Baldwin Messtechnik GmbH |
Nominal torque 0.2 Nm | |
Spider-8 | HBM Hottinger Baldwin Messtechnik GmbH |
HBM Spider8 is no longer available for sale. QuantumX DAQ system (especially the QuantumX modules MX840A and MX440A) are recommended. |
|
Catman easy software | HBM Hottinger Baldwin Messtechnik GmbH |
Version 4.2.2 | |
Air bearing | IBS precision engineering | 13 mm air bushing | |
Stainless steel impeller shaft | Bioengineering AG | Shaft tolerance -0.0076 mm | |
Brushless motor AKM2 | Kollmorgen | ||
Metal bellow coupling | Uiker AG | ||
Finesse RDPDmini control unit | Finesse, a part of Thermo Fisher Scientific | No longer supported (the replacement product G3Lab universal controller can be used) | |
Sucrose | Migros Schweiz AG | Food grade | |
Matlab software | Mathworks | Version R2017a | |
Finesse μTruBio PC software | Finesse, a part of Thermo Fisher Scientific | Version 3.1 (no longer supported) | |
SmartGlass 1L | Finesse, a part of Thermo Fisher Scientific | referred to as Bioreactor 1L in Table 2 | |
SmartGlass 3L | Finesse, a part of Thermo Fisher Scientific | referred to as Bioreactor 3L in Table 2 | |
SmartVessel 3L | Finesse, a part of Thermo Fisher Scientific | referred to as Single-Use 3L Bioreactor in Table 2 | |
Mobius CellReady 3L | Merck Millipore | referred to as Cell Ready Single-Use 3L Bioreactor in Table 2 | |
UniVessel SU 2L | Sartorius Stedim Biotech | referred to as Single-Use 2L Bioreactor in Table 2 |