ビーズ ベースの涙サイトカイン解析マルチプレックス アッセイ

涙は、涙腺と付属腺によって生成され、眼の外側の表面をコートします。涙液膜は外側の脂質層の可溶性タンパク質が含まれています内部の水層で構成され、ムチンと膜結合ムチン。涙は、微生物の侵入を防ぐため栄養素を供給し、眼の表面に潤滑を提供します。涙は、空気と角膜への酸素輸送のための組織間のインターフェイスとして機能します。¹涙液層はタンパク質、炭水化物、脂質、電解質の成ってです。緑内障、ドライアイ、春季カタル、糖尿病のような眼と全身疾患との涙液タンパク質間の関連付け、甲状腺関連眼窩と癌がいくつかの研究で確認されました。^2,3,4涙のサンプルが収集できるマイクロキャピ ラリー チューブまたは涙の流れストリップ (シルマー ストリップ)。また、シルマーのテストは、角膜・屈折矯正手術診療所、結果はサイトカイン解析アッセイに使用可能性があります実行される標準的な手順です。非侵襲的なサンプルのコレクション、バイオ試料のアクセシビリティと様々 な生理学的、病理学的条件と組成物を引き裂く協会作る映画いくつかの眼と全身疾患のバイオ マーカーの潜在的なソースを引き裂きます。^4,5,6

サイトカインは、涙は、眼表面の健康と様々 な眼疾患の炎症性条件の研究に重要な役割を果たしています。⁷涙のサンプルでいくつかのサイトカインの異常な濃度は、ドライアイ、春季カタル (VKC)、アトピー性角結膜炎 (AKC)、季節性アレルギー性結膜炎、ぶどう膜炎に関連する報告されました。^{8,9,10,11,12,13}涙液タンパク質は、質量分析法、ウェスタンブロット法・酵素抗体法 (elisa 法) のような従来の方法で分析できます。^14,15しかし、これらのメソッドの制限、感度不良、各患者における複数の涙サイトカインの解析に必要なサンプル量が多い。^16,17ビーズによるマルチプレックスアッセイ複雑な混合試料の複数検体を分析するために開発され正常に異なった病気で複数のサイトカインを分析する涙サンプルに適用。^6,サンドイッチ elisa 法の¹⁸ A の組み合わせと流れ cytometry 技術は、単一サンプル複数検体の定量化のための ELISA よりも敏感になることこれらのアッセイを有効にします。¹⁹様々 ないくつかの病態生理学的条件における免疫応答における臨床サンプルや細胞培養上清にこの方法を適用できます。^{20,21,22,23,24}

ELISA の試金方法の相関を報告している比較ビーズによる多重いくつか研究がなされています。トイレらに比べてビーズ レジスチン、人間の血清または血漿試料中のグレリンとレプチン、アディポネクチンの検出のため従来 elisa 法による多重アッセイをベースし、強い相関を報告 (r > 0.9)、アッセイの間。²⁵デュポンらの il-1 β の検出ビーズによるマルチプレックスアッセイと ELISA との間の強い相関関係を報告した IL 4、IL-5、IL-6、IL-10、IFN-ϒ、TNF-α フィトヘマグルチニンでリポ多糖刺激全血妊娠中の女性から収集されます。²⁶ ・ ピカリングら報告ヘモフィルス インフルエンザb 型多糖類に対する血清抗体の検出のためビード基づくマルチプレックス アッセイと ELISA との間別の強い相関 (r = 0.96)、のトキソイド破傷風(r = 0.96)、およびジフテリア(r = 0.91)。²⁷ビアジーニら報告高い正の相関 (r = 0.852) 基づくビーズ マルチプレックス アッセイと炭疽アンチ PA の IgG 血清試料中の検出のための ELISA の間。²⁸王ら報告アミロイド β 42 のアルツハイマー病バイオ マーカーの検出のためビード基づくマルチプレックス アッセイと ELISA の相関 (r = 0.77)、総タウ (r = 0.94)、およびアミノ酸 181 にリン酸化タウ (r = 0.82) で脳脊髄液のサンプル。²⁹これらの研究はビーズの適用によるマルチプレックスアッセイ様々 な有望なビードによるマルチプレックスアッセイを作る臨床サンプル、小さいサンプル ボリュームの要件、標準的な elisa 法との相関を示しています。異なる疾患表現型のサンプルの型が異なる場合の複数検体の検出のための従来の ELISA 法に代わる。ここでサイトカインのシルマー ストリップを使用して健康な被験者から集められた涙サンプルの 41 検体プロファイリングのビーズによる多重試金のための標準化されたプロトコルについて述べる。