إنشاء نموذج القوارض من الابهر البطني عن طريق حظر أدفينتيتيال Vasa Vasorum التروية
Summary
حمل الإدراج القسطرة البولي يوريثان في التجويف الابهر وربط خياطة الابهر نقص مزمنة بسبب هيبوبيرفوسيون فاسوروم فاسا أدفينتيتيال. توضح هذه المقالة نموذج حيوان رواية لتمدد الشريان الاورطي البطني (AAA) مع خصائص مشابهة لتلك التي AAA في البشر.
Abstract
أدفينتيتيال vasa vasorum (ت ت) يوفر الأوكسجين والتغذية على الجدار الابهري. يمكن أن يسبب نقص في الجدار الابهري الموسع البطن تمدد الأوعية الدموية الابهري (AAAs). يقدم هذا المقال ويصف بروتوكول قياسي يستخدم لحمل AAAs من خلال أدفينتيتيال هيبوبيرفوسيون ت ت تم إنشاؤها باستخدام مزيج من الإدراج القسطرة البولي يوريثان في التجويف الابهر وربط خياطة للشريان الاورطي البطني إينفرارينال.
البروتوكول ينطوي على استخدام الفئران الذكور وزنها 300-400 جرام، التي تقدم الغذاء والمياه libitum الإعلانية. بعد فتح البطن بشق البطن البطني خط الوسط، يتم تنفيذ تسلخات الابهر، مما يمنع تدفق الدم من ارتشاح الأنسجة. يتم تنفيذ أورتوتومي التي تنطوي على شق صغيرة المتاخمة لفروع الشريان الكلوي، ومدرج قسطرة البولي يوريثان باستخدام إبرة نائحين عيار 18. بعد إصلاح الشق، كتل ربط ضيق الابهر عبر القسطرة ت ت تدفق الدم من اتجاه الدانية عن طريق الجدار الابهر دون عرقلة تدفق الدم الابهري. هذا الأسلوب يمكن أن يستحث AAA مع توسع الابهر التدريجي.
أكبر فائدة من هذا النموذج هو أن ت ت هيبوبيرفوسيون يسبب نقص الأنسجة وتطوير إينفرارينال AAA، التي لها الخصائص المورفولوجية والمرضية مشابهة لتلك التي AAA البشرية.
Introduction
الشريان الاورطي البطني ويتألف من الطبقات الثلاث التالية: جدار الأوعية الدموية الداخلية (البطانية) وطبقة وسطى (وسائل الإعلام)، والجدار الخارجي والأوعية الدموية (الغلالة)، وهذه الغلالة دم فريدة توريد نظام يعرف باسم vasa vasorum (ت ت). يتم تزويد النسيج الابهري مع الأكسجين من خلال أدفينتيتيال ت ت نضح ونشر الأوكسجين بسيطة من تدفق الدم الابهري1. ومع ذلك، قد الشريان الاورطي البطني جغرافيا، توزيع أقل من ففس مقارنة بأجزاء أخرى من الشريان الاورطي. 2
وأفادت دراسة سابقة على نقص الأنسجة في الإنسان الابهر البطني (AAA) جدران سميكة intraluminal خثرة (ILT)3. بالإضافة إلى ذلك، لقد ثبت أن ت ت أدفينتيتيال في الجدران التوسعات هو تغطي مع تغييرات تصلب بسعر أعلى بكثير، مما يرتبط بنقص الأنسجة في جدران AAA4. استناداً إلى هذه النتائج، تم إنشاء نموذج القوارض رواية AAA بحمل أدفينتيتيال ت ت هيبوبيرفوسيون5. في هذا النموذج، ت ت هيبوبيرفوسيون تسبب نقص الأنسجة وتطوير إينفرارينال AAA، التي لها الخصائص المورفولوجية والمرضية مشابهة لتلك التي AAA البشرية6. وكانت أبرز الأمثلة وجود ILTs وتراكم adipocytes (hyperplastic)6، ويمكن أن تسبب تمزق7،8. هذه النتائج قد لوحظت نادراً في السابق نماذج القوارض. ولذلك، هذا النموذج قد تسهم إسهاما كبيرا في فهم أعمق للآلية المسؤولة عن تطوير AAA وتمزق. ونحن إدخال وصف بروتوكول قياسي يستخدم لحمل AAAs من خلال أدفينتيتيال ت ت هيبوبيرفوسيون، ونشرح كيفية حمل نقص في الجدار الابهري باستخدام التقنيات الجراحية.
Protocol
Representative Results
Discussion
في ظل الظروف الفسيولوجية، الطبقات الداخلية من الجدار الابهر هي تغذيها نشرها من تدفق الدم لومينال، بينما يتغذى طبقات الخارجي والأوسط هي التي ت ت، التي تخترق من الغلالة ت ت الآنسي1. ت ت تدفق الدم في جدار الابهر البطني يمكن أن تنشأ من الاتجاهات/المجالات الثلاثة التالية: (1) الاتجاه الدانية عن طريق الجدار الابهري، والاتجاه (2) البعيدة عن طريق الجدار الابهر، و (3) ارتشاح الأنسجة10. سابقا، حددت لنا التحليل النسيجي للأنسجة البشرية كبيرة تضيق أو انسداد ت ت في الجدار AAA، مما يوحي بأن ت ت تدفق الدم في جدار الابهر البطني يمكن خفض4. أنها نقطة هامة جداً في هذا البروتوكول وإينفرارينال أأأ ناجم عن مزيج من الإدراج القسطرة البولي يوريثان وربط خياطة للشريان الاورطي البطني إينفرارينال. لقشر طبقة الأنسجة بدقة، يجب إدراج قسطرة البولي يوريثان بسلاسة في الشريان الاورطي الجراحين وراسخا سد الشريان الاورطي تسبب نقص مزمنة بسبب هيبوبيرفوسيون ت ت أدفينتيتيال وتشكيل الأوعية الدموية. باستخدام هذه التقنيات، ونتيجة لذلك انخفض تدفق الدم في جدار الابهر، وهو فعل بيئة التاكسج محلية. الحد من تدفق الدم والأوعية الدموية الناجمة عن نقص تكوين يشير إلى أن ت ت تدفق الدم في جدار الابهر البطني دوراً في الآلية المرضية لتشكيل أأأ.
على وجه التحديد، هو نموذج الابهر يجب أن يستوفي الشروط التالية: زيادة بنسبة 1.5-fold في قطر الأوعية الدموية مقارنة بخط الأساس وتنكس الإعلام الغلالة، والتهاب الجدار الابهر. وتم تشييد النماذج الحيوانية الأكثر شعبية بتحريض استجابات التحريضية باستخدام مواد مثل الاستاسي12،2كاكل11وانجيوتنسين الثاني13. هذه النماذج يمكن أن يكون إمكانية تكرار نتائج عالية ومن الواضح أن يؤدي تغيير المرضية، وأنها قد استخدمت عادة في البحوث والدراسات. في نموذجنا، قمنا بتقييم قطر الابهر باستخدام الموجات فوق الصوتية كل 7 أيام من قبل الإجراء الذي أنجز حتى يوم 28 بعد هذا الإجراء (الشكل 3). وأظهرت النتائج أن قطر الابهر زيادة معتدلة على مدى ال 28 يوما، مشيراً إلى أن هذا التغيير في القطر مشابه لذلك في نماذج القوارض السابقة. بينت المراقبة الإجمالي لشكل الأوعية الدموية شكل مغزلي سلس (الشكل 2). في يوم 28، التضحية بالفئران، وتحليلاً نسيجية الابهري الأنسجة التي تم استردادها. ولوحظت تمزق والاختفاء من الألياف المرنة والكولاجين الغلالة وسائل الإعلام والغلالة (الشكل 4). وعلاوة على ذلك، الخلايا التحريضية، مثل الضامة، كانوا حاضرين من الغلالة الغلالة الغلالة وسائل الإعلام.
خيارات العلاج المتاحة ل AAAs حاليا محدود للإصلاح الجراحي والتطعيم تركيب دعامات اللمفاوية، مع معدلات الوفيات من 30-50% في المرضى الذين يعانون من تمزق أأأ14. ومع ذلك، وافقت أي دواء للاستخدام السريري لعلاج AAAs. وهناك المناقشة أن هناك اختلافات في النتائج المرضية بين البشر والنماذج الحيوانية الثابتة المستخدمة في البحوث أأأ. أوجه التشابه في الآلية المرضية بين أأأ البشرية والحيوانية أأأ نماذج ضرورية لتطوير العلاجات الدوائية. فيما يتعلق بفعالية نماذج القوارض، لدينا نموذج الفئران مشابه شكلياً للبشر من حيث intraluminal خثرة5 وأديبوجينيسيس8. وعلاوة على ذلك، حوالي 20% الفئران في هذه الدراسة قد تمزق AAA وتوفي في غضون 28 يوما بعد هذا الإجراء. على الرغم من أن تمزق الابهر هو الحدث الأكثر أهمية لهذا المرض، تمزق المألوف مع النماذج AAA التجريبية المنشأة، وليس بعد توضيح هذه الآلية. ولذلك، هذا النموذج مفيد لفهم إليه تمدد قطر الابهر وتمزق تمدد الأوعية الدموية.
إنشاء هذا النموذج مطلوب لبعض العمليات الجراحية. ولذلك، يجب ممارسة الباحثون إنشاء هذا النموذج، الذي حد من هذا الطراز. ونود في المستقبل، لإنشاء نموذج القوارض التي نحن نقصان تدفق الدم بالتدريج سماكة جدران ت ت، أسفر عن عفوية الابهر.
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
هذا العمل كان يدعمها الإقراض للعلمية البحثية (ب) (20291958) إلى N.U.؛ معونة للعلماء الشباب (أ) (25713024) لامتحان
Materials
| rat | Japan SLC.Inc | Slc:SD rat | Sprague–Dawley ratTM |
| povidone-iodine solution | Libatape Pharmaceutical Co., Ltd. | 4987335 111457 | |
| 5-0 silk string | Akiyama Medical MFG. CO.,LTD | JIS No.1 | |
| vascular clips | Natsume Seisakusho Co., Ltd. | C-42-S-2 | |
| polyurethane catheter (24-gauge indwelling needle) | MEDIKIT | 24G | Supercath Z4VTM, 24-gauge indwelling needle |
| polyurethane catheter (18-gauge indwelling needle) | MEDIKIT | 18G | Supercath Z3VTM, 18-gauge indwelling needle |
| 8-0 monofilament string | Ethicon Suture | c-42-S-2 | PROLENE Polypropylene Suture, Repair the incision with the suture |
References
- Wolinsky, H., Glagov, S. Comparison of abdominal and thoracic aortic medial structure in mammals. Deviation of man from the usual pattern. Circ Res. 25 (6), 677-686 (1969).
- Sano, M., et al. Lymphangiogenesis and angiogenesis in abdominal aortic aneurysm. PLoS One. 9 (3), e89830 (2014).
- Vorp, D. A., et al. Association of intraluminal thrombus in abdominal aortic aneurysm with local hypoxia and wall weakening. J Vasc Surg. 34 (2), 291-299 (2001).
- Tanaka, H., et al. Adventitial vasa vasorum arteriosclerosis in abdominal aortic aneurysm. PLoS One. 8 (2), e57398 (2013).
- Tanaka, H., et al. Hypoperfusion of the Adventitial Vasa Vasorum Develops an Abdominal Aortic Aneurysm. PLoS One. 10 (8), e0134386 (2015).
- Tanaka, H., et al. Imaging Mass Spectrometry Reveals a Unique Distribution of Triglycerides in the Abdominal Aortic Aneurysmal Wall. J Vasc Res. 52 (2), 127-135 (2015).
- Kugo, H., et al. The preventive effect of fish oil on abdominal aortic aneurysm development. Biosci Biotechnol Biochem. 80 (6), 1186-1191 (2016).
- Kugo, H., et al. Adipocyte in vascular wall can induce the rupture of abdominal aortic aneurysm. Sci Rep. 6, 31268 (2016).
- Lichtenberg, A., Cebotari, S., Tudorache, I., Hilfiker, A., Haverich, A. Biological scaffolds for heart valve tissue engineering. Methods Mol Med. 140, 309-317 (2007).
- Heistad, D. D., Marcus, M. L., Larsen, G. E., Armstrong, M. L. Role of vasa vasorum in nourishment of the aortic wall. Am J Physiol. 240 (5), H781-H787 (1981).
- Yoshimura, K., et al. Regression of abdominal aortic aneurysm by inhibition of c-Jun N-terminal kinase. Nat Med. 11 (12), 1330-1338 (2005).
- Azuma, J., Asagami, T., Dalman, R., Tsao, P. S. Creation of murine experimental abdominal aortic aneurysms with elastase. J Vis Exp. (29), (2009).
- Lu, H., et al. Subcutaneous Angiotensin II Infusion using Osmotic Pumps Induces Aortic Aneurysms in Mice. J Vis Exp. (103), (2015).
- United Kingdom, E. T. I., et al. Endovascular versus open repair of abdominal aortic aneurysm. N Engl J Med. 362 (20), 1863-1871 (2010).
