Physical models of biomolecules can facilitate an understanding of their structure-function for the researcher, aid in communication between researchers, and serve as an educational tool in pedagogical endeavors. Here, we provide detailed guidance for the 3D printing of accurate models of biomolecules using fused filament fabrication desktop 3D printers.
The construction of physical three-dimensional (3D) models of biomolecules can uniquely contribute to the study of the structure-function relationship. 3D structures are most often perceived using the two-dimensional and exclusively visual medium of the computer screen. Converting digital 3D molecular data into real objects enables information to be perceived through an expanded range of human senses, including direct stereoscopic vision, touch, and interaction. Such tangible models facilitate new insights, enable hypothesis testing, and serve as psychological or sensory anchors for conceptual information about the functions of biomolecules. Recent advances in consumer 3D printing technology enable, for the first time, the cost-effective fabrication of high-quality and scientifically accurate models of biomolecules in a variety of molecular representations. However, the optimization of the virtual model and its printing parameters is difficult and time consuming without detailed guidance. Here, we provide a guide on the digital design and physical fabrication of biomolecule models for research and pedagogy using open source or low-cost software and low-cost 3D printers that use fused filament fabrication technology.
Una comprensión completa de la función y la actividad de una biomolécula requiere la determinación de su estructura tridimensional (3D). Esto se logra de forma rutinaria utilizando cristalografía de rayos X, RMN, o microscopía electrónica. Estructuras 3D se pueden entender a través de la percepción de los modelos u objetos precisos se asemejan a las estructuras que representan 1. Históricamente, la construcción de modelos físicos 3D era necesario que el investigador para validar, explorar, y se comunican las hipótesis resultantes con respecto a la función de las biomoléculas. Estos modelos, como el ADN de doble hélice de Watson-Crick y hélice alfa de Pauling, a condición de visión única de las relaciones estructura-función y fueron fundamentales para nuestra comprensión temprana de ácido nucleico y proteínas de estructura-función 2, 3, 4. Aunque los modelos de ácidos nucleicos de proteínas complejas y pueden ser creados, lael tiempo y el costo de la construcción de un modelo físico fue finalmente superado por la relativa facilidad de visualización molecular asistido por ordenador.
El desarrollo de la impresión en 3D, también conocido como aditivo de fabricación, de nuevo ha permitido la construcción de modelos físicos de biomoléculas 5. la impresión en 3D es el proceso de fabricación de un objeto físico, 3D a partir de un archivo digital a través de la adición secuencial de capas de un material (s). Una variedad de mecanismos se utilizan en este proceso. Hasta hace poco, las máquinas utilizadas para producir modelos físicos de biomoléculas eran demasiado caros para ser utilizado. Sin embargo, en la última década, la tecnología de impresión 3D, la fabricación de filamentos fusionados (FFF), en particular, ha avanzado de manera significativa, por lo que es accesible para uso de los consumidores 6. FFF impresoras ahora están comúnmente disponibles en las escuelas secundarias, bibliotecas, universidades y laboratorios. La mayor asequibilidad y accesibilidad de la tecnología de impresión 3Dha hecho posible convertir los modelos 3D biomoleculares digitales en modelos precisos, físicos 3D biomoleculares 7, 8, 9. Tales modelos incluyen no sólo representaciones simples de biomoléculas individuales, sino también a conjuntos macromoleculares complejas, tales como las estructuras de la cápside de ribosomas y de virus. Sin embargo, el proceso de impresión de biomoléculas individuales y conjuntos macromoleculares plantea varios problemas, en particular cuando se utilizan métodos de extrusión de termoplásticos. En particular, las representaciones de las biomoléculas a menudo tienen geometrías complejas que son difíciles para impresoras para producir y crear y procesar los modelos digitales que se imprimirán con éxito requiere habilidad con el modelado molecular, modelado en 3D y software de la impresora 3D.
El flujo de trabajo 3D para imprimir una biomolécula en términos generales se produce en cuatro etapas: (1) la preparación de un modelo biomolecular de su archivo de coordenadas para la impresión en 3D;(2) importar el modelo biomolecular en un software "de corte" para segmentar el modelo de la impresora y para generar una estructura de apoyo que va a sostener físicamente el modelo biomolecular; (3) seleccionar el filamento o la impresión correcta del modelo 3D; y (4) etapas de procesamiento post-producción, incluyendo la eliminación de material de apoyo del modelo (Figuras 1 y 2). El primer paso en este proceso, la manipulación de computacionalmente el archivo de coordenadas de la biomolécula, es crítica. En esta etapa, el usuario puede construir refuerzos modelo en forma de puntales, así como eliminar las estructuras que son extraños a lo que el usuario elige visualizar. Además, la elección de la representación se realiza en esta etapa: si se muestra la totalidad o parte de la biomolécula como una representación de la superficie, cintas, y / o átomos individuales. Una vez que las adiciones y / o restas de contenido se hacen necesarias y se selecciona la representación, la estructura se guarda como un mo 3Ddel archivo. A continuación, el archivo se abre en un segundo programa de software para convertir el modelo en un archivo de impresión 3D que se puede imprimir, capa por capa, en una réplica de plástico de la biomolécula.
El objetivo de nuestro protocolo es hacer que la fabricación de modelos moleculares accesible para el gran número de usuarios que tienen acceso a las impresoras de la FFF, pero no más caros tecnologías de impresión 3D. A continuación, ofrecemos una guía para la impresión en 3D de biomoléculas a partir de datos moleculares en 3D, con métodos que han sido optimizados para la impresión FFF. Detallamos cómo aprovechar al máximo la capacidad de impresión de las estructuras biomoleculares complejas y garantizar la sencilla post-procesamiento de modelos físicos. Las propiedades de los diversos materiales de impresión más comunes o filamentos se comparan, y las recomendaciones sobre su uso para crear impresiones se proporcionan flexibles. Finalmente, un escaparate de una serie de ejemplos de modelos impresos biomoleculares-3D que muestran el uso de diferentes representaciones moleculares.
Physical 3D models of biomolecules provide a powerful complement to more common computer-based methods of visualization. The additional properties of a physical 3D representation contribute to the intuitive understanding of biomolecular structure. The construction of physical 3D models of biomolecules can facilitate their study through the use of a medium that takes advantage of well-developed modes of human sensation. 3D models serve not only as an aid to the researcher, but may be used to facilitate pedagogical activities and can increase the achievement of learning outcomes13,14,15. Magnets can be added to plastic models to allow for assembly and disassembly, as shown with a model of polypeptides16. Also, 3D-printed objects can be used in research, both in the manufacturing of lab equipment17, as well as to make microfluidic devices for cells18 and models of crystals19 or neurons20. The manipulation of physical models can serve to promote collaborative discussions that can inspire new insights.
Recent developments in 3D printing technologies and reductions in the cost of printers enables the creation of complex, physical 3D models of biomolecules by an individual user. Although FFF printing technology is more common and less expensive than other methods, it poses a number of limitations. The 3D printing process is time consuming, and mechanical failures do occur. FFF printers can usually only print one material per part, restricting the display of color information. The resolution of models made on FFF printers is low, around 100 µm per layer. We advise the reader to work with these limitations and to develop an approach for their printer and biomolecule(s) of interest. We have presented the processes required for a user to develop a custom 3D representation of their biomolecule of interest that is accurate, informative, and printable. As with any new technology, there are often "growing pains" that must be overcome during its usage. We provide several examples where problems may be encountered in the process of 3D printing biomolecules (see supplement 6).
Finally, through this article, it is our objective to contribute to the growth of a community of users engaged in the 3D printing of biomolecules. Importantly, the NIH has established a database for the public to share 3D models and the methods used to print them10. We strongly encourage participation in this unique resource (see supplement 7 for instructions on how to upload a 3D model print and background information to the NIH 3D Print Exchange).
The authors have nothing to disclose.
The authors are grateful for the support of Deis3D, the Brandeis 3D Printing Club, and members of Brandeis Library/LTS/Makerlab. This work was funded in part by a grant awarded to Pomeranz Krummel by the NSF, Award No. 1157892; an ESIT grant of the BMBF, awarded to the University of Tübingen; and US Federal funds from the National Institutes of Health, Department of Health and Human Services, under Contract No. GS35F0373X. Molecular graphics and analyses were performed with the UCSF Chimera package. Chimera was developed by the Resource for Biocomputing, Visualization, and Informatics at the University of California, San Francisco (supported by NIGMS P41-GM103311).
Filament | |||
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Software | |||
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Chimera | University of California, San Francisco | https://www.cgl.ucsf.edu/chimera/ | Chimera molecular vizualizer |
Meshmixer | Autodesk | http://www.meshmixer.com/ | Used for orienting models, but has other features |