Physical models of biomolecules can facilitate an understanding of their structure-function for the researcher, aid in communication between researchers, and serve as an educational tool in pedagogical endeavors. Here, we provide detailed guidance for the 3D printing of accurate models of biomolecules using fused filament fabrication desktop 3D printers.
The construction of physical three-dimensional (3D) models of biomolecules can uniquely contribute to the study of the structure-function relationship. 3D structures are most often perceived using the two-dimensional and exclusively visual medium of the computer screen. Converting digital 3D molecular data into real objects enables information to be perceived through an expanded range of human senses, including direct stereoscopic vision, touch, and interaction. Such tangible models facilitate new insights, enable hypothesis testing, and serve as psychological or sensory anchors for conceptual information about the functions of biomolecules. Recent advances in consumer 3D printing technology enable, for the first time, the cost-effective fabrication of high-quality and scientifically accurate models of biomolecules in a variety of molecular representations. However, the optimization of the virtual model and its printing parameters is difficult and time consuming without detailed guidance. Here, we provide a guide on the digital design and physical fabrication of biomolecule models for research and pedagogy using open source or low-cost software and low-cost 3D printers that use fused filament fabrication technology.
Uma compreensão completa da função e actividade de uma biomolécula requer a determinação da sua estrutura tridimensional (3D). Isto é habitualmente conseguido utilizando cristalografia de raios-X, RMN, ou microscopia electrónica. Estruturas 3D pode ser compreendido através da percepção de modelos, ou objectos semelhantes às estruturas precisas que eles representam um. Historicamente, a construção de modelos 3D físicas era necessário para os investigadores para validar, explorar e comunicar as hipóteses resultantes quanto à função de biomoléculas. Estes modelos, como a dupla hélice do DNA de Watson-Crick e hélice alfa de Pauling, desde uma visão única sobre relações estrutura-função e foram fundamentais para o nosso entendimento inicial de ácido nucleico e proteína estrutura-função 2, 3, 4. Embora os modelos de ácidos nucleicos de proteínas complexo e pode ser criado, otempo e custo de construção de um modelo físico foi finalmente superado pela relativa facilidade de visualização molecular assistida por computador.
O desenvolvimento de impressão 3D, também conhecido como aditivo de fabricação, mais uma vez permitiu a construção de modelos físicos de biomoléculas 5. impressão em 3D é o processo de fabrico, um objecto 3D física de um arquivo digital através da adição sequencial de camadas de um material (s). Uma variedade de mecanismos são usados no presente processo. Até recentemente, as máquinas utilizadas para a produção de modelos físicos de biomoléculas eram demasiado caro para ser amplamente utilizado. No entanto, na última década, a tecnologia de impressão 3D, fundido a fabricação de filamentos (FFF), em particular, tem avançado significativamente, tornando-o acessível para uso do consumidor 6. impressoras FFF agora estão normalmente disponíveis em escolas, bibliotecas, universidades e laboratórios. A maior disponibilidade e acessibilidade da tecnologia de impressão 3Dtornou possível converter modelos biomoleculares 3D digitais em exatas, físicas modelos biomoleculares 3D 7, 8, 9. Tais modelos incluem não só representações simples de biomoléculas isoladamente, mas também conjuntos macromoleculares complexos, tais como as estruturas de cápside de ribossoma e de vírus. No entanto, o processo de impressão de biomoléculas individuais e montagens macromoleculares coloca vários desafios, particularmente quando se utiliza os métodos de extrusão de termoplásticos. Em particular, as representações de biomoléculas muitas vezes têm geometrias complexas que são difíceis para impressoras para produzir e criar e processar modelos digitais que serão impressos com sucesso requer habilidade com modelagem molecular, modelagem 3D e software da impressora 3D.
O fluxo de trabalho 3D para imprimir uma biomolécula amplamente ocorre em quatro etapas: (1) preparar um modelo biomolecular de seu arquivo de coordenadas para impressão em 3D;(2) a importação do modelo biomolecular em um software "fatiamento" para segmentar o modelo para a impressora e para gerar uma estrutura de apoio que irá fisicamente sustentar o modelo biomolecular; (3) selecção correcta do filamento e a impressão do modelo 3D; e (4) passos de processamento pós-produção, incluindo a remoção de material de suporte a partir do modelo (Figuras 1 e 2). O primeiro passo neste processo, computacionalmente manipular o arquivo de coordenadas da biomolécula, é crítica. Nesta fase, o usuário pode construir reforços modelo na forma de suportes, bem como remover estruturas que são estranhos ao que o usuário optar por exibir. Além disso, a escolha da representação seja feita nesta fase: se pretende visualizar a totalidade ou parte da biomolécula como uma representação da superfície, fitas, e / ou átomos individuais. Uma vez que as adições e / ou subtrações de conteúdos necessários sejam feitos e a representação for selecionada, a estrutura é guardado como um mo 3Darquivo del. Em seguida, o arquivo é aberto em um segundo programa de software para converter o modelo em um arquivo de impressão 3D que pode ser impresso, camada por camada, em uma réplica de plástico da biomolécula.
O objetivo do nosso protocolo é fazer com que a fabricação de modelos moleculares acessível para o grande número de usuários que têm acesso a impressoras FFF, mas tecnologias de impressão 3D para não mais caros. Aqui, nós fornecemos um guia para a impressão 3D de biomoléculas de dados moleculares em 3D, com métodos que são otimizadas para impressão FFF. Detalhamos como maximizar a capacidade de impressão de complexas estruturas biomoleculares e garantir a pós-processamento simples de modelos físicos. As propriedades de vários materiais de impressão comum ou filamentos são comparados e recomendações sobre seu uso para criar impressões flexíveis são fornecidos. Finalmente, nós apresentamos uma série de exemplos de modelos biomoleculares-impressos em 3D que demonstram a utilização de diferentes representações moleculares.
modelos 3D físicas de biomoléculas fornecer um complemento poderoso para métodos baseados em computador mais comuns de visualização. As propriedades adicionais de uma representação 3D física contribuem para a compreensão intuitiva da estrutura biomolecular. A construção de modelos 3D físicas de biomoléculas pode facilitar o seu estudo através do uso de uma forma que tira partido de modos bem desenvolvida de sensação humana. Modelos 3D servem não apenas como uma ajuda para o pesquisador, mas pode ser usado para facilitar atividades pedagógicas e pode aumentar o alcance dos resultados de aprendizagem 13, 14, 15. Imans podem ser adicionados aos modelos de plástico para permitir a montagem e desmontagem, como se mostra com um modelo de polipéptidos 16. Além disso, objectos 3D-impressa pode ser usada em investigação, tanto na fabricação de equipamento de laboratório 17, bem como para fazer microfldispositivos uidic para células 18 e modelos de cristais 19 ou neurônios 20. A manipulação de modelos físicos podem servir para promover discussões colaborativas que podem inspirar novos insights.
Os recentes desenvolvimentos em tecnologias de impressão 3D e reduções no custo de impressoras permite a criação de complexos modelos físicos 3D de biomoléculas por um usuário individual. Embora a tecnologia de impressão FFF é mais comum e menos caro do que outros métodos, que representa uma série de limitações. O processo de impressão em 3D é demorado, e falhas mecânicas que ocorrem. impressoras FFF normalmente só pode imprimir um material por parte, restringindo a exibição de informações de cor. A resolução dos modelos feitos em impressoras FFF é baixa, em torno de 100 mm por camada. Aconselhamos o leitor a trabalhar com essas limitações e desenvolver uma abordagem para a sua impressora e biomoléculas (s) de interesse. Nós apresentamos o processes necessários para um usuário desenvolver uma representação 3D costume de sua biomolécula de interesse que é preciso, informativo e de impressão. Tal como acontece com qualquer nova tecnologia, muitas vezes há "dores de crescimento" que devem ser superados durante o seu uso. Nós fornecemos vários exemplos onde os problemas podem ser encontradas no processo de biomoléculas de impressão 3D (ver suplemento 6).
Finalmente, através deste artigo, é o nosso objectivo de contribuir para o crescimento de uma comunidade de usuários que se dedicam à impressão 3D de biomoléculas. Importante, o NIH estabeleceu uma base de dados para o público a compartilhar modelos 3D e os métodos utilizados para imprimi-los 10. Nós encorajamos fortemente a participação no presente recurso exclusivo (ver suplemento 7 para obter instruções sobre como carregar uma impressão modelo 3D e informações de fundo para a Bolsa de impressão NIH 3D).
The authors have nothing to disclose.
The authors are grateful for the support of Deis3D, the Brandeis 3D Printing Club, and members of Brandeis Library/LTS/Makerlab. This work was funded in part by a grant awarded to Pomeranz Krummel by the NSF, Award No. 1157892; an ESIT grant of the BMBF, awarded to the University of Tübingen; and US Federal funds from the National Institutes of Health, Department of Health and Human Services, under Contract No. GS35F0373X. Molecular graphics and analyses were performed with the UCSF Chimera package. Chimera was developed by the Resource for Biocomputing, Visualization, and Informatics at the University of California, San Francisco (supported by NIGMS P41-GM103311).
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Software | |||
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