Мышиные лимфоцит Этикетировочное по⁶⁴ Си-антитело к рецептору Ориентация на<em> В Vivo</em> Cell Торговля ПЭТ / КТ

Неинвазивная отслеживания клеток является универсальным инструментом для мониторинга функции клеток, миграции и самонаведения в естественных условиях. Недавние исследования отслеживания клетки были сосредоточены на мезенхимальных ^{1, 2} или костного мозга стволовых клеток , полученных ³ в контексте регенеративной медицины, аутологичных периферических белых кровяных клеток в воспалении или Т – лимфоцитов в приемными терапии клеток против рака ^{3, 4.} Выяснение мест действия и основных биологических принципов клеточной терапии имеет огромное значение. CD8 ⁺ цитотоксических Т – лимфоцитов, методами генной инженерии антиген химерный рецептор (CAR) Т – клетки или опухолевые-лимфоциты (Tīls) широко рассматривается как золотой стандарт. Тем не менее, ассоциированные с опухолью антиген-специфические Th1 клетки оказались эффективной альтернативой вариант лечения ^{4, <}/ SUP> ^{5, 6, 7.}

В качестве ключевых игроков в воспалении, орган-специфический аутоиммунных заболеваний (например, ревматоидный артрит или бронхиальная астма), и клеток , представляющих особого интереса в иммунотерапии рака, важно , чтобы охарактеризовать временные закономерности распределения и самонаводящиеся Th1 – клетки. Неинвазивные в естественных изображения с помощью ПЭТ представляет собой количественный, высокочувствительный метод ⁸ для изучения моделей миграции клеток, в естественных условиях ГСНЫ, и сайты действия Т – клеток и ответы во время воспаления, аллергии, инфекций или отторжения опухоли ^{9, 10, 11.}

Клинически, ¹¹¹ В-Oxine используется для лейкоцитарной сцинтиграфии для дискриминации воспаления и инфекции ^12, в то время как 2-дезокси-2- ⁽¹⁸F) , фтор-D-глюкозы ⁽¹⁸ F-ФДГ) обычно используется для отслеживания исследований клеток с помощью ПЭТ ^{3, 13.} Одним из главных недостатков этого ПЭТ трассирующими, однако, короткий период полураспада радионуклида ¹⁸ F в 109,7 мин и низкой внутриклеточной стабильности , которая препятствует визуализации в более поздние моменты времени после усыновителя перенос клеток. Для более длительного срока в естественном условиях исследования отслеживания клеток путем ПЭТ, хотя и нестабильные в клетках, ⁶⁴ Си-PTSM часто используются для обозначения неспецифический клетки ^{14, 15} с сведены к минимуму вредных воздействий на жизнеспособности Т – клеток и функции ^16.

Этот протокол описывает способ для дальнейшего уменьшения невыгодных воздействие на жизнеспособность и функции клеток с помощью Т-клеточного рецептора (TCR) -специфический радиоактивно меченый Mab. Во- первых, производство радиоизотопных ⁶⁴ Cu, конъюгации с монАТ KJ1-26 с гое хелаторы DOTA, и последующее ⁶⁴ Cu-радиоактивное показаны. На втором этапе, выделение и расширение COVA-TH1 клеток мышей – доноров DO11.10 и радиоактивной с ⁶⁴ Cu-нагруженной DOTA-конъюгированного монАТ KJ1-26 ⁽⁶⁴ Cu-DOTA-KJ1-26) описаны подробно. Оценка поглощения ценностей и оттоком радиоактивности с дозой калибратора и гамма-подсчета, соответственно, а также оценка эффектов ⁶⁴ Cu-радиомечения на жизнеспособность клеток с помощью трипанового синего и функциональности с IFN-gamma ELISA представлены , Для неинвазивной в естественных условиях отслеживания клетки, то извлечение из мышиной модели COVA-индуцированной острой DTHR дыхательных путей и изображений приобретения ПЭТ / КТ после приемных передачи клеток описаны.

Кроме того, этот подход маркировки может быть передан в различные модели заболеваний, мышиные Т-клетки с различным ТКРОМ или общими клетками, представляющего интереса с мембраносвязанными рецепторами или экспрессией MarKERS , лежащий в основе непрерывного мембраны челночного ^17.