Muizen-lymfocyt Labeling door⁶⁴ Cu-Antibody Receptor targeting voor<em> In Vivo</em> Celverkeer PET / CT

Niet-invasieve cell tracking is een veelzijdige tool om celfunctie, migratie en homing in vivo te controleren. Recente cell tracking studies zijn gericht op mesenchymale ^{1, 2} of beenmerg afgeleide stamcellen ³ in het kader van de regeneratieve geneeskunde, autologe perifere witte bloedcellen in ontsteking of T-lymfocyten in adoptieve celtherapie tegen kanker ^{3, 4.} De opheldering van de sites van de actie en de onderliggende biologische principes van cellen gebaseerde therapieën is van enorm belang. CD8 ⁺ cytotoxische T-lymfocyten, genetisch gemanipuleerd chimeer antigen receptor (CAR) T-cellen of tumor infiltrerende lymfocyten (TIL's) werden algemeen beschouwd als de gouden standaard. Echter, tumor geassocieerde antigen-specifieke TH1 cellen bewezen een effectief alternatief behandelingsoptie ^4, zijn ^</ sup> ^{5, 6, 7.}

Als belangrijkste spelers in ontsteking, orgaan-specifieke auto-immuunziekten (zoals reumatoïde artritis of astma), en cellen van grote belangstelling voor immunotherapie van kanker, is het belangrijk om de tijdelijke distributie en homing patronen van Th1-cellen te karakteriseren. Invasieve in vivo imaging PET weer kwantitatief, uiterst gevoelige methode ⁸ celmigratie patronen onderzoeken in vivo homing en het plaatsen van T-cel responsen tijdens actie en ontsteking, allergieën, infecties of tumor-afstotende ^{9, 10, 11.}

Klinisch ^111In-oxine wordt gebruikt om leukocyten scintigrafie voor het onderscheiden van ontsteking en infectie ^12, terwijl 2-deoxy-2- ⁽¹⁸F) fluor-D-glucose ^(18F-FDG) wordt algemeen gebruikt voor cellulaire tracking studies PET ^{3, 13.} Een belangrijk nadeel van deze PET tracer, echter de korte halfwaardetijd van de radionuclide ^18F bij 109,7 min en de lage intracellulaire stabiliteit die belemmert beeldvorming op latere tijdstippen na adoptieve celoverdracht. Voor langere termijn in vivo cell tracking studies van PET, maar instabiel in de cellen, wordt ⁶⁴ Cu-PTSM vaak gebruikt om niet-specifiek label cellen ^{14, 15} met minimale nadelige effecten op T cellevensvatbaarheid en functie ^16.

Dit protocol beschrijft een werkwijze om nadelige effecten op cellevensvatbaarheid en functie in een T-celreceptor (TCR) -specifieke radiogelabelde mAb verder te verminderen. Ten eerste, de productie van radio-isotopen ⁶⁴ Cu, de vervoeging van het mAb KJ1-26 met the chelator DOTA en de daaropvolgende ⁶⁴ Cu-radioactief labelen getoond. In een tweede stap, de isolatie en expansie van cova-TH1 cellen van DO 11.10 donormuizen en het radioactief merken met ⁶⁴ Cu-loaded DOTA-geconjugeerde mAb KJ1-26 ⁽⁶⁴ Cu-DOTA-KJ1-26) worden beschreven. De beoordeling van opnamewaarden en efflux van radioactiviteit met een dosiskalibrator en door y-telling, respectievelijk, en de evaluatie van de effecten van ⁶⁴ Cu-radioactief merken op cellevensvatbaarheid door trypan blauw exclusie en functionaliteit met IFN-y ELISA worden . Voor niet-invasief in vivo cell tracking, het uitlokken van een muismodel van cova-geïnduceerde acute luchtwegen DTHR en beeldacquisitie PET / CT na adoptieve celoverdracht beschreven.

Bovendien kan deze benadering worden labeling doorgezet naar verschillende ziektemodellen murine T-cellen met verschillende TCR of algemene cellen plaats met membraangebonden receptoren of expressie markers onderliggende continu membraan ¹⁷ pendelen.