Поведенческие тестирование является золотым стандартом для определения результатов лечения после травмы головного мозга, и может определить наличие пороков развития у младенцев и детей. Неврологические рефлексы являются ранним признаком этих нарушений. было разработано и описано здесь Множество легко выполнено с развитием испытаний рефлекторных в неонатальном грызуне.
Неврологические испытания рефлекса широко используются в клинической практике для оценки созревания нервной системы. Неврологические рефлексы также называют примитивными рефлексами. Они чувствительны и согласуются с более поздними результатами. Патологические рефлексы описаны как отсутствие, настойчивость, появление или латентность рефлексов, которые являются прогностическими показателями детей, которые подвержены высоким риском развития нервных системы расстройств. Модели на животных психомоторного инвалидности, таких как церебральный паралич, часто демонстрируют аномальные рефлексы развития, как можно было бы наблюдать в человеческих младенцев. Методики, описанные в оценке различных нейроразвития рефлексов у новорожденных крыс. Неврологические испытания рефлекса предлагает следователь метод тестирования, которое иначе не доступен в таких молодых животных. Методология, представленная здесь, призвано помочь исследователям в изучении этапов развития у новорожденных крыс в качестве способа обнаружения раннего начала бртравмы айн и / или определения эффективности лечебных мероприятий. Методология, представленная здесь, призвана обеспечить общее руководство для следователей.
Неврологические рефлексы, или этапы развития, являются одним из самых ранних оценок, используемых на человека новорожденных и младенцев. Неврологические рефлексы непроизвольные и повторяющиеся движения, которые демонстрируют ствол мозга и спинномозговые рефлексы мозга. Созревание высших корковых сетей, характеризующихся развивающейся миграция, миелинизацию и синаптогенез содействие добровольного контроля и корковое торможение. Изменения в нормальной прогрессии эволюции центральной нервной системы, могут нарушить развитие мозга, что приводит к аномальной корковой проводке, функционированию и миелинизации, вызывая задержки психомоторного рефлекса или пропуска. Человеческие младенцы с высоким риском развития нейросенсорной инвалидизации часто демонстрируют аномальные ранние рефлексы. Аномальные рефлексы могут представить как задержку в приобретении, отсутствии, длительное присутствие или повторное появление в более позднем возрасте, а также прогнозировать отклонения в развитии. 1, 2 Поэтому, Важно, чтобы имитировать задержки рефлекторных в экспериментальных моделях психомоторных инвалидов.
Грызуны обычно используются в качестве экспериментальных моделей. Крысы щенки птенцовые птицы при рождении, и, следовательно, слишком незрелыми, чтобы предпринять конкретные шаги или сложный двигатель, сенсорные и / или когнитивные, поведенческие задачи. В связи с этим, их незрелость развития относится как к их физическому и органному развитию. Крысы рождаются голыми с неспособностью регулировать температуру, слепы, и не в состоянии ходить. Со ссылкой на развитие головного мозга, значительное кортикальное созревание происходит послеродовом. Новорожденные крысята (день рождения называют послеродовой день 1; PD1) был предложен, чтобы достичь уровня созревания мозга, который похож на недоношенный человеческий мозг 23 – 28 недель беременности, в то время как PD7-10 щенков эквивалентны ближне- термин человеческий мозг. 3, 4, 5, 6Эта корреляция основана на грубых анатомических анализах, однако, и другие меры созревания мозга, такие как миелинизация и амплитудный интегрированный электроэнцефалограмм также были описаны. 5, 7 , например, пра-олигодендроциты являются преобладающими клетками в развивающемся человеческом мозге плода от 23 – 32 недель в утробе матери, и эта стадия созревания соответствует PD1-3 грызуну. 5, 8, 9, 10 Кроме того, миелинизация начинается в утробе матери у человека , тогда как в крысятах он появляется в переднем мозге вокруг PD7-10; новорожденный грызун мозг остается в значительной степени не-миелиновые. 11, 12 Tucker и соавт. Обнаружено, что амплитуда интегрированной модель электроэнцефалограммы из P1 крысы, чтобы быть похожей на 23-недельный GestaТион человеческий плод, в то время как PD7 и PD10 щенок сродни 30 – 32 недели и срок младенца, соответственно. 7 По этим причинам, новорожденный рефлекс тестирование у новорожденных крысят дает возможность захвата онтогенеза и / или нарушения развития мозга.
Батареи рефлексов , описанных ниже , выполнены из исследований Ум Фокс и А. Lubics 13, 14 Ум Фокс был одним из самых ранних исследователей относительно онтогенеза рефлексов у мышей. 13 Этих рефлексов , включают в себя, но не ограничиваются ими, хватанием конечности и размещением, избегание скалы, восстанавливающих, ускоренные восстанавливающих, походки, слуховой испугом, поза, и открытием глаз. Оба передних конечностей и задних конечностей схватывание (именуемые ладонной и подошвенной рук у людей, соответственно) способствует спинальных рефлексов и корково торможения от неосновных моторных зон. 15, 16 задние конечности размещения (Рефлекс Бабинского) отражает созревание корково -кишечный тракт. 16, 17, 18 избегание Клифф (защитные реакции), восстанавливающая (лабиринт), а ускоренная восстанавливающий включают интеграцию и связь между сенсорным входом и выходом двигателя (например, связанно с вибриссами и вестибулярными системами). 19, 20, 21 Походка отражает локомоции. 14 Слуховой испуг оценивает акустическую стимуляцию и синаптические связи гигантских нейронов в ядре сетчатого Pontis caudalis. 21 включает в себя соответствующие осанки / спинальные-кортикальной проекции корковых-спинальной мышечной силы, и нервно – мышечной иннервации. 22, 23 Маturation гамма – аминомасляной кислоты рецепторов может коррелировать с открытием глаз. 24 Важно иметь в виду , что рефлексы отражают гораздо более сложную сеть, представленная здесь , общая корреляция. Кроме того, эти рефлексы обеспечивают быстрый и легкий метод оценки неврологического развития в очень раннем возрасте, где более сложный поведенческий анализ не представляется возможным.
Целью данной статьи является предоставление общих рекомендаций для психомоторного тестирования рефлекса, который может быть легко включен в экспериментальные неонатальные исследования на крысах. Методология, описанная была проведена в Лонг-Эванс щенков у новорожденных крыс и количественная оценка результатов была основана на первый день появления. День, что рефлекс тестирование инициируется и оборудования используются могут быть изменены, чтобы лучше соответствовать другой экспериментальной модели (например, для различных штаммов и видов). Устанавливая нормальную физиологическую прогрессию рефаLex созревания в конкретной модели на животных, исследователи могут оценить влияние внешних факторов стресса, эндогенных манипуляций и / или терапевтических вмешательств на развитие нервной системы у новорожденных крыс моделей. В целом, использование рефлексов как определение зрелости мозга является предпочтительным в прогнозировании перинатальной травмы головного мозга, и является отражением более поздних психомоторных результатов.
Неврологическое тестирование рефлекса является прогностическим показателем ненормального коркового развития и созревания, которые могут иметь значение при обстоятельствах, когда откровенная невропатология не является очевидной. При психомоторном тестировании, важно, чтобы убедит…
The authors have nothing to disclose.
Авторы хотели бы поблагодарить наши финансирующие учреждения, которые включают в себя NeuroDevNet (национальные центры передового опыта), то АЛВА фонд, Женские и научно-исследовательский институт охраны здоровья детей и Университет Альберты.
Breeding | |||
Transfer pipettes | Fisherbrand | 12-711-9AM | Used for vaginal flushes. |
Sterile Saline | Hospira | 7983254 | The solution used to collect cells during vaginal flushes. |
400 µl Microcentrifuge tubes | Fisherbrand | 05-408-120 | Used to hold the saline solution. |
Light microscope | Leica | Leica ATC 2000 | For observation of the saline solution. Can be any light microscope used in the lab. |
Slides | Fisherbrand | 12-552-5 | The saline solution is placed on the slide. Can be any slides used in the lab. |
Coverslips | Fisherbrand | 12-545-F | To coverslip the slides. Can use any coverslips used in the lab. |
Dietary Supplementation | |||
Broccoli Sprouts seeds | Mumm's Sprouting Seeds | Broccoli sprouts seeds are ordered and grown in the lab. | |
Countertop Seed Sprouter Box | Mumm's Sprouting Seeds | A box is used to germinate and grow the seeds prior to harvest. | |
250 mL beaker | The beaker is used to soak the seed. Any size beaker that would fit can be used. | ||
Maternal Inflammation | |||
Lipoplysaccharide (LPS) | Sigma | L3129 | The endotoxin used to mimic maternal inflammation. |
1 mL Syringe | BD Syringe | 309659 | Used to inject the pregnant rat. |
Gauge (30G X 1/2) | BD PrecisionGlide Needle | 305106 | Use the smallest needle to avoid pain and discomfort. |
Sterile Saline (0.9% Sodium Chloride, USP) | Hospira | Saline is used to dissolve LPS. | |
Weights | |||
Scale | Denver Instrument | For recording the weights. Can be any scale with 2 decimal places used in the lab. | |
Neurodevelopmental Reflexes | |||
Thin blunt rod | Can be a paperclip or toothpick. This is for forelimb and hindlimb grasping. | ||
Round filter paper | Whatman | 1001 150 | 15 cm diameter paper used for gait analysis. |
Timer | Fisher Scientific | 06-662-51 | For timing the time allocated to righting and gait. |
Blunt surface | Can be an edge of a table. This is for hindlimb placing and cliff avoidance. | ||
Foam landing | For when the pups perform accelerated righting. | ||
Video recorder | Sony | VCT-D580RM | To record all reflexes tested. Must be able to record at 1/1000 fps |
Bell | For auditory startle. | ||
Heat lamp or pad | To maintain the body temperature of the pups underoing examination. |