抗ウイルス薬をスクリーニングし、宿主の免疫細胞応答を特徴づけるために、ヒトインフルエンザAウイルス感染のゼブラフィッシュモデルを使用して、

世界保健機関（WHO）によると、インフルエンザウイルスは大人5〜10％であり、毎年子どもたちの20から30までパーセントに感染し、重症の3〜5000000例の原因となり、世界中の¹ 50万人が死亡。インフルエンザに対する毎年のワクチン接種は、病気を防ぐための最良の選択肢のまま。 WHOグローバル・アクションプランのような取り組みは、季節性インフルエンザの流行²に関連する罹患率および死亡率を減少させるために、季節性ワクチンの使用、ワクチン生産能力、そしてより強力なワクチン戦略の研究開発が増加しています。ノイラミニダーゼ阻害剤（ 例えばザナミビルおよびオセルタミビル）のような抗ウイルス薬は、一部の国で利用可能であり、発症^3、4、5の最初の48時間以内に投与された場合、症状を緩和するのに有効であることが証明されています。グローバルな努力にもかかわらず、季節性インフルエンザの封じ込めのouインフルエンザウイルス抗原ドリフトは、多くの場合、ウイルス⁶の変化ゲノムに適応するために、現在の能力を超えるようtbreaksは、この時点では手ごわい課題です。ウイルスの新たな株を標的とワクチン戦略は、事前に開発されなければならない、時にはにより、最終的にインフルエンザシーズンに優勢株の種類が予期せぬ変化に最適に効果的な未満レンダリングされます。これらの理由から、感染症を含み、死亡率を減少させるための代替的な治療戦略を開発する明確な必要性が存在します。宿主-ウイルス相互作用の理解を達成することにより、新しい抗インフルエンザ薬およびアジュバント療法^7,8を開発することが可能です。

ヒト宿主-インフルエンザウイルス（IAV）の相互作用は複雑です。ヒトIAV感染のいくつかの動物モデルがINCLUD、宿主 – ウイルス相互作用への洞察を得るために開発されていますマウス、モルモット、コットンラット、ハムスター、フェレット、およびマカク⁹る。ホスト-IAVダイナミクスの理解を高めてきた重要なデータを提供しながら、各モデル生物は、ヒトの医療に調査結果を翻訳しようとしたときに考慮しなければならない重大な欠点を有しています。ヒトインフルエンザが^9を分離に感染したとき例えば、最も広く使用されているモデルであるマウスは、容易にIAV誘発性感染症の症状を発症しません。マウスは、マウスの上皮細胞ではなくヒト上皮細胞¹⁰上で発現α-2,6シアル酸結合のα-2,3シアル酸結合を発現するので、ヒトインフルエンザ自然向性単離物欠いているためです。人間IAVに存在する赤血球凝集素タンパク質は^、好意的受容体媒介性エンドサイトーシス^9、11を介してα-2,6シアル酸結合を保有する宿主細胞に結合し、入力して隔離します</s^12、13>まで。その結果、現在ではヒトインフルエンザのためのマウスモデルを開発中で、ケアは、人間の病気の側面を再現疾患の表現型を達成するために、インフルエンザの適切な株とマウスの適切な歪みをペアリングするために注意しなければならないことが認められています。対照的に、フェレットの上気道上皮細胞は、ヒト細胞^14に似^ているα-2,6シアル酸結合を有します。感染したフェレットは、ヒトおよび鳥インフルエンザウイルス^14、15の病原性と伝達率などのヒト疾患において観察された病理学的および臨床的特徴の多くを共有しています。彼らはまた、ワクチンの有効性試験に非常に適しています。それにもかかわらず、ヒトインフルエンザのためのフェレットモデルは、統計的にsignifiの取得を行い、主にそのサイズと畜産のコストに関連するいくつかの欠点があります挑戦カントデータ。また、フェレットは、以前のテストの有効性を困難にする薬剤の薬物動態、生物学的利用能、および毒性の違いを表示しています。例えば、フェレットはM2イオンチャネル阻害剤、アマンタジン¹⁶に毒性を示します。したがって、人間IAV感染症についての質問を研究するための動物モデルを選択する際に、その固有の利点と限界、および調査中であるホストウイルスの相互作用の側面を考慮することが重要であることは明らかです。

ゼブラフィッシュ、 ゼブラフィッシュ 、微生物感染を調査するためのユニークな機会を提供する動物モデルである、免疫応答をホストし、そして潜在的な薬物療法^{17、18、19、20、21、22、23、<}SUPクラス= "外部参照"> ^{24、25、26、27、28。}ゼブラフィッシュの細胞の表面上のα-2,6結合したシアル酸の存在は、感染研究で裏付けとIAV ¹⁹の蛍光レポーター株を用いてin vivoで画像化したIAV、への感受性を示唆しました。 IAV感染ゼブラフィッシュでは、抗ウイルスifnphi1とMXA転写産物の発現増加は、先天性免疫応答が刺激されたことを示し、および浮腫および組織破壊を含むIAV感染ゼブラフィッシュ、で表示される病変は、ヒトインフルエンザ感染で観察されたものと同様でした。また、IAV抗ウイルスノイラミニダーゼ阻害剤ザナミビル限られた死亡率およびゼブラフィッシュ¹⁹で減少ウイルス複製。

この報告書では、システムを開始するためのプロトコルゼブラフィッシュ胚におけるIC IAV感染について説明します。プルーフの原理として臨床的に関連する用量でザナミビルを使用して、抗ウイルス活性について化合物をスクリーニングするためのこのゼブラフィッシュIAV感染モデルの有用性が実証されます。さらに、ゼブラフィッシュ浮き袋、解剖学的に哺乳動物の肺²¹に機能的に類似であると考えられている臓器^{、29、30、31}に局在し、上皮IAV感染を発生するためのプロトコルは、記載されています。この局所的なIAV感染モデルを用いて、感染部位への好中球動員は、IAV感染および炎症における好中球生物学の役割の調査を可能に追跡することができます。これらのゼブラフィッシュモデルは、ヒトIAV感染の既存の動物モデルを補完し、小分子およびので増強の可能性の免疫細胞応答を試験するために特に有用ですtatisticalパワー、ハイスループットアッセイに中程度の能力、および光顕微鏡での免疫細胞の挙動と機能を追跡する能力。