Summary

Un metodo per la valutazione Insetticida efficacia contro Bed Bug,<em> Cimex lectularius</em>, Uova e First stadi

Published: March 15, 2017
doi:

Summary

valutazioni Insetticida sono spesso presi di mira contro gli insetti adulti, piuttosto che stadi immaturi. Qui, vi presentiamo un protocollo per la valutazione insetticidi contro le uova di bug letto con un confronto con il primo stadio bug letto ninfale. Questi protocolli possono essere regolati per altri insetti per valutare l'efficacia insetticida in fasi della vita non adulti.

Abstract

valutazioni di tossicità standard di insetticidi contro insetti nocivi sono condotte principalmente di insetti adulti. Le valutazioni sono basate su una dose-risposta o curva concentrazione-risposta, se la mortalità aumenta all'aumentare della dose o concentrazione di un insetticida è aumentato. Concentrazione standard letale (LC 50) e dose letale (LD 50) prove che si traducono nel 50% di mortalità di una popolazione di prova può essere difficile per valutare la tossicità degli insetticidi contro i non-adulti fasi di vita degli insetti, come le uova e instar presto o fasi nymphal . Tuttavia, queste informazioni sono essenziali per la comprensione di efficacia insetticida in tutte le fasi della vita di cimici, che colpisce gli sforzi di controllo e di trattamento. Questo protocollo utilizza un saggio biologico immersione standard modificato per le uova di cimici e un test di insetticida di contatto per il trattamento di nymphal primi stadi. Questi test producono una curva di concentrazione-risposta per quantificare ulteriormente LC 50 valori per le valutazioni insetticida.

Introduction

Le cimici dei letti sono un parassita urbano significativo che può causare la perdita di sangue, irritazioni della pelle, insonnia, depressione e ansia nei loro ospiti umani 1, 2, 3, 4, 5, 6. I costi di smaltimento e controllare le cimici dei letti sono alti e spesso richiedono più visite a casa da una società di controllo dei parassiti 7. visite multiple sono di solito necessari a causa del comportamento criptico di cimici e le difficoltà connesse con la loro uccisione. In particolare, le uova di cimici sono difficili da controllare a causa della loro piccola dimensione e la protezione dell'embrione dal guscio.

Attualmente, una pratica comune per molte aziende di controllo dei parassiti in tutti gli Stati Uniti è quello di trattare una casa per le cimici dei letti utilizzando un insetticida chimico. È risaputoche le uova sono difficili da controllare, così molte aziende hanno implementato un lasso di tempo di due settimane per ri-trattamenti 8. Questo permette di uova di cimici abbastanza tempo per covare, in modo che il primo stadio emergerà e presumibilmente più facile per uccidere con insetticidi. Tuttavia, vi è una carenza di studi che valutano l'efficacia degli insetticidi liquido contro le uova di bug letto e primi stadi.

uova di insetti sono stati documentati per essere il più difficile fase della vita da controllare in insetti infestanti urbani, diverso da cimici dei letti, oltre a molti parassiti agricoli. La maggior parte di queste difficoltà sono state attribuite al guscio d'uovo, mentre pochi studi hanno riportato resistenza agli insetticidi. Resistenza allo stadio di uovo è stato documentato in Triatoma infestans 9, Pediculus humanus capitis 10, Plutella xylostella 11, Rhyzopertha dominica 12, <em> Cimex lectularius 13, e più coleotteri di prodotti conservati (cioè Oryzaephilus surinamensis, Tribolium castaneum, Cryptolestes ferrugineus e Rhyzopertha dominica). 14 Lo sviluppo della resistenza nella fase di uovo e stadi immaturi, così come le complicazioni associate con la penetrazione insetticida attraverso il guscio d'uovo, richiede la necessità di test biologici insetticida efficacia contro queste fasi della vita.

Questo protocollo prevede una procedura passo-passo per determinare l'efficacia di insetticidi nell'uovo e primo stadio fase di cimici comuni, Cimex lectularius. Entrambi questi protocolli sono saggi concentrazione-risposta per consentire la quantificazione di LC 50 valori. saggi di concentrazione-risposta sono comunemente usati per studi tossicologici, ma questo protocollo è stato adattato per il trattamento facilmente gruppi di uova di bug letto e primi stadi. Questi saggi possono essere adattatiper le uova diverse specie di insetti 'e le fasi della vita immaturi.

Protocol

NOTA: Questo protocollo include due saggi insetticidi per il trattamento a parte le uova di cimici e primi stadi. Entrambi i protocolli sono stati condotti utilizzando gli stessi insetticidi, tuttavia, i protocolli dovevano essere adattati per garantire l'esposizione insetticida e di manipolare agevolmente i campioni. 1. Uovo immersione Insetticida Assay Tirare accoppiati, ben nutriti adulti cimici femminili da una colonia e posizionare le femmine (5-10) in una capsula di Petr…

Representative Results

Le uova sono stati immersi in 5 diverse concentrazioni di imidacloprid / β-ciflutrin (ul / mL). I primi stadi sono stati collocati su superfici trattate di cinque diverse concentrazioni di imidacloprid / β-ciflutrin (Figura 2). Abbiamo usato tre diverse popolazioni di C. lectularius: Harlan, Richmond, ed Epic Centro (Tabella 1). Il ceppo Harlan è suscettibile di insett…

Discussion

A critical step in this assay is to ensure that no eggs that are removed from a surface are damaged prior to the assay. Many insects cement their eggs to a substrate, therefore, a preliminary test may be needed to ensure that removal does not cause mortality. This test can be conducted with several replications of a treated group (bed bugs removed from filter paper) compared to a control group (bed bugs not removed). Similar low rates of mortality (or no mortality) between the treated and control group will ensure that …

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Ringraziamo Molly saldi per la diluizione e pesticidi assistenza formulazione. Ringraziamo anche Troy Anderson per la guida analisi probit e Zachary Adelman per l'assistenza con disegno sperimentale. Questa ricerca è stata in parte sostenuta da un premio entomologica Foundation e dai fondi borse di studio Virginia Pest Management.

Materials

Petri dishes Fisher Scientific Inc. 08-757-105 Plastic
Filter paper Whatman 1001-042
Featherweight forceps Fisher Scientific Inc. 4750
Temprid SC (imidacloprid/bifenthrin) Bayer CropScience
Transport GHP (acetamiprid/bifenthrin) FMC Corp.
Centrifuge tube 06-443-18 50 mL; flat-top threaded
Fine mesh 7250C
KimWipe 06-666A 11 cm X 21 cm
Small paint brush Any small paint brush
Hardboard panels Composite wood or tile would be sufficient from a home improvement store
Metal weights Any type of metal screw that will hold the weight of the Petri dish down onto a surface

References

  1. Sabou, M., et al. Bed bugs reproductive life cycle in the clothes of a patient suffering from Alzheimer’s disease results in iron deficiency anemia. Parasite. 20, (2013).
  2. Reinhardt, K., Kempke, D., Naylor, R. A., Siva-Jothy, M. T. Sensitivity to bites by the bedbug, Cimex lectularius. Med. Vet. Entomol. 23, 163-166 (2009).
  3. Leverkus, M., et al. Bullous allergic hypersensitivity to bed bug bites mediated by IgE against salivary nitrophorin. J. invest. entomol. 126, 91-96 (2006).
  4. Fletcher, C. L., Ardern-Jones, M. R., Hay, R. J. Widespread bullous eruption due to multiple bed bug bites. Clin. Exp. Dermatol. 27, 74-75 (2002).
  5. Pritchard, M. J., Hwang, S. W. Severe anemia from bedbugs. Can. Med. Assoc. J. 181, 287-288 (2009).
  6. Goddard, J., de Shazo, R. Psychological effects of bed bug attacks (Cimex lectularius L). Am. J. Med. 125, 101-103 (2012).
  7. Harlan, H. J. Bed bugs 101: the basics of Cimex lectularius. Am. Entomol. 52, 99-101 (2006).
  8. Pinto, L. J., Cooper, R., Kraft, S. K. . Bed Bug Handbook: The Complete Guide to Bed Bugs and Their Control. , (2007).
  9. Toloza, A. C., et al. Differential patterns of insecticide resistance in eggs and first instars of Triatoma infestans (Hemiptera: Reduviidae) from Argentina and Bolivia. J. Med. Entomol. 45, 421-426 (2008).
  10. Cueto, G. M., Zerba, E. N., Picollo, M. I. Evidence of pyrethroid resistance in eggs of Pediculus humanus capitis (Phthiraptera: Pediculidae) from Argentina. J. Med. Entomol. 45, 693-697 (2008).
  11. Ho, S. H., Goh, P. M. Deltamethrin as a potential ovicidal pyrethroid against Plutella xylostella L. Toxicol. let. 22, 161-164 (1984).
  12. Bell, C. H., Hole, B. D., Evans, P. H. The occurrence of resistance to phosphine in adult and egg stages of strains of Rhyzopertha dominica (F.)(Coleoptera: Bostrichidae). J. Stored Prod. Res. 13, 91-94 (1977).
  13. Campbell, B. E., Miller, D. M. Insecticide Resistance in Eggs and First Instars of the Bed Bug, Cimex lectularius (Hemiptera: Cimicidae). Insects. 6, 122-132 (2015).
  14. Price, L. A., Mills, K. A. The toxicity of phosphine to the immature stages of resistant and susceptible strains of some common stored product beetles, and implications for their control. J. Stored Prod. Res. 24, 51-59 (1988).
  15. Robertson, J. L., Preisler, H. K., Russel, R. M. . PoloPlus: Probit and Logit Analysis User’s Guide. , (2003).
  16. Montes, C., Cuadrillero, C., Vilella, D. Maintenance of a laboratory colony of Cimex lectularius (Hemiptera: Cimicidae) using an artificial feeding technique. J. Med. Entomol. 39, 675-679 (2002).
  17. Brogdon, W. G., McAllister, J. C. Simplification of adult mosquito bioassays through use of time-mortality determinations in glass bottles. J. Am. Mosq. Control. Assoc. 14, 159-164 (1998).
  18. Katarzyna, K., Saddler, A., Koella, J. C. Effects of age and larval nutrition on phenotypic expression of insecticide-resistance in Anopheles mosquitoes. PLoS One. 8 (3), (2013).
  19. Outram, I. Factors affecting the resistance of insect eggs to sulphuryl fluoride-II: the distribution of sulphuryl-35 S fluoride in insect eggs after fumigation. J. Stored. Prod. Res. 3, 353-358 (1967).

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Cite This Article
Campbell, B. E., Miller, D. M. A Method for Evaluating Insecticide Efficacy against Bed Bug, Cimex lectularius, Eggs and First Instars. J. Vis. Exp. (121), e55092, doi:10.3791/55092 (2017).

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