Низкая плотность первичного гиппокамп Нейрон культура

Мозг состоит из запутанных сетей нейронов. Вклад отдельных нейронов к сетевой активности и функции мозга могут быть изучены путем селективного изменения их молекулярного состава и perturbance их физиологических свойств. Генетическая и химическая обработка отдельных нейронов в культуре нейронов, возможно, легче, чем в интактной ткани мозга, обремененная клеточной гетерогенности последнего и сложности. Нейроны в культуре развиваются хорошо определенные аксонами и дендритные беседки и образуют обширные синаптические связи друг с другом.

В то время как нейрон культура от взрослых животных или из других областей нервной системы возможно, эмбриональный гиппокамп культура часто предпочтительна из – за их определенные пирамидальную популяцию клеток и относительно низкой плотность глиальной ^{1, 2.} Нейроны гиппокампа, выращенные при низкой плотности в культуре особенно AMENable к изучению внутриклеточной локализации, торговли белка, нейрональной полярности и развитие синапсов. Нейроны в культуре также широко используют в исследовании молекулярных процессов в синаптической пластичности ^{3, 4, 5, 6.} Препараты Нейрона культуры мышея с глобальными генетическими удалениями , которые не выживают послеродовым были особенно полезны при изучении клеточной и синаптической роли определенных генов ^7.

Как и в головном мозге, культивируемые нейроны гиппокампа зависят от трофической поддержки со стороны глиальных клеток. Это усложняет их культуру, и привел к разработке нескольких различных методов, с помощью которых поставляется эта поддержка. Один из часто используемый способ включает нанесение непосредственно на нейроны монослой клеток глии ^8, или позволять загрязняющие глиальные клетки от приобретенной Hippocampal ткани пролиферировать и образуют монослой под нейронах ^9. Хотя этот метод нашел некоторый успех, примесь в результате нейронного культуры является невыгодной для экспериментов с изображениями. Другим часто используемый метод нейронной культуры , чтобы оставить выход глиальных фидерного слоя в целом, и вместо того, чтобы оказывать трофическую поддержку в виде определенной среды для выращивания ^10.

Здесь мы описываем «сэндвич» или «Banker» метод нейрон культуры ^{2, 11.} Этот способ включает в себя нанесение нейронов гиппокампа на покровные стекла, которые затем подвешенных над монослой глиальных клеток, разделенных парафиновых шариков. Это облегчает долгосрочную культуру гомогенной популяции нейронов без загрязнения глии допуская при этом трофической поддержке со стороны основной глиальной монослое. Когда нейроны достаточного возраста и уровня зрелости,Нейрон покровные может быть перевернута из-глиальных блюдо и используется в визуализации или функциональных анализов.