L'étude des processus dynamiques de Nano-objets de taille dans le liquide en utilisant la transmission de microscopie électronique à balayage

Figure 2: Procédure de nettoyage des micropuces Si. (A) deux béchers sont remplis de 40 à 60 ml d'acétone et d' éthanol chacun. Micropuces (B) Le silicium sont placés dans le bécher rempli avec de l' acétone. Le côté de la membrane SiN doit faire face vers le haut. La réflexion des deux puces Si montre clairement la rainure à l'arrière de deux puces. (C) Après 2 minutes, les puces électroniques en Si sont transférés dans le deuxième bécher rempli avec de l' éthanol. Après encore 2 minutes, les puces électroniques en Si sont transférés dans un tissu de salle blanche pour le séchage. S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure. Figure 3: Flux Liquide Transmission Electron Microscopie (TEM) Holder Équipement. (A) Le liquide de support de TEM avec un tuyau d'écoulement en matière plastique et d' une seringue pour l' écoulement du liquide. (B) La pointe du liquide porteur TEM d'écoulement retiré de l'arbre de support, le couvercle du compartiment de liquide de la cellule, les joints toriques et les deux puces de silicium. Le tube fait saillie à partir du côté gauche de la pointe. (C) Le compartiment cellulaire liquide montrant un joint torique, la fente pour la mise en place de la puce. (D) Différentes pinces sur une surface sans poussière (feuille d'aluminium). (E) Le couvercle du compartiment de la cellule liquide avec ses deux joints toriques. (F) Deux puces de silicium avec des fenêtres de la membrane SiN. Gauche: l'échantillon puce sans une entretoise; droite: la puce de couverture avec un 200 um entretoise. (G) Un système de pompe microfluidique. S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figuré. 1. Préparation des micropuces 1. Nettoyage des micropuces Préparer un espace de travail avec une faible teneur en poussière dans une hotte à flux laminaire avec un filtre à particules de poussière. Nettoyer une lame de verre de microscopie optique avec un tissu fibreux et de l'éthanol pur pour le placement et le transport des puces électroniques. Placez la lame de verre sur un tissu cleanroom dans une boîte de Pétri. REMARQUE: Évitez d'utiliser l'éthanol technique en tout temps. Sélectionnez 5 puces de base (sans entretoise) pour le placement de l'échantillon et 5 puces avec une entretoise 200 nm d'épaisseur. REMARQUE: Les dimensions de la fenêtre sont de 20 x 400 um 2 et l'épaisseur SiN est de 50 nm. Comme il y a une certaine tolérance sur les dimensions, il est recommandé de vérifier les dimensions à l'aide d'un microscope optique. Utilisez des pinces revêtues de carbone pour éliminer les micro-puces dans la zone de stockage et les placer sur la lame de verre. Prenez les micropuces fermement mais soigneusement sur leur locôtés ng. Manipuler la puce de telle sorte que le côté de la membrane SiN est toujours orientée vers le haut. REMARQUE: Évitez de toucher la membrane SiN fragile sur le côté supérieur. Aussi soyez prudent avec la manipulation des puces électroniques pour éviter la fissuration de leurs arêtes vives, qui peuvent causer des problèmes dus à des particules de silicium se trouvant sur la puce ou à des fuites ultérieures. NOTE: La formation de la procédure pour éliminer les puces de la surface collante peut être effectuée sur (bon marché) micropuces factices. Placez les puces sur un tissu cleanroom dans une boîte de Pétri. Fermez le plat et le transférer à la hotte. NOTE: Les étapes impliquant l'acétone sont effectuées dans une hotte pour la sécurité chimique. Prenez deux 120 béchers en verre mL. Rincer avec de l'acétone bêcher une et l'autre avec de l'éthanol pour les nettoyer. Remplir le premier avec 40 à 60 ml d'acétone et l'autre avec 40 à 60 ml d'éthanol. NOTE: Il est important d'utiliser des liquides de qualité CLHP aussi pour cette étape dans le protocole. Transfertles micropuces dans le bécher avec de l'acétone afin d'éliminer la protection résistent couche. Déplacez doucement le bêcher à la main pour rincer efficacement les puces, mais attention à ne pas tourner les micropuces envers – voir la figure 2. Après 2 min, retirez les puces et rapidement les transférer dans le bécher avec l'éthanol. Déplacez doucement le bêcher à la main avec de l'éthanol pendant 2 min pour éliminer les résidus de la couche de réserve. Couvrir le bécher avec une feuille d'aluminium et le transférer sur le plan de travail à flux laminaire. REMARQUE: Ne pas laisser les micropuces sécher pendant le transfert afin d'éviter le dépôt de débris. Retirez les puces du bêcher et les placer sur un nouveau tissu cleanroom. Laissez-les sécher pendant quelques minutes et transférer les puces sur la lame de verre de microscope optique dans la boîte de Pétri. NOTE: Les micropuces humides peuvent facilement basculer autour, tourner à l'envers, ou coller à la pince à épiler lorsqu'il est libéré. Ceci peut être évité par pressionchanter les micropuces doucement sur le papier filtre et en tirant les pinces loin dans le sens horizontal. Fermez la boîte de Pétri et de transférer les puces du filtre à plasma. Placer la lame de verre avec des micro-puces dans le nettoyeur à plasma. Exécuter un programme de nettoyage de 5 minutes pour rendre la surface du nitrure de silicium et la membrane hydrophile pour éliminer les hydrocarbures. REMARQUE: les paramètres appropriés appliqués pour notre nettoyeur à plasma sont: 70 mTorr, débit de gaz de 11,5 sccm pour O 2 et de 35,0 sccm pour Ar, 50 W avant cible Fréquence Radio (RF), 5 W Plage de RF et max réfléchi RF. Tout plasma capable d'induire une charge de surface est appropriée. Mettez la lame de verre avec la puce de nouveau dans la boîte de Pétri, fermer le couvercle et le transférer au microscope optique. Examiner les puces sous un microscope optique pour des ruptures de membranes possibles ou des particules de poussière restantes. Faites attention avec les zones de la fenêtre et de vérifier les petits points indiquant arupture de la membrane. Rejeter des puces avec des membranes endommagées. Fermez la boîte de Pétri et le stocker dans le plan de travail à flux laminaire. 2. Préparation de l'échantillon sur les micro – puces Préparer une solution aqueuse AUNP (citrate stabilisé) en mélangeant de petites quantités des solutions mères contenant de 30 nm de diamètre, AuNPs citrate stabilisé à une concentration de ~ 3 M. Placez les puces sur une surface propre, collant dans une boîte de transport pour le dépôt de gouttelettes application / échantillon. Placez une goutte (1-2 pi) de la solution d'échantillon sur le côté de la membrane SiN de la puce de plasma nettoyé fraîchement (utiliser une puce sans une entretoise) et laisser la solution sécher dans l'atelier à flux laminaire. REMARQUE: Cette procédure peut être répétée afin d'augmenter la concentration de AuNPs sur la membrane SiN. Appliquer 1 pi d'eau déminéralisée à la puce électronique pour l'élimination du sel et / ou des agents tensioactifs. Au bout de 30 s, bienretirer la goutte d'eau avec du papier filtre. Laissez les micropuces sécher à l'air dans l'atelier à flux laminaire. NOTE: Un assez grand nombre de AuNPs aura adhéré à la puce et ne sera pas lavé dans de l'eau plus. Utilisez les puces d'échantillons préparés dans les 4 h, le SiN perd ses propriétés de surface hydrophiles rendus au fil du temps, ce qui peut amener le liquide à se comporter différemment au cours d'une expérience. Remarque: Se référer à la section de discussion pour plus de détails. Utilisez une boîte de transport fermé pour le stockage et le transfert des puces électroniques. 2. Préparation du titulaire de débit des liquides TEM Nettoyage du porte-TEM d'écoulement de liquide Nettoyez tous les outils (pinces et un tournevis) qui seront en contact avec des parties de vide utilisant l'acétone et d'éthanol dans un bain à ultrasons et les placer sur la surface libre de poussière fournie par un nouveau morceau de papier d'aluminium placé sur le banc de travail. Travailler avec des gantspour éviter la contamination du liquide porteur TEM d'écoulement. REMARQUE: Les outils ne doivent pas être largement nettoyé si on est sûr qu'ils sont propres pour le travail avec des pièces sous vide. Les gants peuvent être évités si l'on est capable de gérer l'équipement sans toucher les parties de vide. Placer le liquide porteur TEM d'écoulement sous le microscope optique binoculaire d'une manière telle que l'extrémité du support contenant la chambre de liquide peut être observée. Voir Figure 3. Retirez le couvercle de la pointe de support et placez-le sur la surface sans poussière. NOTE: Le couvercle de titane est sensible aux rayures causées par des matériaux plus durs comme la pince à épiler. Il est recommandé d'utiliser des pinces enrobées de polymère pour les matériaux sensibles. Préparer au moins 1 à 2 ml d'eau pure (qualité HPLC). NOTE: Si l'on ne veut pas utiliser de liquide de qualité HPLC, il est recommandé de vérifier que les liquides utilisés ne contiennent pas de micro-particules qui pourraient éventuellement conduire à des sabots du système d'écoulement; filter le liquide au besoin avec un filtre micro-pores. Utiliser une seringue de verre (1 ml) pour rincer le système d'écoulement entier avec 0,5 mL d'eau pure. Il est recommandé d'utiliser un système de pompe à seringue microfluidique. Utiliser une pipette et / ou du papier filtre pour éliminer le liquide soit éjecté dans le compartiment de la cellule liquide. Testez tous les tuyaux pour l'écoulement du liquide. Sécher la pointe de support après en utilisant du papier filtre et / ou d'une pipette. Utilisez le microscope optique pour vérifier que la pointe du support est propre et sec. Si nécessaire, laver la pointe du support avec de l'eau ou de l'éthanol pour éliminer les résidus solides qui pourraient avoir été laissées par la solution séchée. Retirer les morceaux de poussière ou des restes de fibres ainsi. Retirez soigneusement ces pièces avec des pincettes, ce qui évite de rayer la surface de titane. Jetez également à l'intérieur des rainures des joints toriques et enlever les restes de liquide avec un petit morceau de tissu cleanroom. NOTE: Si le titulaire ne devient pas propre avec cette procédure, il est recommandépour retirer la pointe du support et nettoyez-le dans de l'acétone pendant 2 min et dans l'éthanol pendant 2 minutes en utilisant un bain à ultrasons. Inspecter toutes les autres parties de la pointe (joints toriques, le couvercle et les vis) sous le microscope optique et enlever la poussière, fibres, etc … REMARQUE: De temps en temps, de petits morceaux provenant des vis ou des micropuces Si doivent être supprimés. Si nécessaire, nettoyez brièvement les parties à vide avec de l'éthanol de qualité HPLC. Le couvercle et les vis peuvent être nettoyés à l'aide d'ultrasons, comme expliqué pour la pointe. Évitez de placer les joints toriques fréquemment dans de l'éthanol, car il peut faire les joints toriques fragiles au fil du temps, diminuant leur étanchéité au vide. Le système fonctionne sans graisse à vide, mais si des problèmes d'étanchéité se produisent, la graisse à vide peut être utilisé. Réinsérer les joints toriques dans les rainures respectives du support et vérifier qu'ils correspondent et ne dépassent pas sur un côté de la gorge. Gardez le support de TEM d'écoulement de liquide exempt de poussière jusqu'à ce que le chargement des échantillons (par exemple., En le recouvrant d' une feuille d'aluminium). Assemblage du support de TEM d'écoulement de liquide REMARQUE: La procédure suivante décrit la procédure de chargement de puces dans un porte-échantillon avec une orientation optimale pour STEM. Dans cette configuration, la puce de base avec l'échantillon sera supérieure de la puce une fois transférée dans le microscope. Voir la figure 4. TEM, la résolution spatiale la plus élevée est obtenue au fond de la cellule liquide par rapport à un faisceau d'électrons vers le bas de déplacement. Ainsi, les puces seraient montés dans l'autre sens. Utilisez des pinces incurvées pour saisir l'échantillon puce sur le côté long et le placer dans la fente (poche) dans la pointe du liquide porte-TEM d'écoulement. Gardez le côté de SiN vers le haut. Vérifier le placement correct de la puce dans la fente à l'aide d'un microscope optique binoculaire. NOTE: Si le joint torique en dessous de la puce est pas correctement placé, la puce peut dépasser felon la fente. Placer une goutte de 0,3 ul du liquide filtré pour l'expérience sur la puce électronique de l'échantillon à l'aide d'une micropipette. Si nécessaire, fixer la puce en place avec des pincettes, car les forces capillaires de la gouttelette peut tirer la puce de sa poche. Utilisez des pinces à l'envers incurvées vers le bas pour prendre la deuxième puce (avec la couche d'espacement). Tourner avec précaution la puce à l'envers. Placez l'entretoise micropuce sur la puce de base dans la fente. NOTE: Cette procédure doit être fait suffisamment rapidement pour éviter le séchage de la gouttelette sur l'échantillon micropuce. Inspectez le placement correct en utilisant un microscope optique binoculaire tout en se déplaçant d'une pièce de matériau réfléchissant la lumière en dessous de la pointe du porte-échantillon. Les deux puces électroniques doivent être alignées exactement parallèle à obtenir le meilleur chevauchement des fenêtres SiN. NOTE: Dans le cas où les fenêtres ne se chevauchent pas, les puces peut être repositionné en poussant sur un côté avec une pointe dela pince à épiler, mais éviter de déplacer les puces trop, car la membrane SiN peut être facilement endommagés. Certaines puces électroniques sont équipées d'une configuration croisée (la fenêtre d'une puce électronique est perpendiculaire à la fenêtre dans l'autre puce électronique); Cette configuration facilite l'alignement des deux puces électroniques encore réduit également le champ de vision du microscope électronique. Prenez la face avant du couvercle de la chambre de l'échantillon avec la pince à épiler et tourner à l'envers. Sans toucher les puces, placez le côté arrière du couvercle sur la pointe. Ouvrez lentement la pince à épiler de façon à ce que le couvercle repose uniquement sur la branche inférieure de la pince à épiler. Abaisser avec précaution le couvercle jusqu'à ce qu'il repose sur les deux puces. Retirer la pince à épiler. Vérifier l'alignement des fenêtres des deux puces. Si nécessaire, retirez le couvercle, ajuster le positionnement des puces, et positionner le couvercle à nouveau. Placez les vis et les fixer dans leurs lieux habituels. Vérifiez l'alignement des deux fenêtres. jef nécessaire, retirez les vis et ajustez les micropuces. REMARQUE: Ne pas fixer les vis trop fort, car cela pourrait causer des dommages. Un joint étanche au vide est obtenue lorsque les vis vient serrer. Vérifier l'étanchéité en entamant un écoulement de liquide à travers le système en utilisant un débit de 4 ul / min. Si aucune fuite est observée de chaque côté de la pointe, cela est une bonne indication de l'étanchéité sous vide. Transférer le support à la station de pompe à vide et vérifier l'étanchéité sous vide. Le niveau de vide devrait atteindre au moins 10 -5 mbar à 5 min de pompage. NOTE: Il est recommandé de tester la station de pompage avec un support factice avant utilisation. Transférer le support au microscope électronique dans son enceinte pour l'empêcher de collecte de la poussière. NOTE: Chaque porteur commercial est livré avec une enceinte. 3. STEM d'un spécimen en liquide Réglage du microscope électronique pour STEM </strong> NOTE: Le fonctionnement du microscope électronique décrit dans ce protocole est basé sur des procédures standard qui peuvent être trouvés dans le manuel utilisateur. Le protocole décrit les détails requis au-delà des procédures standard pour l'acquisition de données sur des échantillons liquides. Démarrez le microscope avec mode STEM aligné. Dans le porte-échantillon, insérer un échantillon d'essai constitué d'un film mince de carbone avec AuNPs. Réglez les paramètres du microscope STEM comme suit: régler le courant de la sonde à 0,18 nA et la convergence semi-angle du faisceau d'électrons à 20 mrad en sélectionnant une taille de point de 4C et l'ouverture de l'objectif de 30 um. Sélectionnez une longueur de l'appareil photo de 8 cm. Prenez note de la densité de courant indiquée mesurée à l'écran de fluorescence tandis que le détecteur ADF est inséré. Retirer le porte-échantillon. REMARQUE: Cette valeur actuelle est nécessaire par la suite pour estimer l'épaisseur du liquide. Démarrez le flux de liquide avec de l'eau pure. Ne pas dépasser un débit de 2ul / min. Introduire le liquide porteur TEM d'écoulement dans le microscope électronique, et commencer l'évacuation. Vérifier à la fois l'indication du vide de la chambre à vide préliminaire et la durée de l'évacuation. Si le niveau de vide est standard et la durée de la procédure de pompage ne dépasse pas la durée normale d'évacuation (environ 1 min) par un facteur de deux, à insérer le support. Ouvrez la vanne de faisceau lorsque le vide de la chambre d'échantillon principal est dans la plage qui permet son ouverture. Insérez le détecteur ADF en appuyant sur le bouton de l'AAD. NOTE: Ce protocole se réfère à un détecteur de AAD positionné au-dessus de l'écran de substance fluorescente du microscope électronique. Régler le microscope dans le mode d'acquisition d'image continue en utilisant une taille d'image de 512 x 512 pixels, un temps de séjour de pixels de 2 ms et un grossissement de 20.000. Rechercher la fenêtre SiN en traduisant la scène dans les directions x et y. REMARQUE: Les puces électroniques bloquent tous les électrons passant à travers l'échantillon vers le détecterou; signal est seulement visible à l'emplacement du SiN. Voir Figure 5. Parfois, il est plus facile de trouver la fenêtre SiN en regardant l'écran de fluorescence. Une fois que la fenêtre a été trouvée, régler les paramètres de luminosité et de contraste (en utilisant les boutons respectifs), de sorte que le bord de la fenêtre devient visible. Déplacez le bord vers le milieu du champ de vue en appuyant sur les axes x et y traduction boutons de la platine. Appuyez sur le bouton de remise à zéro de l'objectif. REMARQUE: La luminosité doit être largement réduite par rapport à un échantillon sous vide en raison de la forte dispersion dans le liquide. Passez en se concentrant grossière l'angle aigu sur le bord de la fenêtre SiN en ajustant la position verticale (z-translation) de l'étage de l'échantillon. Vérifiez que la position de l'échantillon est à la hauteur eucentrique en faisant tourner la scène de 5 ° et tournant le dos. Caractéristiques de l'échantillon et le coin de la fenêtre SiN ne doivent pas passer à de faibles grossissements. <br/> NOTE: Fermez la vanne de faisceau sinon le fonctionnement du microscope, depuis la numérisation à la même position pour un temps plus long peut entraîner des dommages de l'échantillon et la formation de bulles Réajuster la position verticale selon le besoin de placer le bord de la fenêtre au milieu de la zone de visualisation à nouveau. Conserver la position de la scène à l'aide du bouton d'enregistrement du logiciel. Se déplacer vers une position dans laquelle les petits morceaux de débris ou autres objets de contraste élevé (par exemple AuNPs) sont présents en traduisant la scène dans les directions x et y. Réglez la mise au point de l'objectif afin que tous les objets apparaissent forte au point. Prenez note de la densité de courant mesurée à l'écran luminescent visible via le logiciel d'exploitation, ce qui indique le courant transmis par le support liquide et à travers l'ouverture du détecteur ADF. Calculer l'épaisseur de la cellule liquide en utilisant l'équation 1. Procéder que si l'épaisseur du liquide a été déterminée et ne dépasse pas 3 um. <br /> Remarque: L'épaisseur de la cellule liquide peut être déterminée par le rapport de la densité de courant mesurée avec et sans l'échantillon en utilisant l'équation 14 suivante L'équation 1 avec t SiN l'épaisseur de la membrane de nitrure de silicium amorphe et de l' eau t l'épaisseur de la couche d'eau. Le libre parcours moyen des longueurs de montant à l SiN = 0,79 um de SiN, = et l eau = 3,0 um d'eau pour l'ouverture semi-angle de 35 mrad 14 détecteur. Observez soigneusement le liquide à des grossissements inférieurs pour veiller à ce que des bulles de gaz ne sont pas présents. Les bulles de gaz peuvent être évités en utilisant le flux de liquide continu et la sonde de courant inférieure à 0. 5 nA. Traduire la scène dans les directions x et y jusqu'à une zone contenant au moins 20 AuNPs has été trouvé. Définissez la taille de l'image à 1.024 x 1.024 pixels, le temps de séjour de pixels à 19 ms, et le grossissement à 400.000. Acquérir les images de AuNPs adhéré à la membrane SiN en appuyant sur le bouton d'acquisition. NOTE: Une fois que les images ont été obtenues dans lequel les AuNPs sont visibles avec un fort contraste et des arêtes vives (voir figure 6), on peut être sûr que l'expérience est correctement mis en place. En cas de problèmes inattendus se produisent, ne pas procéder à l'expérience, mais assurez-vous de résoudre la cause. STEM de la dissolution de AuNPs Retirer le liquide porte-TEM d'écoulement du microscope et d'arrêter l'écoulement du liquide. Préparer au moins 1 ml d'une solution 0,1 M de chlorure de sodium dans de l'eau de qualité HPLC dans une seringue en verre. Ajuster le système d'écoulement à une vitesse de 20 ul / min et rincer le système d'écoulement tout avec 0,3 ml de la solution saline. Utiliser un papier filtre pour recueillir le liquide soit éjecté sur lal'autre extrémité du tube. Ensuite, re-régler le système d'écoulement à 2 pi / min. Vérifier l'intégrité de la fenêtre SiN en utilisant un microscope optique binoculaire. Si aucune fuite est observée, réintroduisez le liquide porte-TEM d'écoulement dans le microscope. Vérifiez l'indication de vide de la chambre de pré-vide et la durée de l'évacuation. Si le niveau de vide est standard et la durée de la procédure de pompage ne dépasse pas la durée normale d'évacuation (environ 1 min) par un facteur de deux, à insérer le support Déplacer l'arrière de la scène du microscope à sa position précédente en utilisant la position de la scène stockée. Régler le microscope dans le mode d'acquisition d'image continue en utilisant une taille d'image de 512 x 512 pixels, un temps de séjour de pixels de 2 ms et un grossissement de 20,000X. Réglez le contraste, la luminosité, mise au point, et la hauteur eucentrique, comme décrit dans les étapes 3.1.7-3.1.9. Trouver un emplacement d'intérêt en traduisant la scène dans les directions x et y. Définissez la taille de l'image1.024 x 1.024 pixels, le temps de séjour de pixels à 2 ms, et le grossissement à 500.000. Enregistrement d'une série d'images SOUCHES manuellement en appuyant sur le bouton d'acquisition, une fois l'image précédente a été enregistrée. NOTE: Les AuNPs commencent à se dissoudre dès que le faisceau d'électrons est balayé sur l'échantillon. Les particules en dehors de la zone irradiée ne sont pas affectées et peuvent être observées immédiatement après. L'horodatage est stocké dans l'en-tête d'image. Il est également possible d'utiliser un logiciel pour la collecte automatique d'une série d'images en un film. Démontage et nettoyage du porte-TEM après l'expérience Lorsque les expériences de TEM en phase liquide sont terminés et le support est rétracté du microscope électronique, nettoyer le tube, la chambre de liquide, et ses composants afin d'éliminer les particules solides ou le reste du sel qui pourraient influer sur les futures expériences. Desserrez la vis arrière légèrement de sorte qu'il est toujours fixédans son logement, mais le couvercle peut être enlevé facilement. Desserrez la vis avant, retirez-le, et le placer dans un environnement exempt de poussière. Retirez le couvercle et le placer dans un environnement exempt de poussière pour le stockage. Retirez les deux puces de la poche. Les séparer en les plongeant soigneusement dans l'eau ou dans la solution restante de l'expérience. Placez les puces sur du papier de soie avec le côté de la membrane SiN vers le haut et les laisser sécher à l'air pour une analyse ultérieure. Retirez les joints toriques et nettoyer les rainures respectives avec de l'eau de qualité HPLC. Conserver les joints toriques dans un environnement exempt de poussière. Utiliser une seringue de verre (5 ml) pour rincer tous les tuyaux (entrée et sortie), chacun avec 5 ml d'eau de qualité HPLC. Recueillir le liquide avec un petit bêcher placé au-dessous de la pointe de support de TEM. Après le rinçage, utiliser une pipette et / ou papier filtre pour éliminer le liquide restant dans le compartiment de liquide. Inspecter l'extrémité du porte-TEM et enlever les résidus comme les bords brisés de la micro de siliciumcopeaux, de fibres ou de poussières. Si le sel est encore visible, répétez la procédure de nettoyage. Remettre les joints toriques à leurs rainures. Rangez le porte-TEM et ses composantes dans un environnement exempt de poussière. Procédure alternative à 3.2: STEM de déplacer des nanoparticules d'or NOTE: Une procédure de montage différente est nécessaire pour étudier le mouvement des AuNPs dans un liquide. Omettre étape 1.2. Chargez les AuNPs sur la puce de silicium immédiatement avant de les insérer dans le support de TEM à l'étape 2.2. Conserver l'échantillon couvert par une couche de liquide en tout temps afin d'éviter un fort attachement des AuNPs à la membrane SiN. Les autres étapes du protocole sont les mêmes. Une série d'images SOUCHES est obtenue à l'étape 3.2.6. Figure 4: Montage du Titulaire de débit des liquides TEM. (A) Le compartiment cellulaire liquide avec ee plus petit joint torique placé dans sa gorge. L'encart montre la vue de dessus. (B) La puce de base est placé dans la douille correspondante. L'encart montre la vue de côté à angle tel que la puce est visible de réflexion de la lumière. (DR) Une goutte de la solution est ajoutée à la puce électronique. (EG) Mise en place de la couverture micropuce. (HI) Placement du couvercle du compartiment de la cellule liquide. (J) La fixation du couvercle au moyen des deux vis. (K) assemblé liquide porte-TEM d'écoulement. S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure. Figure 5: Positionnement initial et de mise au point en utilisant micrographies SOUCHES. (A) Pour localiser la fenêtre SiN, la scène se déplace vers les plus brillants signal. La puce de silicium est assez mince pour certains électrons de passer à travers près de la fenêtre. (B) Le bord de la fenêtre de SiN focalisée montrant quelques AuNPs apparaissant brillant sur le noir (moins de diffusion) fenêtre de membrane de SiN. Le bord de la puce est lumineuse due à la diffusion excessive. (C) La mise au point se fait à l'angle de la fenêtre SiN. Les images montrent la sous-concentrée, mise au point, et des situations trop concentré. S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.