間接ニューロン、星状細胞共培養アッセイ：<em>インビトロ</em>ニューロングリアの相互作用の詳細な調査のためのセットアップ

過去数十年間を通して、神経膠細胞機能の一般的な解釈は、神経機能^{1についての}積極的な規制の役割に向かって単に支持するの帰属から進化してきました。そのため、健康と病気²における脳の恒常性に対するその顕著な影響のため、アストロサイトは、科学界のために特別な関心があります。過去数年間において、研究の多様性は、in vivoおよびin vitro ³ニューロン-グリア相互作用に焦点を当てています。しかし、培養系のほとんどは、両方の細胞型のとそれぞれのsecretomesの独立した分析を可能にするものではありません。

いくつかのアプローチは、長期的な生存および生理学的に関連する神経回路網の開発^4-6を達成するために、ニューロンとグリアの直接共存培養を利用します。物理的に分離された⁷両方の細胞型を維持しながら、本プロトコルは、同じ目標に到達します。 conditioneに比べてD媒体は、我々のシステムは、ニューロンとアストロサイト間の双方向通信を勉強することができ^、8,9近づきます。細胞は、共有媒体に成熟さながら分泌シグナル伝達分子の発現をモニターすることができます。アストロサイトは、それによってニューロンの成長を調節する、例えば、サイトカイン、成長因子および細胞外マトリックス分子^10,11として可溶性因子を放出し^{、7,12機能}として、この機会は、特に関連性があります。したがって、 インビトロでの網膜神経節細胞のトロンボスポンジンの添加は、シナプス¹³の形成を誘導することが実証されています。しかし、他の未知の要因が^13、機能的シナプスをレンダリングするために必要です。また、星状細胞により放出された分子は、ニューロン – グリア相互作用の基礎を理解するために識別されなければなりません。

マウスおよびラットからの一次ニューロンとアストロサイトの栽培は、以前に^14から16に記載されています。ここで間接共培養法で両方の細胞型を結合するエレガントで汎用性の高いツールを提示します。二つの文化は、物理的に同じ媒体を共有まだ分離されているため、ニューロン、星状細胞および可溶性分子の影響は、別々に、したがって神経グリア相互作用研究のための強力なツールを作成し、分析することができます。