リンパ腺や血球中を調べるための方法<em>ショウジョウバエ</em>幼虫

血液疾患における造血系の開発とその誤動作の座標転写因子およびシグナル伝達経路を調節する複雑なメカニズムはよくわかっていないままです。これらの転写因子およびシグナル伝達経路、ならびにそれらの調節は、非常にショウジョウバエおよび哺乳動物の造血^1~5の間で保存されています。したがってショウジョウバエ造血系は、造血及び下地血液疾患を制御する分子機構を定義するための優れた遺伝的モデルを表します。

哺乳類と同様に、 ショウジョウバエは、造血の空間的および時間的に別個の相では、血球と呼ばれる、血液細胞を生成します。伝統的に、 ショウジョウバエの造血は、胚中胚葉にし、幼虫のリンパ腺に段階に限定されると考えられていました。最近の研究は、造血はまた、幼虫の無茎性のCLUで発生するという証拠を提供しますstersと^6-8腹部大人インチplasmatocytesと液晶セル：すべての造血相は、成熟血球の2種類を生成します。 Plasmatocytesは食作用、先天性免疫、および創傷治癒に関与するマクロファージ様細胞です。クリスタル細胞がメラニン化のために必要なプロphenoloxidases、昆虫の免疫応答および創傷治癒に使用される反応が含まれています。幼虫の造血は、このような寄生蜂感染^9,10などの特定の免疫の課題に応じて、lamellocyteと呼ばれる第三の成熟した血球タイプを、生成することができます。 Lamellocytesは、 ショウジョウバエの幼虫に敷設されたスズメバチの卵をカプセル化し、中和するために、plasmatocytesと液晶セルと組み合わせて、機能大、接着細胞です。寄生虫感染の非存在下で、lamellocytes野生型幼虫では見られません。メラニン質量はメラニン、カプセル化されたスズメバチの卵に似ています。多くの変異体ショウジョウバエ株は、寄生虫感染の非存在下での黒色腫瘤を開発します。 lamelloの存在球および/またはメラニンの塊は、造血異常を示すことができます。実際には、黒色質量表現型は、造血^11-14に関与する遺伝子および経路を同定するために使用されています。

幼虫の造血系は、最も広く今日までに研究されています。それは、血リンパ中を循環血球、キューティクルの下にパターン化さ固着血球クラスター、およびリンパ腺に存在する血球から構成されています。リンパ腺は背容器に取り付けられた二国間のローブのシリーズです。リンパ腺の各一次ローブは、3つの主要な領域に分割されます。最も外側のゾーンは、皮質ゾーンとして知られており、成熟血球が含まれます。最も内側のゾーンは、髄質ゾーンと呼ばれ、静止血球前駆体から構成されています。第三ゾーン、後部のシグナリングセンターでは、幹細胞様ニッチとして機能リンパ腺の基部にある細胞の小グループです。初期の研究は、Notch ^15-18のための重要な機能を確立しました</suP>、ヘッジホッグ^{19,20、JAK-STAT 18、}および無翅²¹の活動は、幼虫のリンパ腺の開発を規制します。より最近の研究は、BMP ^{22、FGF-RAS 23、}およびカバ^24,25シグナリングはまた幼虫のリンパ腺内で機能することを実証しました。

ここで説明四幼虫造血アッセイ1を説明する）3） インビボでの液晶セルを可視化する、2）免疫組織化学のために循環血球を単離し、固定し、単位体積あたりの細胞数として定義血球濃度が、循環、及び4）、解剖固定、実装測定免疫組織化学のための腺リンパ。これらのアッセイは、幼虫の造血系内シグナル伝達経路の機能および規則を評価するために、造血読み出しとして使用することができます。これらのメソッドは、フィールドで以前に使用されてきたが、これらのアッセイの視覚的なドキュメントは、ごく最近^8,26-30を開始^しました。ここで引用したいくつかの刊行物は、ヘルプです同様の方法および造血マーカー^26,31-33を説明FUL資源。さらに、TROLとバイキングは、リンパ腺の基底膜の有用なマーカーです。