Мы описываем быстрый, молекулярный основе гриппа A и B анализа. Гриппа тест определяет каждую мишень в течение 15 мин с использованием изотермического амплификации с гриппом специфических праймеров с последующим обнаружения цели с зондами молекулярных радиомаяка. И В анализе гриппа А удобно и требует минимальных практического времени для выполнения.
Грипп является респираторное заболевание, вызываемое вирусами гриппа А и В в организме человека и вызывает значительное количество заболеваемости и смертности ежегодно. Гриппа A и B для анализа был первый тест молекулярного быстрого гриппа ОРСУ-отказ от имеющихся. Испытание гриппа A и B работает с использованием изотермического амплификации с гриппом специфических праймеров с последующим обнаружения цели с зондами молекулярных радиомаяка. При этом производительность гриппа A и B для анализа на замороженное, архивируются носоглотки тампон (NPS) образцов, хранящийся в вирусной транспортной среде (VTM) сравнивали с анализом респираторного панели.
Производительность А и В анализе гриппа оценивали путем сравнения результатов с эталонной панели методом респираторной. Чувствительность к общей вируса гриппа А составила 67,5% (95% ДИ (ДИ), 56.6-78.5) и специфичность 86,9% (CI, 71.0-100). Для тестирования вируса гриппа B, чувствительность и специфичность составили 90,2% (ДИ 68.5-100) И 98,8% (ДИ 68.5-100), соответственно.
Эта система имеет преимущество значительно более короткого времени испытания, чем любой другой доступный в настоящее время молекулярного анализа и простой, пипеткой свободной процедуры работает на полностью интегрированной, закрытая, система малой площади. В целом, гриппа A и B оценивали анализ в данном исследовании, имеет потенциал, чтобы служить в качестве диагностического теста быстрого гриппа точки оказания медицинской помощи.
Вирус гриппа инфекции приводят к значительному количеству заболеваемости и смертности каждый год 1, 2, 3. Несложный гриппа характеризуется конституционными и респираторные симптомы , такие как лихорадка, миалгии, головная боль и непродуктивный кашель 4, 5. Люди старшего возраста, детей младшего возраста, пациентов с ослабленным иммунитетом, а также у пациентов с сопутствующими заболеваниями , лежащих в основе находятся на более высоком риске для серьезных осложнений , таких как пневмония, миокардит, заболевания центральной нервной системы, или смерти 6, 7.
Инфекция гриппа является уникальным от других респираторных вирусов в том , что быстрое введения противовирусной терапии в течение 48 часов после появления симптомов может уменьшить тяжесть заболевания и длину 8. Быстрая идентификация гриппа также былапоказано , чтобы уменьшить использование ненужных антибиотиков 9, 10. Кроме того, госпитализированных пациентов с инфекцией гриппа должны быть размещены в изолированных помещениях с соответствующими мер инфекционного контроля. Тем не менее, респираторные заболевания, вызванные вирусами гриппа, не может быть трудно клинически отличить от гриппа. По этой причине, быстрого и точного диагностического тестирования на грипп является очень важным для клинического лечения пациента.
Некоторые анализы доступны для обнаружения и идентификации вирусов гриппа. Экспресс – тесты для выявления антигенов гриппа (RIDTs) широко используются в клинической практике в качестве точки оказания медицинской помощи тестов , потому что они просты в использовании и обеспечивают результаты в течение от 15 до 30 мин 11, 12; Тем не менее, их чувствительность широко (10-80%) в зависимости от производителя и населения испытывается различаются, и типа гриппа и subtyре 13, 14, 15. Прямые анализы флуоресценции (ДКА) обеспечивают превосходные чувствительность над RIDTs, но время обработки больше (~ 3 ч) и должны быть завершены квалифицированными технологами 16, 17. Вирусная культура была золотым стандартом для диагностики гриппа и улучшилась чувствительность в отношении обоих RIDTs и ДКА 18. Тем не менее, грипп вирусная культура может занять от 2-14 г до завершения, уменьшая его полезность в помощи лечения пациента 19. И, наконец, тесты амплификации нуклеиновых кислот (NAAT) заменили методы культуры в качестве нового золотого стандарта в диагностике гриппа. NAAT считаются имеющими наибольшую чувствительность для обнаружения гриппа в течение нескольких часов. Однако NAAT самые дорогие анализы и требуют специализированного оборудования и технологов для выполнения 5 <sвверх>, 20, 21, 22, 23, 24, 25.
Анализ гриппа А и В, описанный здесь первый ОРСУ-отказ от молекулярного экспресс-тест гриппа, который легко доступен. Этот анализ работает с использованием реакция перекреста Эндонуклеаза Amplification (Near), который использует изотермический амплификации с гриппом специфических праймеров с последующим обнаружения цели с зондами молекулярных радиомаяка. Этот анализ отличает гриппа A от B, требуется 2 минуты, чтобы установить и обработать один образец, и требует в общей сложности 15 минут, чтобы закончить.
Здесь мы представляем протокол для анализа гриппа A & B. Кроме того, мы предлагаем образец набора данных сравнения характеристик вируса гриппа A и B анализа на архивизированных носоглотки тампон (NPS) экземпляры хранятся в вирусной транспортной среде (VTМ) к другому респираторного анализа возбудитель панели.
Вирусы гриппа значительные мировые причины заболеваемости и смертности. Быстрый и точный диагноз гриппа является одним из основных ключей к управлению во время вспышки гриппа респираторного сезона. Другие тесты антиген на основе являются быстрым и легким для выполнения; Тем не менее,…
The authors have nothing to disclose.
We thank the Clinical Microbiology Service staff of the Memorial Sloan-Kettering Cancer Center for help in collecting clinical specimens. This study was supported in part by a research agreement between MSKCC and Alere Scarborough (SK2013-0262).
Alere i Instrument | Alere | NAT-000 (Global), NAT-024 (US) | |
Alere i Influenza A & B 24 Test Kit | Alere | 425-000 (Global), 425-024 (US) | |
Alere i Barcode Scanner | Alere | EQ001001 | |
Alere Universal Printer | Alere | 55115 (Global), alereiprinter (US) | |
200 µL precision pipette | |||
200 µL disposable pipette tips | |||
Viral transport medium | Remel | M4-RT |