سرعة الكشف الجزيئي والتمايز من فيروسات الأنفلونزا A و B

عدوى فيروس الانفلونزا تؤدي إلى قدر كبير من معدلات الاعتلال والوفيات كل عام ^{1، 2، 3.} يتميز الانفلونزا غير معقدة أعراض الدستورية والجهاز التنفسي مثل الحمى، وألم عضلي، صداع، وسعال غير منتج ^{4 و 5.} الأفراد الأكبر سنا، والأطفال الصغار، والمرضى الذين يعانون من نقص المناعة، والمرضى الذين يعانون من أمراض المصاحبة الأساسية هي في خطر أعلى للمضاعفات خطيرة مثل الالتهاب الرئوي، والتهاب عضلة القلب، وأمراض الجهاز العصبي المركزي، أو وفاة ^{6 و 7.}

عدوى الإنفلونزا هي فريدة من نوعها من الفيروسات التنفسية الأخرى في أن الإدارة سريعة من العلاج المضاد للفيروسات خلال 48 ساعة من ظهور الأعراض يمكن أن تقلل من شدة المرض وطول ^8. وقد تم التعرف السريع على الانفلونزا أيضاتبين للحد من استخدام المضادات الحيوية غير الضرورية ^{9 و 10.} وعلاوة على ذلك، والمرضى في المستشفى مع عدوى الإنفلونزا يجب أن توضع في غرف معزولة مع الاحتياطات المناسبة لمكافحة العدوى. ومع ذلك، أمراض الجهاز التنفسي التي تسببها الفيروسات غير الأنفلونزا يمكن أن يكون من الصعب التمييز سريريا من الأنفلونزا. لهذا السبب، اختبار سريع ودقيق التشخيص للأنفلونزا مهم جدا لإدارة المريض السريرية.

تتوفر للكشف وتحديد فيروسات الأنفلونزا عدة فحوصات. وتستخدم السريع مستضد أنفلونزا اختبارات الكشف (RIDTs) على نطاق واسع في الممارسة السريرية كنقطة من الرعاية الاختبارات لأنها سهلة الاستخدام وتوفير النتائج في غضون 15 إلى 30 دقيقة ^{11، 12؛} ومع ذلك، حساسيتهم تختلف على نطاق واسع (10-80٪) اعتمادا على الشركة المصنعة والسكان التي يجري اختبارها، ونوع الإنفلونزا، وsubtyبي ^{13 و 14 و 15.} المقايسات مضان المباشرة (DFAS) توفر الحساسيات متفوقة على RIDTs، ولكن في وقت المعالجة هو أكبر (~ 3 ساعة)، ويجب أن تستكمل من قبل التقنيين المهرة ^{16، 17.} وكانت ثقافة الفيروسية المعيار الذهبي لتشخيص الإنفلونزا، وتحسنت حساسية على كل RIDTs وDFAS ^18. ومع ذلك، يمكن أنفلونزا ثقافة الفيروسية تتخذ في أي مكان 2-14 د لاستكمال، وتناقص فائدتها في مساعدة إدارة المريض ^19. وأخيرا، النووية اختبارات حمض التضخيم (NAAT) قد حلت محل تقنيات الثقافة باعتبارها المعيار الذهبي الجديد في تشخيص الأنفلونزا. تعتبر NAAT ليكون لها أكبر حساسية للكشف عن انفلونزا في غضون ساعات قليلة. ومع ذلك، NAAT هي فحوصات أغلى وتتطلب معدات متخصصة وخبراء التكنولوجيا لأداء ⁵ <sتصل>، ^{20، 21، 22، 23، 24، 25.}

الأنفلونزا A و B فحص الموصوفة هنا هو أول الجزيئي اختبار انفلونزا السريع-التنازل عن CLIA ما هو متاح بسهولة. هذا الاختبار يعمل من خلال توظيف رد الفعل الخدش نوكلياز داخلية التضخيم (قرب) الذي يستخدم التضخيم متساوي مع الاشعال مخصصة للانفلونزا تليها الكشف عن الهدف مع تحقيقات منارة الجزيئية. هذا الاختبار يميز الأنفلونزا A من B، يتطلب 2 دقيقة لإعداد وتجهيز عينة واحدة، ويتطلب ما مجموعه 15 دقيقة لإكمال.

هنا، نقدم بروتوكول لفحص الأنفلونزا A & B. وبالإضافة إلى ذلك، فإننا نقدم بيانات العينة وضع مقارنة أداء الأنفلونزا A و B فحص على مسحة البلعوم المحفوظة (NPS) الأصناف المدرجة المخزنة في المتوسط ​​النقل الفيروسي (VTM) إلى الجهاز التنفسي فحص لوحة آخر الممرض.