Here, we demonstrate a simple production method for size-controllable, monodisperse, water-in-oil (W/O) microdroplets using a capillary-based centrifugal microfluidic device. This method requires only a small sample volume and enables high-yield production. We expect this method will be useful for rapid biochemical and cellular analyses.
הנה, אנחנו מדגימים שיטה פשוטה לייצור המהיר של microdroplets גודל לשליטה, monodisperse, W / O באמצעות מכשיר microfluidic צנטריפוגלי מבוסס נימים. W / O microdroplets שימשו לאחרונה שיטות רבות עוצמה המאפשרים מיניאטורי ניסויים כימיים. לכן, מפתחים שיטה צדדי כדי להניב monodisperse W / O microdroplets נדרשת. פתחנו שיטה להפקה monodisperse W / O microdroplets מבוסס על מכשיר microfluidic זורם-שיתוף axisymmetric צנטריפוגלי מבוסס נימים. אנחנו הצלחנו להשליט את מרותה גודל microdroplets ידי התאמת פתח הנימים. השיטה שלנו דורש ציוד כי הוא קל יותר לשימוש מאשר עם טכניקות microfluidic אחרות, דורש נפח קטן בלבד (0.1-1 μl) של הפתרון מדגם אנקפסולציה, ומאפשרת ייצור של מאות אלפי מספר microdroplets W / O בשנייה . אנו מצפים בשיטה זו יסייעו מחקרים ביולוגיים הדורשים s הביולוגי היקרamples ידי שמירה על נפח של דגימות ביוכימיים ניתוח כמותי מהיר מחקרים ביולוגיים.
W / O microdroplets 1-5 יש יישומים חשובים רבים לחקר הביוכימיה Bioengineering, כולל חלבון סינתזה 6, חלבון התגבשות 7, תחליב PCR 8,9, תא אנקפסולציה 10, ובניית מערכות דמוי תא מלאכותי 5,6. כדי לייצר W / O microdroplets עבור יישומים אלה, הקריטריונים החשובים הם השליטה של גודל monodispersibility של microdroplets W / O. המכשירים microfluidic להכנת monodisperse, גודל לשליטה W / O 11 microdroplets מבוססים על שיטת השיתוף זורם 12,13, שיטת התמקדות זרימת 14,15, ושיטת הצומת הטה 16 ב microchannels. למרות ששיטות אלה לייצר microdroplets monodisperse מאוד W / O, תהליך microfabrication דורש טיפול מסובך טכניקות מיוחדות להכנת microchannels, וגם דורש כמות גדולה של פתרון המדגם (לפחות כמה מאות81; יב) בגלל נפח מת בלתי נמנעת משאבות מזרק וצינורות העורכים הפתרון מדגם microchannels. לפיכך, שיטה קלה לשימוש נמוך מת בנפח ליצור monodisperse W / O microdroplets נדרשת.
מאמר זה, יחד עם קטעי וידאו של פרוצדורות, מתאר מכשיר microfluidic צנטריפוגלי נימים מבוססות axisymmetric זורם-שיתוף 17 להפקה תאים בגודל, monodisperse W / O microdroplets (איור 1). שיטה פשוטה זו משיגה גודל monodispersity ויכולת בקרת גודל. זה דורש רק מינים-בצנטריפוגה שולחן לבין מכשיר microfluidic זורם-שיתוף axisymmetric מבוסס נימים קבועות בבית microtube דגימה. השיטה שלנו צריך רק נפח קטן מאוד (0.1 μl), ואינו לבזבז נפח משמעותי של המדגם.
שימוש במכשיר זה, monodisperse W / O microdroplets נוצר על ידי אי יציבות פליטו ריילי של זרימת סילון 17. בדיקה מיקרוסקופית לא לגלות את נוכחותם של טיפות בלוויין. בייצור של המכשיר, שלושה שלבים קריטיים חיוניים כדי ליצור microdroplets monodisperse בהצלחה W / O. ראשית, לספק זרם ישר של פעילי שטח המכיל…
The authors have nothing to disclose.
This work was supported by the PRESTO “Design and Control of Cellular Functions” research area of the Japan Science and Technology Agency (JST), a Grant-in-Aid for Scientific Research of Innovative Areas “Molecular Robotics” (Project No. 24104002) from the Ministry of Education, Culture, Sports, Science and Technology (MEXT), Japan, Grant-in-Aid for Young Scientists (A) (Project No. 24680033) and Scientific Research (B) (Project No. 26280097) from the Japan Society for the Promotion of Science (JSPS), and the Creative Design for Bioscience and Biotechnology course of the School of Bioscience and Biotechnology at Tokyo Tech.
2-mm-thick polyacetal plastic plate | Tool | Nikkyo Technos, Co., Ltd. (Japan) | 244-6432-08 | |
Milling machine | Tool | Roland DG Co., Ltd. (Japan) | MDX-40A | |
End Mill RSE230-0.5*2.5 | Tool | NS Tool Co., Ltd. (Japan) | 01-00644-00501 | |
M2*40 screws | Tool | Jujo Synthetic Chemistry Labo. (Japan) | 0001-024 | |
Glass Capillry Puller | Tool | Narishige (Japan) | PC-10 | |
Microforge | Tool | Narishige (Japan) | MF-900 | |
Inner Glass Capillary | Tool | Narishige (Japan) | G-1 | |
Outer Glass Capillary | Tool | World Precision Instruments Inc. (USA) | 1B200-6 | |
1.5 ml Sample tube | Tool | INA OPTIKA CO.,LTD (Japan) | ST-0150F | |
Hexadecane | Reagent | Wako Pure Chemical Industries Ltd. (Japan) | 080-03685 | |
Sorbitan monooleate (Span 80) | Reagent | Tokyo Chemical Industry Co., Ltd. (Japan) | S0060 | |
Milli Q system | Reagent | Merck Millipore Corporation (Germany) | ZRQSVP030 | |
Swinging-out-type Mini-centrifuge | Tool | Hitech Co., Ltd. (Japan) | ATT101 | |
Digital Microscope | Tool | KEYENCE Corporation (Japan) | VHX-2001 |