Tüm işlemler LSUHSC Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanan ve NIH uygun olarak yapılmıştır "laboratuvar hayvanları bakım İlkeleri." 1. Kemirgen Acclimation ve Gıda Kısıtlama Deneyin başlangıcında 3 aylık yetişkin Wistar sıçanları kullanın. Tek başına bir ters 12 saat aydınlık / karanlık döngüsünde bir ısıya ve nem kontrollü, AAALAC akredite hayvan bakım tesisi laminer akış ünitesi ve hava filtresi ile donatılmış kafeslerde Ev fareleri (0600 saatte ışıklar kapalı). 400 gr – vücut ağırlıkları yaklaşık 380 kadar serbestçe su ve standart kemirgen yemi sağlamak. Daha sonra, sıçanlar gıda kısıtlamak ve metamfetamin yanıt edinimi ve bakımı kolaylaştırmak için deneysel oturumları sırasında serbest besleme vücut ağırlıkları 85 ila 90% olarak korumak. Deneysel boyunca geliş günlük ev kafes odasında kemirgenler Kolusırayla oturumları vücut ağırlığını kaydetmek ve günlük gıda dağılımını ayarlamak için. Hedef ağırlıkları elde edildikten sonra, kronik kalıcı juguler kateter ve intrakranial uyarıcı elektrotlar ile her sıçan implante cerrahi olarak hazırlamak. 2. Juguler Ven Kateterizasyon Kateter Hazırlık 0,012 x 0,025 kadar bir iç çapı olan boru silastik bir 13-cm uzunluk gibi hazırlanmış bir silikon top ilave silikon boru ve elektrokoter kullanılmasıyla, boru bir ucundan 4 cm oluşturmak ve kurumaya bırakın. Bir kaç dakika için narenciye türetilmiş bir limonen esaslı bir solvent içinde hortumun diğer ucu Dip ve genişletmeye izin verir. Doğru açıyla paslanmaz çelik kılavuz kanül bent genişletilmiş boru bağlayın. Diş akrilik çimento kullanılarak biyouyumlu örgü 1 "kareye paslanmaz çelik kılavuz kanül bükük tabanı Çapa. Etanol ve distile Wate ile içte ve dışta kateter yıkayınr. Artık sıvı damlacıkları ortadan kaldırmak için boru boyunca hava enjekte edilir. O / N kurumaya bırakın. Steril Tekniği Aseptik cerrahi teknikler kullanılarak özel bir hayvan cerrahi grubundaki tüm ameliyatları gerçekleştirmek. Bir otoklav kullanarak aletleri ve implantlar sterilize ve steril bir havlu (ler) ile kaplı VEYA masaya su geçirmez kağıt yerleştirerek steril alan hazırlamak. Steril eldiven giyin ve işlem sırasında steril alana tüm enstrümanları, implantlar ve cerrahi gazlı bez tutun. Birden ameliyatları yapılırken işlemler arasında bir boncuk sterilizatör 20 saniyelik ardından alkollü bir bezle her enstrüman silin. Anestezi Takiben pentobarbital atropin (sülfat) (0.04 mg / kg, sq) farelere ön işlemden geçirin (20-50 mg / kg, ip) anestezi elde etmek. Steril penisilin G prokain süspansiyonu ile hayvanlar (75.000 üniteleri, im) ile bir analjezik madde enjekte (karprofen, 5-10 mg / kg, sc veya ketoprofen, 2 – ameliyattan hemen önce 5 mg / kg, sc) sırasıyla perioperatif enfeksiyonlar ve ağrıyı azaltmak için kullanılır. Hiçbir tepki oluşursa, o zaman devam, hayvana bir orta ayak tutam sunarak yeterli anestezi için kontrol edin ve. Her iki gözde göz yağlayıcı. Cerrahi Sitesi Hazırlama Sadece omuz bıçakları bağlayan bir çizgiye posterior sıçan sırtında 2 x 2 cm dorsal yama Tıraş. Çene kemiği ve sternum arasında doğru boyun bölgesinde 1 x 1 cm ventral yama Tıraş. Betadin çözüm izledi alkol pedleri ile traş yerleri silin. Steril bir havlu üzerine sıçan yerleştirin ve betadin devam etmeden önce kurumasını bekleyin. Kateter Yerleştirilmesi 10 bıçak bıçak kullanarak arkasında midscapular bölgede kürek kemikleri bağlayan bir hatta göre bir kesi paralel sağlayın. Için bir uçak oluşturmak için alttaki bağ dokusu cilt ayırmak için bir hemostat kullanınKateter tabanını örgü. Steril serum fizyolojik ile bölgeyi sulamak ve sırtına sıçan açmadan önce steril gazlı bez ile örtün. Sağ çene kemiği ve 10 bıçaklı bıçak kullanarak sternum arasındaki çapraz kesi yapmak. Juguler ven bulmak için altta yatan bağ dokusu cilt ayırmak için bir hemostat kullanın. Not: juguler ven beyaz / gümüş ve parlak görünür ve kadınlarda daha erkek sıçanlarda büyüktür. , Ven altına bir spatula yerleştirin maruz venin üst (proksimalinde) etrafında yavaşça 4-0 ipek sütür kravat ve geri boynuna damar itin. Inferolateral boyun cilt altında ama kas üzerindeki yüzeysel cep oluşturmak için bağ dokuları ayırın. Kol ve yukarı arkasında geri tünel yoluyla midscapular kesi boyun kesi bir steril trokarı itin. Boyun ucundan ve distal kateter içine trokardan sert kılavuz tel yukarı takarak boyun arkasındaki kateter çalıştırın. PullBoyun insizyon ve takip edecektir bağlı distal kateter yoluyla geri teli kılavuz. Önceden yerleştirilen proksimal sütür yukarı çekerek bir spatula üzerinde sağ juguler ven izole edin. Venin üst tarafında küçük bir kısmi kesim yapmak için bir top makas kullanın. Bunu açmak için ven kesi içine bir kavisli bir forseps yerleştirin. Ayrı forseps tutulması ancak yerinde, yaklaşık 2 forseps ipuçları ile damar içine kateter ucu pass – sağ atrium dışında sona erecektir 3 cm. Distal ven etrafında 4-0 ipek sütür bağlayarak kateter sabitleyin. Ekstra stabilite eklemek için birlikte bir "kutu" düğüm proksimal ve distal sütür kravat. Heparinize steril serum fizyolojik ile yıkayın kateter ve geri çekmek, kan başarılı implantasyonu onaylayın. Knot üzerinde 2 mm ve boyun deri altında kalan proksimal kateter sokmak – Dikişler 1 Trim. sizin seçtiğiniz uygun sütür / yöntemi ile kapatın. Olmayan Akustik Eğerbable dikiş veya zımba kullanıldığında, bunlar, genel anestezi altında, 10-14 gün sonra çıkarılmalıdır. Steril bir pamuk uçlu aplikatör kullanarak antibiyotik merhem ile kesi örtün. Örgü tabanının karşıt köşelerinde iki de emilebilir dikişlerle kullanarak cilt altı arka dokuya distal kateter / rehber kanül / örgü takımını Çapa. Kesintiye olmayan ters emilebilir sütürler kullanılarak kılavuz kanül etrafında arka kesi kapatın. Steril bir pamuk uçlu aplikatör kullanarak antibiyotik merhem ile kesi örtün. Ameliyat Sonrası Bakım 3 ml'lik bir şırınga kullanılarak, heparinize% 0.9 steril tuzlu su çözeltisi ile kateter yıkayın ve tıkanmayı önlemek için kılavuz kanül içine tıkacı yerleştirin. Açıklığını korumak için günlük bazda her sıçan kateter yıkayın. Hemen prosedürü izleyerek, cerrahi takımında bir ısıtma pedi üzerinde kendi ev kafeste sıçan yerleştirin ve bilinç ve spontan hareket dönene kadar gözlemleyin. Koloni odasına kurtarıldı sıçan dönün ve beş ila yedi gün intrakranial cerrahi öncesinde geçmesine izin. Enfeksiyon kontrol ve hayvan davranışları, görünümü ve aktivite düzeylerini değerlendirmek de dahil olmak üzere, tartılır kolu ve günlük genel durumunu değerlendirmek. Herhangi bir sorun çıkması durumunda Hayvan Kaynakları veteriner danışın ve herhangi önerilen tedavi rejimleri izleyin. Gerektiğinde perioperatif ağrının tedavi edilmesi için (5 mg / kg, sc – – 10 mg / kg, sc ya ketoprofen, 2 karprofen, 5) bir analjezik madde ile hayvan enjekte edilir. 3. İntrakraniyal Elektrot Yerleştirme Cerrahi Hazırlık Bölüm 2.2'de anlatıldığı gibi steril koşullar altında tüm ameliyatları gerçekleştirmek. Anestezi Anestezi indüksiyon odasında hayvan koyun ve 1.000 odasına gaz akışını isoflurance temin -% 5 olarak belirlenmiştir buharlaştırıcı ile 2.000 ml / dakika. Hayvan yaslanmış sonra, bölme a kaldırmaknd yastıklı stereotaktik işletim platformu üzerinde burun konisi yerleştirin. Burun konisi için odadan gaz akışını açın ve 2 set buharlaştırıcı ile gaz çalıştırmak -% 3. Stabil solunumda ve ameliyat sırasında uyarısına yanıt korumak için gerektiği buharlaştırıcı ayarlayın. Sırasıyla perioperatif enfeksiyonlar ve ağrıyı azaltmak için steril penisilin G prokain süspansiyonu ile sıçan (75.000 birimleri, im) ve hemen ameliyat öncesinde (0.5 mg / kg sc için buprenorfin 0.05) bir analjezik ajan enjekte edilir. Hiçbir tepki oluşursa, o zaman devam, hayvana bir orta ayak tutam sunarak yeterli anestezi için kontrol edin ve. Her iki gözde göz yağlayıcı. Cerrahi Sitesi Hazırlama Sıçan başının üst Tıraş ve işlem sırasında merkez hareketsiz tutmak için kulak çubukları sıçan yerleştirin. Betadin çözüm izledi alkol pedleri ile traş bölgeyi silin. Betadine devam etmeden önce kurumaya bırakın. Elektrot İmplantasyonu Arasındaki derisini kavrayın ve biraz forseps ile kulaklara anterior ve taban üzerinde kesmek için makas kullanın. Bu manuveur orta kafatası üzerinde deri bir 1.5 x 1 cm alanını kaldıracaktır. Kazıyın ve pericranium kaldırmak için kafatası ve kavisli bir forseps aşağı pericranium yoluyla çevresel bir kesi yapmak için bir 10-bıçak kullanın. , Steril serum fizyolojik ile bölgeyi sulamak gazlı bez ile aşırı kan ve tuzlu kurulamak ve kafatası bregma dahil tamamen o kadar kemikli yerlerinden, kurumasına izin açıkça görülebilir. Ikili Ameliyat için, iki çift kutuplu platin-iridyum elektrotları, stereotaksik bir çalışma platformunun iki tarafında her elektrot tutucu içine bir montaj. Bregma üzerinde pozisyona ~ 1 mm birinci elektrot hareket ettirin ve ön-arka (AP) için stereotaktik koordinatları yazmak ve medial-lateral dijital ekranda gösterilir (ML) pozisyonlarını. Aslında sk elektrot ucu DOKUNMAYINull işlevi elektrot artık çünkü. Diğer elektrot için bu işlemi tekrarlayın. Nihai AP hesaplayın ve ML ilgi hedef yapısına dayalı koordinatları. İlk dorsoventral (DV) elde dijital ekranda koordine etmek sadece kafatası üzerinde ucu ile bu pozisyona elektrodu taşıyın. Ilgi hedef yapısına dayalı nihai DV derinliğini hesaplayın. Not: çekirdek kabuk bregma göre koordinatları aşağıdaki stereotaktik kullanarak ilaç consummatory davranış 8 yılında bilinen katılımı verilen bu örnekte hedef aldı akkumbens: AP giriş = koordinat + 1.6 [Dijital Bregma koordinat görüntülenen] ML entry = [dijital bregma koordinat görüntülenen] koordinatı sol sağ / 2.4 ± DV derinliği = [Dijital AP / ML girişte kafatası yüzeyinde koordinat görüntülenen] – 8.5 Kalıcı bir ma ile kafatası yüzeyi üzerinde her bir elektrotun öngörülen giriş konumunu işaretleyinrker. Çarpmak veya bu manevra sırasında elektrot ucu dokunmayın. Her işareti bir 1.4 mm delik delme yuvarlak top elmas kaplı çapak kullanın. Yüksek hızlı matkap ile intrakranial kasaya kafatası yoluyla atılmak için dikkatli olun. Kafatası uzak delinmiş edildikten sonra dura delinme için kavisli bir forseps kullanın. Kafatası vidaların yerleştirilmesi için elektrot girdileri arkasında ek dört yerlerde 0.7 mm delik yuvarlak top elmas kaplı çapak kullanın. Orta hat her iki tarafında kafatası, ikiye dört 0,8 (çap) x 3,2 (uzunluk) mm paslanmaz çelik vidaları yerleştirmek için manuel tornavida kullanın. Önümüzdeki haftalarda ve aylarda için yerinde kranial kapağı yapacak önemli altyapı çünkü Sıkıca kafatası içine yaklaşık yarısı uzunluğa kadar bu vidaları sabitleyin. Dikkatle elle yöneten düğmeyi çevirerek hesaplanan DV derinliğine beyne onun Matkap deliği üzerinden ilk elektrot eklemek ve Z koordinatıElektrot tutucu. Elektrodun ucuna aşırı zarar görmesini önlemek için saniyede 1/2 dönüş kabaca eşit oranda düğmesini çevirin. Beyin girerken Matkap deliği kemik kenarına değmeyecek elektrot ucu olun. Diş çimento ardından Matkap deliği ve arka vidaları üzerinde katmanlı süper yapıştırıcı kullanarak ilk elektrot sabitleyin. Bu yapı tamamen kuruduktan sonra, onun tutucu elektrot kaldırmak. İkinci elektrot için ekleme ve çimentolama işlemi tekrarlayın. Sağ cilt kenarına kadar diş çimento uygulayın ama bu kafa çimento kap uzun vadeli gevşetir, çünkü deri ile örtüşmemektedir. Ameliyat Sonrası Bakım Tıkanmasını önlemek için elektrot kaideleri üzerinden iki toz kapaklarını yerleştirin. Hemen prosedürü izleyerek, cerrahi takımında bir ısıtma pedi üzerinde kendi ev kafeste sıçan yerleştirin ve bilinç ve spontan hareket dönene kadar gözlemleyin. Inci iyileşti sıçan dönüne koloni odası ve beş gün deney başlamadan önce geçmesine izin. Enfeksiyon kontrol ve hayvan davranışları, görünümü ve aktivite düzeylerini değerlendirmek de dahil olmak üzere, tartılır kolu ve günlük farelerin genel durumunu değerlendirmek. Herhangi bir sorun çıkması durumunda Hayvan Kaynakları veteriner danışın ve herhangi önerilen tedavi rejimleri izleyin. Gerektiğinde perioperatif ağrının tedavi edilmesi için bir analjezik ajan (buprenorfin 0,05-1 mg / kg sc) hayvanları enjekte edilir. (- 10 mg / kg, sc ya ketoprofen, 2 – karprofen, 5 5 mg / kg, sc) intrakranial kanama steroidal olmayan ağrı kesici ilaçların kullanımı ile daha yaygın olabilir, böylece kafa içi cerrahi operasyon sırasında buprenorfin kullanın. 4. Edimsel Aparatı Davranışsal deneyler çalıştırmak için ses azaltıcı muhafazaları içinde bulunan plastik ve paslanmaz çelik edimsel koşullama odaları kullanın. Havalandırma ve beyaz noi ihtiyacını karşılamak için bir egzoz fanı ile her muhafaza kıyafetise yabancı sesler maskelemek için. Deney verilerini prosedürleri programlamak ve toplamak için bir kişisel bilgisayar ve bir davranış yazılım arayüzü sistemi kullanın. Genel Set-Up Her bir kolu üzerinde bulunan bir uyarıcı ışık ile bölmenin bir duvara monte edilmiş iki farklı yanıt kolları ile her bir deney odasına donatmak. Basıldığında bir programlanmış sonucu sonuçlanır ve böylece kollarından birini "aktif" kolu belirleyin. İlacın kullanılabilirliğini gösteren her edimsel seansında aydınlatmak için aktif tepki kolu üzerinde doğrudan yer alan bir uyarıcı ışığı programlayın. Karşıt duvar 5 saniye AÇIK gidiyor ve uyarıcı ışık oluyor ev ışık eşliğinde 2.8 sn boyunca metamfetamin (100 ul% 0.9 NaCl içinde 0.05 mg / kg / infüzyon) bir infüzyon teslim aktif kolu sonucu bir tepki var KAPALI 30 sn zaman aşımı. Aktif kolu yanıtları saymak ama hiç planlanan CONSE olmalıdır30-saniye zaman aşımı süresince sonuçları olabilir. Tamamlanması için, kayıt inaktif kolundaki yanıtlar ancak programlanmış neticelere sahip olmalıdır. 5. intravenöz (IV) Metamfetamin Öz-Yönetim Prosedürü Genel Hazırlıklar Olarak hızlı ve sakince mümkün edimsel odalarına Yük sıçan davranışsal eserler en aza indirmek için. Kemirgen sırtında ve edimsel odasının üstünde asılı bir sızdırmaz sıvı döner kılavuz kanül bir paslanmaz çelik yay tasma takın. Ses azaltıcı muhafazanın dışında bulunan bir motor tahrikli pompa 20 ml ilaç şırınga döner bağlantı boru bütünlüğünü sağlamak. Ilımlı çekerek kapalı slayt olmaz kadar Bunu yapmak için, metal döner uç ve ilaç şırınga iğne ucu üzerine plastik bağlantı boru bir inçin en az ¼ itin. Nispeten kontrolsüz m izin döner ve tasma düzeneğini Counter-dengeHayvanın ovement. Cuma'ya yaklaşık olarak aynı anda her gün Pazartesi edimsel oturumları yürütmek. Toplama Dört beş gün üst üste günde 6 saat oturumlarında IV metamfetamin öz-yönetim hızlı edinimi koşmak fareler kolaylaştırmak amacıyla. Örneğin, herhangi bir işaret ya da basarak sonuçları ortaya ödüllendirmek (sıçanlar 30 sn zaman aşımı ardından aktif kolu üzerinde her basın IV metamfetamin bir infüzyon almak sabit oran reinforcementduring FR-1 + 30 sn tarifesi bu oturumları yürütmek Her iki kolun). Not: Bu ilk uzun süreli ve "kolay" erişim bir hafta (Şekil 3) daha az veya eşit davranışı alarak önemli ilaç elde kemirgenler çoğunluğunda neden olacaktır. Bakım Eğitimin ikinci haftasında, Cuma'ya günde 2 saatlik seans Pazartesi günü çalışacak fareler korumak ve IV METHAM rafinephetamine öz-yönetim. Takviye sabit oran FR-1 + 30 sn zaman aşımı programa Davranış oturumları. Her oturumda genelinde metamfetamin sunumları toplam sayısı üç ardışık seans (Şekil 4) ve ilk 30 dakika boyunca infüzyon-kümülatif sayısının sırasında infüzyon kümülatif sayısından daha fazladır için en az% 10 değişir yanıt kararlı, yoğun belgeleyin İkinci 30 dakika (Şekil 5). Not: Bu kriter sıçanlar bağımlılık davranışı 19 ve basit gündelik değil kullanılmasını gösterir oturumun başında bir uyuşturucu yükleme deseni geliştirmek sağlar. Post-Session Her oturumun sonunda, kemirgen arkasından tasma ayırın. Kan pıhtıları önlemek için 800 IU streptokinaz içeren% 0.9 tuzlu su çözeltisi 0.1 ml kateter yıkayın. R dönmeden önce tıkanmasını önlemek için her kılavuz kanül içine yerleştirin tıkacıev kafeslere ats. Hemen deney süresince Çarşamba günleri her deneysel seans bitiminden sonra kateter açıklığını sınayın. Kateter açıklığını test etmek heparinize bakteriyostatik tuzlu su içeren bir 22 G iğne ile, bir 3 cc şırınga hazırlayın. Iğne plastik boru, 4 ila 6 inç uzunluğunda parça ve hayvanın sırtında kateter kanül montaj metal yazılan diğer ucunu bir ucunu. Net akışını sağlamak ve daha sonra geri şırınga pistonu çizmek için tuzlu 0.1 0.2 ml infüze. Kateter patent ise, gerektiği hem kolayca floş ve tüp görünür olacak kanı geri çekin. Piston bırakın ve geri kateter aracılığıyla kan tüm temizlemek için başka bir 0.2 ml demlenmeye. Kan geri alınamaz ise, o zaman, metal görevinden 3 cc şırınga ve tüp çıkarın. Metoheksital sodyum içeren bir 22 G iğne ile, bir 1 cc şırınga hazırlayın, hızlı etkilianestezi, ek test kateter açıklığının için. Iğne plastik boru, 4 ila 6 inç uzunluğunda parça ve hayvanın sırtında kateter kanül montaj metal yazılan diğer ucunu bir ucunu. Hayvanın sırtına metal görevinden 1 cc şırınga ve tüp kaldırmak hızla 1.5 mg demleyin ve. Heparinize bakteriostatik tuzlu su ile dolu 3 cc şırınga bağlayın ve 0.1 demlenmeye – 0.2 ml. Hayvan 3 saniye içinde kas tonusunu kaybederse, o zaman kateter patent ve işlevseldir. Metamfetamin, metamfetamin öz-yönetim elde etmek için başarısızlık ve sıçan çıkarma zorluk advers reaksiyonları ele alan tuzaklar bölüm için İletişim Dosya "Ortak Tuzaklar" bölümüne bakın. 6. Beyin Uyarım Aparatı DBS deneyler çalıştırmak için 10 ila 12 pleksi cam kutular (12 x 18 x 18) (gxyxd) kullanın. Sert opak ile dışarıdan her kutu Kapakgörüntüleme veya birbirleri ile etkileşim fareleri önlemek için kutunun arkasını ve kenarlarını kapsayan kağıt. Muayene stimülasyon oturumları sırasında hayvanların görebilirsiniz böylece ortaya net ön paneli bırakın. Hava akımı sağlarken kaçan fareler engelleyen bir yarı geçirgen paneli ile kutuların üstleri örtün. Kemirgen kafa kapağı ve uyarım sistemi arasındaki elektrik bağlantısını kolaylaştırmak için her kutusunun üzerindeki bulunan kollektör desteklemek için bu paneli kullanın. DBS deneyler için birden fazla eşzamanlı hayvanlara sabit akım sunabilen bir uyarım sistemi kullanın. Bir kullanıcı programlanabilir dijital sinyal işlemcisi / iletişim arayüzü oluşan bir sistemi kullanın, bir uyarıcıdır bir stimülatörü pil paketi, bir kanal dağıtım kutusu ve beraberindeki yazılım (Malzeme fişine bakınız). Her commutat üstün elektronik kaide stimülatörü kanal bağlantı noktalarını bağlamak için özel uzunluk kabloları kullanınveya. Not: Bireysel laboratuvar bağlıdır gerekli uzunluğu. Bu kablolar, hayvan alanının dışında olan ve paslanmaz çelik baharda ele alınacak gerek yoktur. Paslanmaz çelik yay ile kaplı 16-in kabloları kullanarak kemirgen baş kap implante elektrot kaide komütatör alt elektronik kaide bağlayın. Kablolar kafa kapağı üzerinde önemli gerilim olmadan muhafazanın her alanda serbest dolaşımını sağlamak için yeterince uzun olduğundan emin olun. Not: Dört ayakları üzerinde dururken sıçan başkanı olacağını kabaca biter bir kablo genellikle yeterli olmaktadır. Beyin Uyarım Programlama Stimülasyon parametreleri (örneğin, dalga, frekans, darbe genişlik, inter-uyaran gecikmesi, geçerli genliği) ve toplamak deneysel veriler programlamak için bir kişisel bilgisayar ve programlama yazılımı kullanın. Bir görsel programlama dilini kullanarak, her cihaz bu deneyimlerden karşılamak için yapacak işlevleri belirleyecektirZihinsel uç noktaları ve verilerin depolandığı ve / veya gerçek zamanlı görüntüleme için yansıtılacaktır. Bu özel projeyi çalıştırmak komutlar Şekil 1'de gösterilmiştir. Deneyin başlamasından önce görsel kontrol paneli (Şekil 2) içine istediğiniz frekansı, darbe genişliği ve genlik belirtin. Sıçanlarda yüksek frekanslarda için tipik parametreler klinik insan derin beyin uyarımı kullanılanlarla benzerdir: 130 to180 Hz frekans, 60 ila 90 milisaniye darbe genişliği ve 250 uA 4,8-10 100 geçerli genliği. Not: daha düşük akım nedeniyle primata kıyasla azaltılmış bir boyuta kemirgen kullanılır. 7. Derin Beyin Stimülasyonu Prosedürü Kutulara Fareleri yüklemek için, baş kapağı üzerindeki her elektrot kaide komütatör gelen paslanmaz çelik yay kablosunu takın. Bir frekansta akımın 5 uA çalıştırarak her bir elektrodun empedansını test2 sn 1,000 Hz. Empedans eşit ya da 125 KOhm'dan az ise elektrot tedavi uyarımı sağlayabiliyor olması nedeniyle, daha sonra deneye devam edin. Empedans fazla 125 KOhm ise elektrotun yüksek direnç potansiyel alt terapötik düzeylere akımı kesecek, çünkü deneyden hayvan kaldırmayı düşünün. Onlar elektrot kablosu (ler), ancak herhangi bir aktif tedavi alan değil eklenecektir sırasında alışkanlık için bir veya iki alay oturumları aracılığıyla sıçan çalıştırın. Mock testler herhangi bir spesifik olmayan davranış etkilerini ortadan kaldıracaktır. Hemen her sahte oturumu izleyen, IV metamfetamin kendini idarenin günlük 2 saatlik oturum için edimsel kutulara sıçan taşımak. İki grup, bir aktif-stimülasyon ve sahte-stimülasyon kohort içine Counter-denge sıçanlar temel ilaç alımı gruplar arasında anlamlı bir farklılık böylece. Günlük DBS oturumu gerçekleştirinaktif elektriksel beyin stimülasyonu veya 3 saat kendi grup atama bağlı hiçbir stimülasyon ya aldığınız sırasında 5 gün boyunca kemirgen kohort ilgili. Hemen IV metamfetamin kendini idarenin günlük 2 saatlik oturum için edimsel kutularına her DBS oturumu, ulaşım sıçanları izleyen. Stimülasyon hayvan davranışları net değişiklikler sebep olmadığından emin olmak için dikkatlice her DBS oturumunda en azından bir kısmı sırasında hayvanları gözlemleyin. Herhangi bir anormal davranışlar uyarılmasından sonra / 'sırasında ortaya çıkarsa, bu gözlemleri belgelemek için özen gösterin. Not: Yazarlar bu makalede açıklanan deney sırasında önemli davranış değişiklikleri veya gıda / su alımı değişiklikleri farkında değil. DBS tedavisi, elektriksel parametrelerin ve DBS oturumu ve hipoteze göre gerektiğinde edimsel oturumun arasındaki süreyi değiştirin.