שיטה כללית להערכת השפעות העמוקה גירוי המוח במתאמפטמין תוך ורידים-מנהל עצמי

כל ההליכים אושרו על ידי ועדת הטיפול בבעלי חיים והשימוש LSUHSC המוסדית ובוצעו בהתאם לNIH "עקרונות של טיפול בבעלי חיים במעבדה." 1. מכרסמים הסתגלות והגבלת מזון השתמש בחולדות מבוגרות Wistar שבן 3 חודשים בתחילת הניסוי. חולדות הבית מבודד בכלובי מתכת מצוידים בזרימה למינרית יחידה ומסנן אוויר במתקן לטמפרטורה ולחות מבוקרת, מוכר-AAALAC טיפול בבעלי חיים באור 12-שעות הפוכות / מחזור כהה (מדליקה את בשעה 0600). לספק מים ואוכל מכרסם סטנדרטי בחופשיות עד משקל גוף הוא כ 380-400 גר '. בהמשך לכך, אוכל להגביל חולדות ולשמור על 85 עד 90% ממשקל גוף ההאכלה ללא במהלך המפגשים הניסיוניים כדי להקל על רכישה ותחזוקה של תגובה למתאמפטמין. ידית מכרסמים בחדר הכלוב בבית כל יום מהגעה בכל הניסוימפגשים על מנת לרשום את משקל גוף ולהתאים את הקצאת מזון יומית. ברגע שמשקלי היעד הושגו, להכין ללהשתיל כל עכברוש עם קטטר וריד צוואר השכינה כרונית ואלקטרודות מגרה תוך גולגולתי. 2. הצוואר וריד צנתור צנתר הכנה הכן אורך 13 סנטימטר של צינורות silastic עם קוטר פנימי של 0.012 x 0.025 ", ליצור סיליקון כדור 4 סנטימטר מקצה אחד של הצינור באמצעות צינורות סיליקון נוספים וelectrocautery, ולאפשר לאוויר יבש. טובלים את הקצה השני של הצינור בממס מבוסס לימון נגזר מהדרים לכמה דקות ומאפשרים להרחיב. חבר את צינורות מורחבים לכפוף צינורית מדריך נירוסטה בזווית נכונה. לעגן את הבסיס הכפוף של צינורית מדריך נירוסטה ל" כיכר 1 של רשת ביולוגית באמצעות מלט אקריליק שיניים. רוקן את הקטטר מבפנים ומבחוץ עם אתנול וwate מזוקקr. להזריק אוויר דרך צינורות לחסל טיפות נוזל שיורי. לאפשר לו להתייבש O / N. טכניקה סטרילית לבצע את כל הניתוחים בסוויטה כירורגית חיה ייעודית תוך שימוש בטכניקות ניתוחיות ספטית. לעקר מכשירים ושתלים באמצעות החיטוי ולהכין שטח סטרילי על ידי הנחת נייר עמיד למים על השולחן או מכוסה במגבת סטרילית (ים). ללבוש כפפות סטריליות ולשמור את כל מכשירים, שתלים ותחבושות על אזור סטרילי במהלך ההליך. נגב את כל מכשיר עם ספוגית אלכוהול ואחרי 20 שניות במעקר חרוז בין נהלים כאשר ניתוחים מרובים מבוצעים. הַרדָמָה Pretreat חולדות עם אטרופין (סולפט) (0.04 מ"ג / קילוגרם, מ"ר) ואחריו pentobarbital (20 – 50 מ"ג / קילוגרם, IP) כדי להשיג הרדמה. להזריק חיות עם ההשעיה פרוקאין G פניצילין סטרילי (75,000 יחידות, IM) וסוכן משכך כאבים (carprofen, 5 – 10 מ"ג / קילוגרם, sc או קטoprofen, 2 – 5 מ"ג / קילוגרם, SC) מייד לפני ניתוח כדי להקטין זיהומים וכאבים סביב ניתוח, בהתאמה. בדקו הרדמה נאותה על ידי אספקת קמצוץ הבוהן מתונה לבעלי החיים, ואם אין תגובה מתרחשת, ולאחר מכן להמשיך. החל סיכה עין בשתי העיניים. הכנת אתר כירורגי לגלח תיקון גב סנטימטר 2 x 2 על גביו של העכברוש רק אחורי לקו המחבר השכמות. לגלח תיקון 1 x 1 סנטימטר הגחון באזור הצוואר הנכון בין עצם הלסת ועצם החזה. נגב את האזורים המגולחים עם רפידות אלכוהול ואחריו פתרון בבטאדין. מניחים חולדה במגבת סטרילית ולאפשר בטאדין להתייבש לפני שימשיך. צנתר השרשה הפוך מקביל חתך לקו המחבר השכמות באזור midscapular על הגב באמצעות סכין 10-להב. השתמש hemostat להפריד את העור מרקמת חיבור הבסיסית ליצירת מטוס לרשת בסיס קטטר. להשקות את האזור עם תמיסת מלח סטרילית ולכסות עם גזה סטרילית לפני הפיכת החולדה על הגב שלה. לעשות חתך אלכסוני בין עצם הלסת תקין ועצם החזה באמצעות סכין 10-להב. השתמש hemostat להפריד את העור מרקמת חיבור הבסיסית לאתר את וריד הצוואר. הערה: וריד הצוואר מופיע לבן / כסף ומבריק, והוא גדול יותר בחולדות זכרים מאשר אצל נקבות. הנח מרית מתחת לווריד, לקשור תפר 4-0 משי בעדינות סביב החלק העליון (חלק הפרוקסימלי) של הווריד החשוף ולדחוף את הווריד חזרה לצוואר. הפרד את רקמות חיבור כדי ליצור כיס שטחי מתחת לעור צוואר inferolateral אבל מעל השריר. לדחוף נקז מעוקר מחתך הצוואר לחתך midscapular ידי נהור מאחורי הזרוע ומעלה. הפעל את הצנתר מהחלק האחורי לצוואר על ידי החדרת חוט עד מדריך נוקשה דרך הנקז מסוף הצוואר ולקטטר דיסטלי. משוךלהנחות את החוט בחזרה דרך לחתך בצוואר וקטטר דיסטלי המצורף תבוא בעקבותיו. לבודד את וריד הצוואר ממש מעל מרית ידי משיכת על התפר הפרוקסימלי הניח בעבר. השתמש במספרי כדור כדי לעשות את חתך חלקי קטן בלמעלה מהווריד. הכנס מלקחיים מעוקלים לתוך חתך הווריד כדי לפתוח אותו. שמירה על המלקחיים מלבד אבל במקום, להעביר את קצה הצנתר בין הטיפים מלקחיים ולתוך הווריד על 2 – 3 סנטימטר שבו יסתיים מחוץ לעלייה הימנית. אבטח את הצנתר על ידי קשירת תפר 4-0 משי מסביב לוריד דיסטלי. לקשור הפרוקסימלי ותפרים דיסטלי יחד בקשר "תיבה" כדי להוסיף יציבות נוספת. קטטר סומק עם מלח סטרילית heparinized ולסגת דם כדי לאשר השתלה מוצלחת. חתוך את התפרים 1 – 2 מ"מ מעל הקשרים ולתחוב את הקטטר הפרוקסימלי שנותר מתחת לעור הצוואר. לסגור עם תפר / שיטה מתאימה על פי בחירתך. אם אינו absorתפרים או סיכות bable משמשים, הם חייבים להסיר 10-14 ימים בהרדמה כללית. לכסות חתך עם משחה אנטיביוטית באמצעות מוליך קצה גפן סטרילי. לעגן את ההרכבה קטטר / צינורית מדריך / רשת דיסטלי לרקמה התת עורית בחזרה באמצעות תפרים נספגים בשתי הפינות המנוגדות של בסיס הרשת. לסגור את החתך בחזרה סביב צינורית המדריך באמצעות תפרים נקטעו,-הפוך שאינם נספגים. לכסות חתך עם משחה אנטיביוטית באמצעות מוליך קצה גפן סטרילי. טיפול לאחר ניתוח רוקן את הקטטר עם תמיסת מלח heparinized 0.9% סטרילי באמצעות מזרק 3 מ"ל ומניח את אטם לצינורית המדריך כדי למנוע סתימה. רוקן קטטר כל של חולדה על בסיס יומי כדי לשמור על פתיחות. מייד לאחר ההליך, מניח את החולדה בכלוב בבית שלה על כרית חימום בחדרי הניתוח ולבחון עד תודעה והחזרת תנועה ספונטנית. להחזיר את החולדה התאוששה לחדר המושבה ולאפשר חמש עד שבעה ימים לעבור לפני ניתוח תוך-גולגולתי. לשקול, לטפל, ולהעריך את המצב הכללי שלהם מדי יום, כולל בדיקת זיהום והערכת רמות התנהגות בעלי החיים, הופעה ופעילות. התייעץ עם וטרינר בעלי החיים המשאבים אם בכלל מתעוררות בעיות ולעקוב אחר כל משטרי טיפול מומלצים. להזריק חיות עם סוכן משכך כאבים (carprofen, 5 – 10 מ"ג / קילוגרם, sc או ketoprofen, 2 – 5 מ"ג / קילוגרם, SC) לטיפול בכאב סביב ניתוח בהתאם לצורך. 3. תוך גולגולת אלקטרודה מיקום הכנת כירורגי לבצע את כל הניתוחים בתנאים סטריליים, כמתואר בסעיף 2.2. הַרדָמָה הנח בעלי חיים בתא אינדוקציה הרדמה ולספק isoflurance זרימת גז לתא ב 1000 – 2,000 מיליליטר / דקה עם מכשיר האדים נקבעו על 5%. ברגע שבעלי החיים הוא שכיבה, להסיר מתאND מקום בחרטום על פלטפורמת ההפעלה stereotactic מרופדת. לעבור זרימת גז מתא לחרטום ולהפעיל גז עם מאדה נקבעה על 2 – 3%. התאם מאדה כנדרש כדי לשמור על נשימה יציבה ואין תגובה לגירוי במהלך ניתוח. להזריק עכברוש עם ההשעיה פרוקאין G פניצילין סטרילי (75,000 יחידות, IM) וסוכן משכך כאבים (עצירות 0.05-0.5 מ"ג / קילוגרם sc) מייד לפני הניתוח כדי להקטין זיהומים וכאבים סביב ניתוח, בהתאמה. בדקו הרדמה נאותה על ידי אספקת קמצוץ הבוהן מתונה לבעלי החיים, ואם אין תגובה מתרחשת, ולאחר מכן להמשיך. החל סיכה עין בשתי העיניים. הכנת אתר כירורגי לגלח את הראש של החולדה ומניח את החולדה בברים אוזן לשמור נייח ראשו במהלך ההליך. נגב את האזור המגולח עם רפידות אלכוהול ואחריו פתרון בבטאדין. לאפשר בטאדין להתייבש לפני שימשיך. אלקטרודה השרשה לתפוס את הקרקפת בין ומעט קדמית לאוזניים עם מלקחיים ולהשתמש במספריים לחתוך לרוחב הבסיס. manuveur זו יסיר אזור 1.5 x 1 סנטימטר של עור מעל אמצע הגולגולת. השתמש 10-להב לעשות חתך היקפי באמצעות מֵסַב הַגוּלגוֹלֶת אל הגולגולת ומלקחיים מעוקלים כדי לגרד את ולהסיר את מֵסַב הַגוּלגוֹלֶת. להשקות את האזור עם תמיסת מלח סטרילית, מורח דם ומלוח עודפים עם גזה, ולאפשר לגולגולת לייבוש כל כך לחלוטין ציוני הדרך הגרמיות, כולל גבחת, ניתן לראות בבירור. לניתוח דו-צדדי, הר שתי אלקטרודות הפלטינה-אירידיום דו קוטביות, אחד לכל בעל אלקטרודה בכל צד של פלטפורמת ההפעלה stereotactic. הזז את האלקטרודה הראשונה לעמדה ~ 1 מ"מ מעל גבחת ורשום את קואורדינטות stereotactic לקדמית, אחורי (AP) והמדיאלי-רוחב עמדות (ML), אשר יוצגו בתצוגה הדיגיטלית. לא ממש לגעת בקצה האלקטרודה לskull כי האלקטרודה לא יהיה ארוכה יותר פונקציה. חזור על תהליך זה עבור האלקטרודה אחרת. לחשב את AP הסופי וML קואורדינטות המבוסס על מבנה היעד של עניין. הזז את האלקטרודה לעמדה זו עם הקצה בדיוק מעל הגולגולת להשיג הראשוני dorsoventral (DV) לתאם בתצוגה הדיגיטלית. חשב את עומק DV הסופי המבוסס על מבנה היעד של עניין. הערה: nucleus accumbens הפגז היה ממוקד בדוגמא זו ניתנת מעורבותו הידועה בסמי consummatory התנהגות 8 באמצעות stereotactic הבאה מרכז ביחס לגבחת: AP כניסה לתאם = [דיגיטלי מוצג לתאם בגבחת] + 1.6 כניסת ML קואורדינטות = [מוצגת דיגיטלית לתאם בגבחת] ± 2.4 לימין / שמאל עומק DV = [דיגיטלי מוצג לתאם במשטח גולגולת בכניסה AP / ML] – 8.5 סמן את מיקום הכניסה הצפויה של כל אלקטרודה על פני השטח של הגולגולת עם ma קבועrker. לא להקפיץ או לגעת הקצה של האלקטרודה במהלך תמרון זה. השתמש בר יהלומי כדור עגול מצופה לקדוח חור 1.4 מ"מ בכל סימן. היזהר שלא לצלול דרך הגולגולת לקמרון תוך-גולגולתי עם המקדחה במהירות גבוהה. השתמש במלקחיים מעוקלים לנקב את הדורה פעם אחת הגולגולת כבר קדחה משם. השתמש בר יהלומים מצופים כדור עגול לקדוח חורי 0.7 מ"מ בארבעה מקומות נוספים מאחורי ערכי אלקטרודה למיקום של ברגים בגולגולת. השתמש במברג ידני למקום ארבעה ברגי פלדה 0.8 (קוטר) x 3.2 מ"מ (אורך) נירוסטה לגולגולת, שתיים בכל צד של קו האמצע. חוזקה לאבטח ברגים אלה עד כמחצית אורכם לתוך הגולגולת כי הם התשתית הגדולה שתחזיק את כובע הגולגולת במקום לשבועות ובחודשים הקרובים. בזהירות להכניס את האלקטרודה הראשונה דרך burrhole לתוך המוח לעומק DV מחושב על ידי סיבוב הידית שמנהלת את אופן ידני Z-לתאם שלבעל אלקטרודה. סובב את הכפתור בשיעור שווה פחות או יותר ל1/2 תור לשנייה כדי למנוע נזק מיותר לקצה האלקטרודה. ודא את קצה האלקטרודה לא נוגע בקצה הגרמי של burrhole בעת הזנת המוח. אבטח את האלקטרודה הראשונה באמצעות דבק סופר שכבות מעל burrhole והברגים האחוריים, ואחריו מלט שיניים. ברגע שמבנה זה התייבש לחלוטין, להסיר את האלקטרודה מהמחזיק בה. חזור על תהליך ההחדרה וביסוס לאלקטרודה השנייה. החל מלט שיניים ממש עד קצה העור אך אינו חופף עם העור, כי זה משחרר לטווח ארוך כובע מלט הגולגולת. טיפול לאחר ניתוח מניחים שני כובעי אבק מעל כני אלקטרודה כדי למנוע סתימה. מייד לאחר ההליך, מניח את החולדה בכלוב בבית שלה על כרית חימום בחדרי הניתוח ולבחון עד תודעה והחזרת תנועה ספונטנית. להחזיר את החולדה התאוששה החדר דואר מושבה ולאפשר חמישה ימים עד לתחילת הניסוי. לשקול, לטפל, ולהעריך את המצב הכללי של החולדות יומיות, כולל בדיקת זיהום והערכת רמות התנהגות בעלי החיים, הופעה ופעילות. התייעץ עם וטרינר בעלי החיים המשאבים אם בכלל מתעוררות בעיות ולעקוב אחר כל משטרי טיפול מומלצים. להזריק חיות עם סוכן משכך כאבים (עצירות מ"ג 0.05-1 / sc קילוגרם) לטיפול בכאב סביב ניתוח בהתאם לצורך. דימום תוך גולגולת יכול להיות נפוץ יותר עם השימוש בתרופות לא-סטרואידיות כאב (carprofen, 5 – 10 מ"ג / קילוגרם, sc או ketoprofen, 2 – 5 מ"ג / קילוגרם, sc) כל כך להשתמש עצירות perioperatively לניתוח תוך-גולגולתי. 4. מכשירים אופרנטית השתמש פלסטיק ותאי תניה אופרנטית נירוסטה בתוך מארזים מרככים-קול כדי להפעיל את הניסויים התנהגותיים. תלבושת כל מארז עם מאוורר לספק אוורור וNOI הלבןse להסוות צלילים זרים. השתמש במערכת ממשק תוכנת מחשב והתנהגות אישי לתכנת את הנהלים ולאסוף את נתוני הניסוי. כללי Set-Up לצייד כל תא ניסוי עם שני מנופי תגובה רכובים על קיר אחד של החדר עם אור גירוי הממוקם מעל כל מנוף. תייעד את אחד ממנופי המנוף "הפעיל", כך שהתוצאה היא תוצאה מתוכנת כאשר לחץ. לתכנת אור גירוי ממוקם בדיוק מעל ידית התגובה הפעילה להאיר במהלך כל פגישה אופרנטית, המציין את הזמינות של סמים. יש לי תגובה על תוצאת המנוף הפעילה במשלוח עירוי של מתאמפטמין (0.05 מ"ג / קילוגרם / עירוי ב100 μl 0.9% NaCl) על 2.8 שניות בליווי אור הבית על הקיר ממול קורה במשך 5 שניות ואור הגירוי הולך OFF לזמן קצוב של 30 שניות. רוזן תגובות על המנוף הפעיל אבל צריך אין להם conse מתוכנןquences בתקופת פסק זמן 30-sec. להשלמה, שיא תגובות על המנוף פעיל אבל הם צריכים שום השלכות צפויות. 5. תוך ורידים (IV), מנהל עצמי נוהל מתאמפטמין הכנות כלליות חולדות טען לתאים אופרנטית במהירות ובשלווה ככל האפשר כדי למזער חפצי התנהגות. צרף רצועת אביב נירוסטה לצינורית המדריך על גביו של המכרסם ומסתובב נוזל דליפת הוכחה תלויה מעל התא אופרנטית. להבטיח את השלמות של צינור חיבור ממסתובב למזרק התרופה-20 מיליליטר במשאבה מונע במנוע הממוקם מחוץ למתחם מרכך-הקול. כדי לעשות זאת, לדחוף את צינורות חיבור פלסטיק לפחות רבע של אינץ 'על הקצה מסתובב מתכת וקצה מחט מזרק תרופה עד שלא יהיה להחליק את עם משיכת מתונה. Counter-לאזן את ההרכבה מסתובב ורצועה כדי לאפשר מ 'יחסית מרוסןovement של בעלי החיים. לנהל פגישות אופרנטית בערך באותו הזמן בכל יום בימים שני עד שישי. רְכִישָׁה על מנת להקל רכישה מהירה של ממשל עצמי מתאמפטמין IV, חולדות לרוץ על מפגשים של 6 שעות ביום במשך ארבעה עד חמישה ימים ברציפות. לנהל פגישות אלה על יחס קבוע לוח זמנים FR-1 + 30 שניות של reinforcementduring שחולדות לקבל עירוי אחד מתאמפטמין IV לכל לחיצה על הידית הפעילה ואחרי פסק זמן של 30 שניות (לדוגמא, אין רמז או לתגמל השלכות להתרחש עם לחיצה של שני מנוף). הערה: גישה זו ראשונית ממושכת ו" קלה "תגרום ברוב המכריע של מכרסמים רכישת תרופה משמעותית לוקחת התנהגות בפחות או שווה לשבוע אחד (איור 3). תַחזוּקָה במהלך השבוע של אימונים השני, חולדות לרוץ על מפגשי 2-שעות יומיות הימים שני עד שישי כדי לשמור ולשפר metham IVממשל עצמי phetamine. מפגשי התנהלות בFR-1 + 30 לוח זמנים פסק זמן שניות יחס קבוע של חיזוק. לתעד יציב, אינטנסיבי להגיב כאשר המספר הכולל של מצגות מתאמפטמין על פני כל מפגש משתנה פחות מ -10% לשלושה מפגשים רצופים (איור 4) ואת המספר המצטבר של חליטות על פני 30 דקות הראשונות הוא גדול מהמספר המצטבר של חליטות ב 30 דק 'שני (איור 5). הערה: קריטריון זה מבטיח כי החולדות לפתח דפוס תרופת טעינה בתחילת הפגישה שמצביעה על התנהגות ממכרת 19 ושימוש לא פשוט מזדמן. הודעה-מושב בסוף כל מפגש, לנתק את הרצועה מהגב של המכרסמים. רוקן את הקטטר עם 0.1 מיליליטר של 0.9% תמיסת מלח המכילה 800 IU streptokinase כדי למנוע קרישי דם. הכנס אטם לכל צינורית מדריך כדי למנוע סתימה לפני החזרת rATS לכלובים בבית. בדוק את הפתיחות של הצנתרים מייד לאחר סיומו של כל מפגש ניסיוני בימי רביעי במהלך כל הניסוי. הכן מזרק 3 סמ"ק, עם מחט G 22, המכיל מי מלח bacteriostatic heparinized לבדוק patency קטטר. חבר קצה אחד של פיסת 4 עד 6 אינץ 'ארוכה של צינורות פלסטיק למחט ואת הקצה השני לתפקיד המתכת של ההרכבה קטטר-הצינורית על הגב של החיה. להשרות 0.1-0.2 מיליליטר של תמיסת מלח כדי להבטיח זרימה ברורה ולאחר מכן לצייר את בוכנת המזרק לאחור. אם קטטר הוא פטנט, הוא צריך גם הסומק בקלות ולסגת דם שיהיה גלוי בצינור. לשחרר את הבוכנה ולהחדיר עוד 0.2 מיליליטר כדי לשטוף את כל הדם בחזרה דרך קטטר. אם לא ניתן למשוך דם, ולאחר מכן להסיר את המזרק 3 סמ"ק וצינורות מתפקיד המתכת. הכן מזרק 1 סמ"ק, עם מחט G 22, המכיל נתרן methohexital, מהיר משחקהרדמה, לpatency קטטר בדיקה נוסף. חבר קצה אחד של פיסת 4 עד 6 אינץ 'ארוכה של צינורות פלסטיק למחט ואת הקצה השני לתפקיד המתכת של ההרכבה קטטר-הצינורית על הגב של החיה. להחדיר 1.5 מ"ג ובמהירות להסיר את מזרק 1 סמ"ק וצינורות מתפקיד המתכת על הגב של החיה. חבר מחדש את מזרק 3 סמ"ק מלא מלוח bacteriostatic heparinized ולהחדיר 0.1-0.2 מיליליטר. אם בעל החיים מאבדים את טונוס שרירים בתוך 3 שניות, ולאחר מכן את הצנתר הוא פטנט ופונקציונלי. ראה קובץ נוסף "נפוצים החסרונות" לסעיף מלכודות המתייחס לתופעות לוואי למתאמפטמין, כישלון לרכוש ממשל עצמי מתאמפטמין, וקושי חילוץ חולדה. מכשירי גירוי 6. מוח השתמש 10 עד 12 תיבות plexi זכוכית (12 x 18 x 18 ב) (wxhxd) כדי להפעיל את הניסויים די בי. לכסות כל תיבה בצד החיצוני עם אטום נוקשהנייר שמכסה את הגב וצדדים של התיבה כדי למנוע את החולדות מצפייה או אינטראקציה אחד עם השני. השאר את הלוח הקדמי ברור שנחשף עד הבוחן יכול להציג את בעלי החיים במהלך מפגשי הגירוי. מכסה את החלק העליון של התיבות עם פנל חדיר למחצה שמונע את החולדות לברוח תוך מתן אפשרות לזרימת אוויר. השתמש בלוח זה כדי לתמוך במרכזיות שנמצאות מעל כל תיבה כדי להקל על החיבור החשמלי בין מערכת גירוי כובע ראש המכרסמים ו. השתמש במערכת גירוי שיכול לספק זרם קבוע לבעלי חיים בו זמנית מספר רב של הניסויים די בי. השתמשו במערכת שמורכבת מממשק מעבד / תקשורת אותות דיגיטליים לתכנות למשתמש, ממריץ, סוללה ממריץ, תיבת מפצל ערוץ, והתוכנה הנלווית (ראו גיליון חומרים). להשתמש בכבלים מותאמים אישית באורך להתחבר יציאות הערוץ של ממריץ לכן האלקטרוני מעולה של כל commutatאוֹ. הערה: האורך הדרוש יהיה תלוי במעבדה הפרטית. כבלים אלה הם מחוץ לאזור בעלי החיים ולא צריכים להיות מכוסה באביב נירוסטה. חבר את הכן האלקטרוני הנחות של מחלף לכן האלקטרודה המושתל בכובע לראשו של המכרסם באמצעות 16-בכבלים מכוסים אביב נירוסטה. ודא שהכבלים ארוכים מספיק כדי לאפשר תנועה חופשית לכל אזור של המתחם ללא מתח משמעותי בכובע הראש. הערה: כבל שמסתיים בערך שבו הראש של העכברוש יהיה כאשר עומדים על כל ארבע הרגליים הוא בדרך כלל מספיק. תכנות גירוי המוח השתמש בתוכנת מחשב ותכנות אישית לתכנת את הפרמטרים גירוי (למשל, צורת גל, תדירות, רוחב דופק, עיכוב בין גירוי, משרעת נוכחית) ולאסוף את נתוני הניסוי. שימוש בשפת תכנות ויזואלי, לציין שמתפקד כל מכשיר יבצע לפגוש ההתנסותנקודות קצה נפשיות ושנתונים יאוחסנו ו / או צפויים לצפייה בזמן אמת. פקודות שמפעילות פרויקט המסוים הזה הם הפגינו באיור 1. ציין את התדירות הרצויה, רוחב דופק, ומשרעת ללוח החזותי השליטה (איור 2) לפני תחילת הניסוי. פרמטרים אופייניים לגירוי בתדר גבוה בחולדות דומים לאלה המשמשים בגירוי מוח קליני בבני אדם עמוק: תדר של 130 הרץ to180, רוחב דופק של 60 עד 90 אלפיות שניים, ומשרעת הנוכחית של 100-250 מיקרו-אמפר 4,8-10. הערה: נוכחית נמוך משמש במכרסמים בשל גודלו המופחת בהשוואה לקופים. 7. עמוק גירוי מוח נוהל כדי לטעון חולדות לתוך קופסות, חבר את כבל אביב הנירוסטה מהמחלף לכל הדום אלקטרודה בכובע הראש. בדוק את העכבה של כל אלקטרודה על ידי הפעלת 5 מיקרו-אמפר זרם בתדרשל 1000 הרץ למשך 2 שניות. אם העכבה היא שווה או פחות מ 125 kOhm, ולאחר מכן להמשיך עם הניסוי כי האלקטרודה היא מסוגלת לספק גירוי טיפולי. אם העכבה היא גדול יותר מאשר 125 kOhm, שקול להסיר את החיה מהניסוי כי העמידות הגבוהה של האלקטרודה עשויה לחתוך הנוכחית לרמות שעלולים להיות תת-טיפוליות. הפעל את החולדות באמצעות מפגשים מדומים אחד או שתיים להתרגלות שבמהלכו הם יהיו מחוברים לכבל אלקטרודה (ים), אך לא קיבל כל טיפול פעיל. בדיקת מוק תבטל כל תופעות התנהגותיות שאינם ספציפיות. מייד לאחר כל פגישה מדומה, להעביר את החולדות לתיבות אופרנטית למושב 2-שעה היומית של ממשל עצמי מתאמפטמין IV. חולדות Counter-מאזן לשתי קבוצות, פעיל-גירוי ומחזור דמה-גירוי, כך שצריכת הסמים הבסיס היא לא שונה באופן משמעותי בין קבוצות. בצע הפעלת DBS יומיתים על העוקבה המכרסמים במשך 5 ימים שבמהלכו הם מקבלים או גירוי חשמלי במוח פעיל או לא גירוי למשך 3 שעות בהתאם למשימת הקבוצה שלהם. מייד לאחר כל פגישת DBS, חולדות תחבורה לתיבות אופרנטית למושב 2-שעה היומית של ממשל עצמי מתאמפטמין IV. תצפיות על בעלי חיים בזהירות בלפחות חלק מכל מפגש DBS לוודא הגירוי אינו גורם שינויים ברורים בהתנהגות בעלי חיים. אם כל התנהגויות חריגות מתרחשות במהלך / לאחר גירוי, דואג לתעד את התצפיות הללו. הערה: המחברים לא שמתו לב לשינויים התנהגותיים משמעותיים או שינויים בצריכת מזון / מים במהלך הניסוי המתואר במאמר זה. לשנות את אורכו של טיפול DBS, הפרמטרים החשמליים, ואת הזמן בין פגישת DBS וההפעלה אופרנטית כנדרש בהתאם להשערה.