La determinación de Preferencias ultrasónico Vocalización en ratones utilizando una prueba de reproducción de dos elección

Muchos animales utilizan vocalizaciones para la comunicación intraespecífica. En el ratón Mus musculus, un tipo importante de la señal de comunicación es vocalizaciones ultrasónicas (USVs), que tienen frecuencias superiores a 20 kHz. USVs emitidos por los ratones se consideran un componente de reconocimiento social en hombre-mujer ^1.4, hembra-hembra ^{1, 5 y} macho-macho ^{1, 6} interacciones. USVs también son emitidos por los cachorros cuando están aislados de su madre, lo que aumenta su comportamiento cachorro-recuperación, y por lo tanto PUP supervivencia ^7. Aunque muchos informes han analizado y categorizado USVs ratón ^{8, 9,} las respuestas de comportamiento y mecanismos neurales del animal que recibe se han documentado menos ^{10, 11.} Este último es necesario aclarar el significado biológico de las diversas características de USVs. Para revelar estos mecanismos, el experimento de reproducción es un método eficiente. Estudios recientes han revelado que la reproducción femeninaratones son atraídos a USVs ^12, y que prefieren USVs de machos que son diferentes de sus padres ^{13, 14.}

En este artículo se explica la prueba de reproducción se utiliza para evaluar USV preferencia en ratones. Una caja de prueba de dos elección se desarrolló en el que dos USVs diferentes se pueden reproducir simultáneamente en dos compartimentos de un recinto de ensayo, como se muestra en la Figura 1. Este tipo de caja de prueba evita la contaminación sonora dividiendo el área de prueba en tres sub-cámaras , el uso de paredes de plomo. Los emisores de ultrasonidos se encuentran fuera de cada habitación. En la pared entre las habitaciones y emisores de ultrasonido son agujeros cubiertos con una malla de alambre. Los ratones pueden moverse libremente en las tres habitaciones, y muestran una "búsqueda de la malla" el comportamiento, como para responder a USVs reproducidas por los emisores de ultrasonido. En esta prueba, los ratones se mantienen durante períodos de diferente duración cerca de un emisor de sonido o el otro. Estos parámetros se pueden registrar para obtener un measu sensibles re de la preferencia de sonido.

Para reproducir los USVs espalda, emisores termo-acústico de silicio nanocristalino (es decir, "nc-Si emisor") fueron utilizados como en estudios previos ^15-17. Estos dispositivos se componen de un electrodo de película delgada calentador, una capa de silicio nano-poroso, y una oblea de silicio monocristalino. El archivo de sonido digital se convierte en una señal analógica y después se pasa a través del electrodo calefactor. El dispositivo convierte las señales térmicas dependientes de voltaje resultantes en presión sonora significativa con baja distorsión. Este dispositivo es único en que, a diferencia de los generadores de sonido comunes que dependen de las vibraciones mecánicas, se puede reproducir el sonido sin la necesidad de un diafragma. El emisor presenta un nivel de presión sonora plana en las frecuencias de 20 a 160 kHz (Figura 2), y puede reproducir USVs murinos grabados digitalmente con mucha precisión en cuanto a la duración, la frecuencia y el nivel de presión acústica ^{15, 18, ​​19.}

ve_content "> En un experimento representativo se muestra en la Figura 3, C57BL / 6 (B6) hembras se les permitió elegir entre BALB / c (BALB) USVs masculinos y ruido de fondo. Además, la Figura 4 muestra la elección de las hembras B6 y BALB entre reproducciones USV simultáneas desde un BALB y un macho B6, según ha informado en un estudio previo ^14. Las características de USVs machos difieren entre B6 y BALB cepas ^20. Como se muestra por estos resultados, el atractivo de USVs se puede evaluar con el presente Protocolo, en el que los sonidos se registran de un individuo vivo, acústicamente analizados, y se reproducen a otros individuos.