Determinando Preferências Ultrasonic vocalização em ratos utilizando um teste de reprodução de dois escolha

Muitos animais usam vocalizações para a comunicação intra-específica. No musculus rato Mus, um importante tipo de sinal de comunicação é vocalizações ultra-sônicas (USVs), que têm frequências superiores a 20 kHz. USVs emitidos pelos ratos são considerados um componente de reconhecimento social em masculino-feminino ^1-4, fêmea-fêmea ^{1, 5,} e macho-macho ^{1, 6} interações. USVs também são emitidos por filhotes quando eles são isolados a partir de sua mãe, o que aumenta o seu comportamento de recuperação de cachorro, e, portanto, a sobrevivência dos cachorros ^7. Embora muitos relatórios analisados ​​e categorizados USVs rato ^{8, 9,} as respostas comportamentais e mecanismos neurais do animal que recebeu foram documentados menos ^{10, 11.} O último é necessário clarificar o significado biológico das várias características de USVs. Para revelar destes mecanismos, o experimento de reprodução é um método eficiente. Estudos recentes revelaram que a reprodução femininaratos são atraídos para USVs ^12, e que eles preferem USVs de homens que são diferentes de seus pais ^{13, 14.}

Este artigo explica o ensaio utilizado para avaliar a reprodução preferência USV em ratinhos. Uma caixa de teste de dois escolha foi desenvolvido no qual dois USVs diferentes podem ser reproduzidos simultaneamente em dois compartimentos de uma câmara de ensaio, como se mostra na Figura 1. Este tipo de caixa de teste evita a contaminação do som através da divisão da área de teste em três sub-câmaras , usando paredes de chumbo. Os emissores de ultra-som estão localizados fora cada quarto. Na parede entre os quartos e emissores de ultra-som são buracos cobertos com malha de arame. Ratos podem circular livremente nos três quartos, e mostrar uma "busca da malha" comportamento, como se para responder a USVs reproduzidos pelos emissores de ultra-som. Neste teste, os ratos permanecer por períodos de duração diferente perto de um emissor de som ou de outro. Estes parâmetros podem estar logado para obter uma sensível measu re de preferências de som.

Para reproduzir as USVs volta, silício nanocristalino emissores termo-acústicos (ie, "emissor nc-Si") foram utilizados como em estudos anteriores ^15-17. Estes dispositivos são constituídos por um eléctrodo de película fina aquecedor, uma camada de silício nanoporoso, e uma pastilha de silício monocristalino. O ficheiro de som digital é convertido para um sinal analógico e, em seguida, passado através do aquecedor de eléctrodo. O dispositivo converte os sinais térmicos dependentes da voltagem, resultando em pressão sonora significativa com baixa distorção. Este dispositivo é único na medida em que, ao contrário de geradores de som comuns que dependem de vibrações mecânicas, ele pode reproduzir som sem a necessidade de um diafragma. O emissor apresenta um nível de pressão sonora plana a frequências de 20 a 160 kHz (Figura 2), e pode reproduzir USVs murino gravados digitalmente de forma muito precisa em termos de duração, freqüência e nível de pressão sonora ^{de 15, 18, ​​19.}

ve_content "> Em uma experiência representativa mostrada na Figura 3, C57BL / 6 (B6) fêmeas foram autorizados a escolher entre BALB / c (BALB) USVs macho e ruído de fundo. Além disso, a Figura 4 mostra a escolha das fêmeas B6 e BALB entre playbacks USV simultâneas de um BALB e um macho B6, conforme relatado em um estudo anterior ^14. As características dos USVs masculinos diferem entre B6 e BALB estirpes ^20. Como mostrado por estes resultados, a atratividade de USVs pode ser avaliada com o presente protocolo, em que os sons são gravados a partir de um indivíduo vivo, acústico analisado, e jogou de volta para outros indivíduos.