وراسخة مكوك مربع التعلم في علم الأعصاب السلوكي تجنب. يصف هذا البروتوكول كيف مكوك مربع التعلم في القوارض يمكن الجمع بين مواقع محددة microstimulation الكهربائية intracortical (ICMS) والمزمنة في وقت واحد في تسجيلات فيفو كأداة لدراسة جوانب متعددة من التعلم والإدراك.
التعلم مكوك مربع تجنب هو وسيلة كانت راسخة في علم الأعصاب والتجريبية الاجهزة السلوكية عادة حسب الطلب؛ المعدات اللازمة متوفرة الآن من قبل العديد من الشركات التجارية. يوفر هذا البروتوكول وصفا مفصلا لاتجاهين مكوك مربع تجنب نموذج التعلم في القوارض (الجربوع هنا المنغولية، Meriones unguiculatus) بالاشتراك مع موقع معين microstimulation الكهربائية intracortical (ICMS) ومتزامنة مزمنة الكهربية في الجسم الحي التسجيلات. بروتوكول مفصل ينطبق على دراسة جوانب متعددة من السلوك التعلم والإدراك في أنواع القوارض المختلفة.
يستخدم ICMS موقع معين من الدوائر القشرية السمعية كما المحفزات مكيفة هنا كأداة لاختبار مدى ملاءمة الحسية من وارد معين، صادر والاتصالات intracortical. أنماط التنشيط متميزة يمكن أثار باستخدام مختلف آر التحفيز الكهربائيآيس ل، ICMS التي تعتمد على طبقة المحلية أو المواقع ICMS بعيدة. استخدام التحليل السلوكي الكشف عن إشارة يمكن تحديد أي استراتيجية التحفيز هو الأكثر فعالة للحصول على إشارة للكشف سلوكيا والبارزة. وعلاوة على ذلك، وبالتوازي مع الأقنية تسجيلات باستخدام تصاميم مختلفة القطب (أقطاب السطح، أقطاب العمق، الخ) تسمح للتحقيق المتغيرات الظاهرة العصبية على مدار الساعة من مثل هذه العمليات التعلم. سيتم مناقشته كيف يمكن للتغييرات في التصميم السلوكي يمكن أن تزيد من تعقيد المعرفية (مثل الكشف والتمييز، والتعلم انعكاس).
والهدف الأساسي من علم الأعصاب السلوكي هو إقامة روابط معينة بين خصائص الخلايا العصبية الهيكلية والوظيفية، والتعلم، والإدراك. النشاط العصبي يرتبط الإدراك والتعلم يمكن دراستها عن طريق تسجيل الكهربية من إمكانات العمل والإمكانات الميدانية المحلية في هياكل الدماغ المختلفة في مواقع متعددة. في حين توفر التسجيلات الكهربية الجمعيات المترابطة بين النشاط العصبي والسلوك، وكان microstimulation المباشر الكهربائية intracortical (ICMS) لأكثر من قرن الأسلوب الأكثر مباشرة لعلاقات اختبار السببية السكان متحمس من الخلايا العصبية والآثار السلوكية والإدراكية التي 1-3. وقد أثبتت العديد من الدراسات أن الحيوانات قادرة على الاستفادة من مختلف الخصائص المكانية والزمانية من المحفزات الكهربائية في المهام الإدراكية اعتمادا على موقع التحفيز داخل على سبيل المثال شبكي التوضع 4، رonotopic 5 أو 6 مناطق جسدي التوضع في القشرة. يتم تحديد انتشار النشاط منبهات المسموعة كهربائيا في القشرة أساسا من تخطيط الألياف محور عصبي وزعت التواصل فيما بينها متشابك 2 أنه في القشرة، ومن الواضح 7 التي تعتمد على طبقة. تفعيل متعدد المشابك الناتجة التي حركها ICMS هو أكثر من ذلك بكثير من الآن فصاعدا انتشار واسع من الآثار المباشرة لل2،8،9 مجال كهربائي. وهذا ما يفسر لماذا عتبات الآثار الحسية التي تسببها microstimulation intracortical يمكن أن يكون بقوة 8،10،11 التي تعتمد على طبقة و9 تعتمد على الموقع. أظهرت دراسة أجريت مؤخرا في التفاصيل التي تحفيز الطبقات العليا أسفرت عن أكثر تفعيل واسعة الانتشار من الدوائر corticocortical في طبقات supragranular أساسا، في حين تحفيز الطبقات العميقة من القشرة نتيجة في التنسيق، قشري صادر المتكررة intracolumnar التنشيط. وكشفت التجارب السلوكية موازية أن الأخير لديه أقل بكثير الكشف عبتي الإدراك الحسيesholds 8. لذلك، تم استغلال ميزة خاصة بالموقع ICMS محفزات مشروطة كما هو الحال في تركيبة مع التسجيلات الكهربية لربط سببيا التنشيط الدوائر القشرية محددة 8 إلى التدابير السلوكية في التعلم والإدراك في مربع المكوك.
اتجاهين مكوك مربع النموذج هو جهاز مختبر راسخة لدراسة تجنب التعلم 12. يتكون A-مربع المكوك من 2 المقصورات مفصولة عقبة أو المدخل. A التحفيز (CS) مكيفة الذي يمثله إشارة مناسبة مثل ضوء أو الصوت، ويتبع محتملة من قبل المثير غير الشرطي مكره (US)، كما على سبيل المثال صدمة القدم على أرضية شبكة معدنية. يمكن تعلم المواد الدراسية لتجنب الولايات المتحدة من قبل في رحلات مكوكية من واحد مكوك مربع حجرة إلى أخرى ردا على CS. ينطوي التعلم مكوك مربع سلسلة من مراحل التعلم مميزة 13،14: أولا،موضوعات تعلم للتنبؤ الولايات المتحدة من CS من قبل الإشراط الكلاسيكي وللهروب من الولايات المتحدة عن طريق تكييف فعال، كما يتم إنهاء الولايات المتحدة على مكوكية. في المرحلة المقبلة، والموضوعات تعلم لتجنب الولايات المتحدة تماما من قبل في رحلات مكوكية ردا على CS قبل ظهور الولايات المتحدة (تجنب رد فعل). عموما، التعلم مكوك مربع ويشمل الإشراط الكلاسيكي، تكييف فعال، فضلا عن السلوك الذي توجهه الهدف اعتمادا على المرحلة 14 التعلم.
يمكن تعيين الإجراء مكوك مربع تصل بسهولة وعموما ينتج السلوك قوي بعد بضع جلسات تدريبية يوميا 15-17. بالإضافة إلى تكييف بسيط تجنب (الكشف)، وصندوق المكوك يمكن أن تستخدم أيضا لدراسة التمييز التحفيز عن طريق استخدام نماذج العودة / nogo. هنا، يتم تدريب الحيوانات لتجنب الولايات المتحدة من خلال استجابة مكيفة (CR) (الذهاب السلوك؛ المكوكية إلى حجرة المقابلة) ردا على <قوي> الذهاب التحفيز (CS +) والسلوك nogo (البقاء في مقصورة الحالية، ولا CR) ردا على nogo التحفيز (CS-) microstimulation الموازي وتسجيل النشاط العصبي مع المصفوفات multielectrode ذات الكثافة السكانية العالية تسمح للدراسة. الآليات الفسيولوجية الكامنة وراء تعلم الناجح. العديد من التفاصيل التقنية التي تعتبر أساسية لتركيبات الناجحة للتدريب مكوك مربع، ICMS والكهربية بالتوازي مع ذلك، سيتم مناقشتها.
يصف هذا البروتوكول وسيلة لICMS في مواقع محددة في وقت واحد والتسجيلات الكهربية متعددة القنوات في حيوان التعلم باستخدام مكره القدم صدمة نظام التحكم مكوك مربع في اتجاهين. ويؤكد البروتوكول المفاهيم الأساسية التقنية لمثل هذا الجمع ويشير إلى أهمية التأريض الحيوان فقط عبر ?…
The authors have nothing to disclose.
وأيد العمل من المنح المقدمة من دوتش للبحوث DFG وللمعهد ليبنيز لعلم الأعصاب. نشكر ماريا مارينا Zempeltzi وكاترين OHL للحصول على المساعدة الفنية.
Teflon-insulated stainless steel wire | California Fine Wire | diam. 50µm w/ isolation | |
Pin connector system | Molex Holding GmbH | 510470200 | 1.25 mm pitch PicoBlade |
TEM grid Quantifoil | Science Services | EQ225-N27 | |
Dental acrylic Paladur | Heraeus Kulzer | 64707938 | |
Hand-held drill OmniDrill35 | WPI | 503599 | |
Ketamine 500mg/10ml | Ratiopharm GmbH | 7538837 | |
Rompun 2%, 25ml | Bayer Vital GmbH | 5066.0 | |
Sodium-Chloride 0.9%, 10ml | B.Braun AG | PRID00000772 | |
Lubricant KY-Jelly | Johnson & Johnson | ||
Shuttle-box E10-E15 | Coulbourn Instruments | H10-11M-SC | |
Stimulus generator MCS STG 2000 | Multichannel Systems | ||
Plexon Headstage cable 32V-G20 | Plexon Inc. | HSC/32v-G20 | |
Plexon Headstage 32V-G20 | Plexon Inc. | HST/32v-G20 | |
PBX preamplifier 32 channels | Plexon Inc. | 32PBX box | |
Multichannel Acquisition System | Plexon Inc. | MAP 32/HLK2 | |
Cryostate CM3050 S | Leica Microsystems GmbH | ||
Signal processing Card Ni-Daq | National Instruments | ||
Lab StandardTM Stereotaxic Instruments | Stoelting Co. | ||
Audio attenator g.pah | g.pah Guger technologies | ||
Cresyl violet acetate | Roth GmbH | 7651.2 | |
Roticlear | Roth GmbH | A538.1 | |
Sodium acetate trihydrate | Roth GmbH | 6779.1 | |
Potassium hexacyanoferrat(II) trihydrate | Roth GmbH | 7974.2 | |
Di-sodium hydrogen phospahte dihydrate | Merck | 1,065,801,000 | |
ICM Impedance Conditioning Module | FHC | 55-70-0 | |
Animal Temperarture Controler | World Precision Instruments | ATC2000 |