神経性食欲不振症の神経生物学的基礎を研究する活動ベースの食欲不振齧歯類モデルを用いました

このプロトコルで説明されているすべての手順は、ニューヨーク大学の施設内動物管理使用委員会（動物福祉保証＃A3317-01）に従っています。 注：このプロトコルは、思春期の女性のC57BL / 6マウスに最適化されています。動物は、50％±10％で72℃±2℃で室温を維持し、部屋の湿度施設に収容しました。ルームライトは、毎日午後7時まで午前7時からオン。 ホイールを実行するとケージの調製離れて水と足のトラフィックを実行してから、動物保持室の安全なエリアにコンピュータとUSBインタフェースハブを設定しますが、送信機の無線範囲内にあるとケージラックに十分に近いです。コンピュータとUSBインターフェースハブの両方が壁のコンセントから電力を受け取る、及びUSBインタフェースハブがUSBケーブルを介してコンピュータに接続していることを確認してください。コンピュータとUSBハブの両方に電力を供給するために、電力バックアップデバイスを使用してください。 コンピュータのトンを接続しますO USBケーブルを使ってUSBインタフェースハブは、走行輪の機器に含まれています。 コンピュータを起動し、アイコンをダブルクリックして実行中のホイールソフトウェアを起動します。 走行輪のそれぞれのベースに単四電池3本を取り付け、ホイールマネージャソフトウェアは、送信機を認識していることを確認します。見出しの下にプログラムウィンドウに各車輪の一覧を表示し、「ホイールセンサー。」 実験の特定の仕様に応じてデータ収集の構成を設定します。 寝具、nestlets、水に自由にアクセスし、ランニングホイールで各マウスの件名のためのケージを準備します。一般的に、8匹のマウスは、神経解剖学の研究のための実験ごとに使用されています。より多くのマウスが十分な統計的検出力を確保するために、行動研究のために必要とされ得ます。 ランニングホイールがケージの壁、食品バスケット、もしくはケージ上部に触れることなく、自由に移動することが可能であることを確認してください。数回、各ホイールを回して、そのトンを確認彼のソフトウェアは、各車輪の車輪数を更新しています。 2.順化フェーズ走行輪とケージに個別に、各マウスの件名（年齢P36メスC57BL / 6マウス）を配置します。 食品ホッパーに乾燥食品（約100グラム）の予め秤量した量を追加し、予め計量したフルコンテナケージ内のウェットフード（約50グラム）を配置。 プログラムウィンドウで、[ファイル]メニューの「取得開始」オプションを選択することで、ホイール活動データ収集とデータ保存を開始します。データが保存先ディレクトリを選択してください。実験を手動で停止するまでソフトウェアは、継続的に車輪の回転数を記録します。 ライトが部屋にオフにされた時刻に毎日動物、ウェットフード、および乾燥食品を計量。重量は50グラムを下回った場合は乾燥食品を補充し、食品が乾燥や布団で汚れ濡れた場合は食品容器を交換してください。手動でおしっこを記録Lは、デジタルデータの損失の場合には、同様にこの時点で毎日カウント。 3.以降食事制限食事制限の最初の日の正午（または部屋の照明をオフにするようにスケジュールされている7時間前）でケージからすべてのウェットとドライの食品を削除します。 同じ日に、暗サイクルの開始時に、動物の体重とホイール数を記録します。食品ホッパーに乾燥食品（約50グラム）の予め秤量した量と計量ボートでケージにウェットフード（約5グラム）の予め秤量した量を置きます。 各動物のための寝具やnestlets新鮮なケージを準備します。 2時間後、準備された新鮮なケージに走行輪を転送します。このケージの変更は、いくつかの食品くずが落ちたか寝具に退蔵された場合に動物は、次の給紙時まで制限食のままであることを保証します。ケージの変化のストレスを低減するために、汚れた二握り（約500 ml）を加えます古いケージから寝具、新しいケージに動物を移動します。 食べた食物の量を決定するために、残りのウェットとドライ食品の重量を記録します。食品アクセス期間の終了時に車輪の数を記録します。 4.食事制限中にアニマルヘルスの監視毎日、暗サイクルの開始時に、動物の体重とホイール数を記録します。ケージにドライとウェットフードの予め秤量した量を置きます。 動物の体重は、食事制限の前に彼らの最初の体重の75％を下回ると、実験から削除します。 注：過度の飢餓の他の適応症は、猫背の姿勢とケージ内を移動することができないことがあります。動物は、タッチに寒くなると食品へのアクセスの2時間の間に食べるように失敗することがあります。 各動物のための寝具やnestlets新鮮なケージを準備します。 2時間後、準備された新鮮なケージに走行輪を転送します。 TWを追加O古いケージから汚れた寝具の握り（約500ミリリットル）、および新しいケージに動物を移動します。 食べた食物の量を決定するために、残りのウェットとドライ食品の重量を記録します。食品アクセス期間の終了時に車輪の数を記録します。 5.実験の終了食事制限の3日後に、ABAの実験を終了します。脳組織の収集のために動物を安楽死させる、または動物が追加の行動試験を受ける前に回復することができます。 プログラムウィンドウの[ファイル]メニューの下の「エンド取得」オプションをクリックします。 ケージから走行輪を外し、ホイールベースから電池を取り外してください。 動物が回復することを可能にした場合、食品ホッパーに乾燥食品の予め秤量した量を返し、回復中の食品に動物随意アクセスを許可します。 6.データ解析セーブ実験の開始時に選択したディレクトリにある.wlsファイル内の実験のためのLLホイールデータ。 ファイルメニューの「エクスポート」オプションを選択して、スプレッドシートにデータをエクスポートします。 「ソースデータファイル」オプションで.wls希望のファイルを選択します。開始日時と終了日時を選択し、ホイールセンサーリストの輸出のための各車輪センサーを選択します。