Bir Robotik Sıvı İşleme Sisteminin Kullanılması Ölçeklenebilir 96-iyi iPSC Kültür Bazlı Plaka ve Üretim

Bir tabak tabanlı robot kök hücre kültürü platformunun geliştirilmesi. iPSCs talebi nedeniyle ilaç geliştirme ve rejeneratif tıpta kendi programı büyüyor. Yine ölçeklenebilir üretim birçok araştırmacı dışlar ve kurulan yapışık kültür yöntemleri ayrıldığı nispeten karmaşık ekipman süspansiyon kültürü 32 odaklanmıştır. Aksine büyük ölçüde böyle bir süspansiyon kültürü geçiş veya mikrotaşıyıcı kullanılması gibi kanıtlanmış plaka bazlı kök hücre kültürü yöntemleri, değiştirmek yerine, miniaturizing ve mevcut yapışık iPSC kültürü teknikleri otomasyona üzerinde duruldu. İlk amaç besleyen ve tüm kültür süreci normalleştirmek için Pasajlanması otomatik oldu. Mevcut teknoloji ile hızlı ölçek kadar yetenekli bir platform da gerekli oldu. Otomatik bir sıvı taşıma sistemi (Şekil 1) kullanılarak, bir 96-çukurlu plaka içindeki bir yöntem olup, kültür kök hücreleri geliştirildi, bu amaçlara ulaşmak için. protbeslenme ve geçişi için sıvı taşıma robotu burada geliştirilen ocols bir teknisyen tarafından bir santrifüj adımı veya sürekli izleme gerekmez. Bu protokoller iki besleyici ücretsiz iPSC hatları ile geliştirilmiştir; fibroblastlardan alınan bir ve adipoz hücrelerinin 33 diğer. Bilgisayar kontrollü bir sıvı taşıma sistemi (Şekil 1A) ön ve arka hareket eden bir düz yatak oluşmaktadır. Yatakta standart hücre kültürü plakaları, sıvı rezervuarları ve diğer özel donanım kabul klipleri istinat basıncı dokuz, yaklaşık 5 x 3.3 inç numaralı girintiler vardır. sağa (yatak hareketine dik) yanı sıra yukarı ve aşağı sol pipet kafa hareket eder. Birlikte yatak, pipet kafası kaldırmak veya doldurulabilir raftan pipet uçları toplayıp sonra herhangi bir yere yatağa medya sunmak için programlanabilir. Gerekirse, 96 oyuktan her biri çapraz kirlenmeyi elimine etmek için, ayrı tutulabilir. Bu konfigürasyonda, 0Ortam 200 ul pipet başın her ucu tarafından hareket ettirilebilir, ancak diğer hacim aralıkları, ucu boyutuna göre mümkündür. Standart plakalar, enzimatik ya da kimyasal ayrışma kök hücreleri pasaj zaman, tipik olarak 37 ° C 'de inkübasyon gerektirmektedir. Başlangıç ​​testi, bir proteolitik ve kolajenolitik ayrışma reaktif ya da iki 96-yuvalı iPSC hatları için üretilen koloni boyutu ayrışması ve homojen olana dek bir süre için, oda sıcaklığında hem de daha 37 ° C de daha iyi bir performans EDTA esaslı bir reaktif ile ayrışma teyit (veriler gösterilmemiştir). Bölünmüş işlemi otomatik ve ve kabul bir inkübatör, eğimli, sıcaklık kontrollü rampaların üzerinden plakaları hareket önlemek ve tekrarlanabilir standart kültür plakaları (Şekil 1A) inşa edildi konumlandırmak için. Rampaları 37 ° C, bir proteolitik ve kolajenolitik ayrışma reaktif ya da 96 oyuklu plakalar ile iPSCs EDTA göre ayrışma ısıtıldı zaman 37 ° C inkübatör (veriler n yerleştirilmiş plakalar karşılaştırılabilirot) gösterilen. eğimli rampalar, aynı zamanda elde edilen, yaklaşık 10-15 ul bir artık hacim kalan düz bir plakadan aspirasyon ise oyuk en düşük noktasına ulaşmadan bütün bir kuyunun içeriğini (en az 5 uL artık hacim) toplamak için pipet uçları etkinleştirmek için kullanılmıştır Hücre kaybı. eğimli rampa da kuyular yıkanmış (toz haline getirildi) iyi eğimli üstündeki medya püskürtülmesi yoluyla ve altta toplamak için izin verdi. 96 gözlü plaka formatında kök hücrelerin Robotik kültürü; beslenme ve Pasajlanması. Robotik sıvı taşıma sistemi kullanılarak iPSCs Kültür iki aşaması vardır; geçit ve beslenme. Bir koloni geçişi için hazır olduğu zaman, tekrar geçit hazır (Şekil 1B) kadar eşit aralıklarla beslenir yeni bir levha tohum için önceden tespit edilmiş bir oranda bölünür. Dondurulmuş ya da olmayan 96 oyuklu kültür 96 oyuklu bir formatta başladı ve hemen geçişi / besleme butonu edilebilirdöngüsü. Bir plaka çoğunluğu koloni korumak için kullanılmayan hücreler, diğer kullanımlar için hasat ve bu sistemin üretim bileşenini temsil eder. Ortamın bir kısmı ya da her bir kültür süresinden sonra çıkarıldı ve bir atık haznesi yatırılır 96 oyuklu kültür iPSCs Besleme başarılı olduğunu. Sonra taze medya aynı plakaya aliquoted edilir. Robot, yeni medya ile klimalı ortam karıştırma dahil tamamen özelleştirilebilir beslenme için de her ayırmak için yeni ipuçları ve medya olukları kullanabilirsiniz. Kök hücrelerin tipik geçişi ayrışma ve genellikle bir santrifüjleme adımı için bir yöntem gereklidir. Burada anlatılan protokoller ayrışma normalleştirmek ve santrifüj ortadan kaldırmaya yöneliktir. Robot 37 ° C eğimli rampalar monte 96 oyuklu plakalara ayrılma reaktif veriyorsa kanalı protokolü başlar. Önceden ayarlanmış bir süre sonra, ayrışmış hücreler kullanıcı contro sahip bir yıkama hareketi ile toplanırpozisyon tekrarı, ses ve toz haline getirme oranı üzerinden l. Enzim zaman, öğütme hızı ve öğütme tekrar sayısı ayrışmış koloni boyutu ve homojenlik (Şekil 2) değiştirmek için yeterli, ama her bir parametre, belirli bir hücre hattı gereksinimlerine uyacak şekilde ayarlanabilir. Bu kontrol değişen oranlarda, pozisyonları ve tekrarlı pipetlemeyin teknisyenler tarafından tanıtıldı değişkenliği ortadan kaldırır. Ayrışan hücreler toplanmış ve taze ortam ile bir rezervuarda toplanmış sonra, yeni bir plakaya dağıtılmıştır. Alt-tabaka bozulması veya işlem enzim bağlı hücre ölümünden, santrifüjleme ve tohumlama sorunlarını önlemek için çözülme reaktifi güvenilir bir tohumlama ile sonuçlanmıştır olarak kabul edilebilir bir ayrışma minimum noktasına seyreltildi. Bu teknik, temel-8 35 gibi, aynı zamanda, düşük bir protein ortam içinde etkili olan bir görece protein yüksek içeriğine sahip mTeSR1 ortamı 34 bir proteolitik ve kolajenolitik ayrılma reaktifi, etkili, ancak </sup>, bu sistem ile uyumlu olan, her ikisi de (E8 veriler gösterilmemiştir). Geçtikten sonra kök hücrelerin ekim yoğunluğu kontrol eden rutin ve başarılı kök hücre kültürüne için her şeyden önemlidir. Çok düşük ya da yüksek tohumlama ektopik farklılaşma ve düzensiz geçiş aralıkları neden yanında pluripotensin kaybına neden olabilir. (: 6 parçalı, 1), 6 gözlü bir plakanın bir de tamamen yeni bir 6-yuvalı plaka tohum için kullanıldığında tipik kök hücre kültürü oranı bölme dayanır. Sıvı taşıma robotu ile bu oran kullanıcının ihtiyaçlarına göre ayarlanabilir (örneğin, 1: 6, 1: 9, 01:12, vs.) ve geçit aralığına en büyük etkiye sahiptir. Robot ampirik olarak tespit edilmelidir kullanıcının ihtiyaçlarına bağlı olarak daha az bir sütun, tek tüm sütunu (8 kuyu), ya da birden fazla sütunu toplayabilir. 01:12 bölmek zaman adipoz ve fibroblast türevli iPSCs dördüncü gününde geçişi ile düzenli üç günlük beslenme programını devam. Bu durumda, bir sütun hasat edildi ve her bir döngü (Şekil 3A) ile 01:12 bölünmüş oluşturma, yeni bir 96 oyuklu plaka tohum kullanıldı. Kalan 11 kuyu downstream uygulamalar için daha sonra kullanılabilir. Bu 11 üretim kuyuları hasat etmek için, geçiş kuralı hücreleri toplanması için bir çukur içine çökelmiş haricinde tekrarlanmıştır. Seçenek olarak ise, hücreler plaka üzerinde bırakılabilir ve direkt olarak kullanıldı. Rutin bölme takvimi saymadan geçişi tutarlı ekim yoğunluğu geçişini sağlamak ve korumak için, bizim protokoller koloni geçişi için ideal yoğunlukta olduğu sütun aynı önceden belirlenmiş sayıda bölme için arayın. Kullanıcıların geçişi için uygun yoğunluk belirlemenize yardımcı olmak için, görüntüleri bir dizi vurgulanan ideal geçiş yoğunluğu (Şekil 3B) ile yoğunluklarının bir dizi gösteren üretilmiştir. Geçit, bir teknisyen kendi plaka inceler ve yoğunluk görüntü ölçeğine karşılaştırır belirlemek için. Fikirgeçide l yoğunluğu adipoz ve fibroblast türevli iPSCs kültüründen tespit ve en kolonilerin arasındaki alan, bitişik koloni çapı yaklaşık% 25 olduğu zaman olduğu bulunmuştur. Bu koloniler homojen dağıtılmış olması önemlidir. Ilave bir besleme döngüsü ektopik farklılaşması için bir tetikleyici olan temas koloniler neden olur, çünkü, koloni ayırma Bu miktar arzu edilen maksimum yoğunluğu ile bağıntılıdır. Burada geliştirilen gerekli protokolü, 96 oyuklu bir formatta bir başlangıç ​​kültürü olarak nasıl bir yoğunluğa sorun sonra bir kültür sıfırlamak için nasıl ele almaktadır. Yeni bir kültür başlatıldığında, Pasajlanması önce en iyi ekim yoğunluğu ve besleme döngüsü sayısı bilinmemektedir. Tohumlama sonra kullanılabilir bir yoğunluk sağlamak için, robot, bir seri seyreltme (Şekil 4A), bir 96 oyuklu plaka üzerinde mevcut veya çözülmüş hücreleri dağıtır. Böyle bir gradyan Örnek sonuçlar Şekil 4B-E'de gösterilmiştir. Birkaç beslenme sonrasıdöngüleri, bazı sütunlar bir teknisyen düzenli kültürünü başlatmak için üniform seyreltilmiş plaka tohum robot kullanan hangi noktada bölmek için ideal bir yoğunluk, yaklaşım. Bu yoğunluk gradyan protokolü de düzensiz bir plaka düzenli geçiş aralıkları ve koloni homojenliği geri kullanıldı. Geçit gecikmiş veya cevapsız ise geçit çok erken ise, koloni yoğunluğu çok düşük olduğu ve bireysel koloniler eşit iyi dağılmış olmadan çok büyük hale gelebilir, oysa koloni yoğunluğu ve boyutu çok yüksek olur. yoğunluk gradyan protokolü bu sorunları çözer ve kullanıcı kuyuların bir ideal olarak seribaşı kümesi seçerek yeniden sağlar. İki iPSC hatları robotik kültürün 3 ay sonra pluripotent kaldı. Kök hücre pluripotensin Bakım olumsuz kültür koşulları 36,37 etkilenebilir. Adipoz ve fibroblast iPSC hatları (sırasıyla a-iPSC, K-iPSC) plurip muhafaza edilen olmadığını değerlendirmekotency, iki hat 3 ay boyunca, yukarıda tarif edilen ve daha sonra pluripotense belirteçler ele alınan robot taşıma sıvıya kültive edildiğinde, robotik uzun bir süre için 96 oyuklu plakalar içerisinde kültürlendi. Bu dönem için her iki satır santrifüj olmadan bir proteolitik ve kolajenolitik ayrışma reaktif ile 20'den fazla kez geçirilmiştir. SSEA-4 hücre yüzey (Şekil 5A-L) üzerine gözlenmediğini Oct4 ve Nanog'un lekeli a-IPSC f-iPSC hatları Sabit 96 oyuklu plakalar bu markerlerin nükleer birikimi görüldü. 41 – Bu pluripotent iPSCs 38 önceki raporlar ile uyumludur. DAPI ile karşıt da üç Pluripotency belirteçlerinin pozitif değildi herhangi bir ek hücreleri ortaya koymamıştır. Kromozom anormallikleri kök hücre kültürü 42,43 gözlenen ancak Şekil 5A-L gösterilenler gibi Pluripotency belirteçlerinin dağılımını etkilemeyebilir. Karyotype analizi hem robot geçişli iPSC hatları robotik kültür yöntemi normalde (Şekil 5M-N) oluşabilir ötesinde kromozomal istikrarsızlık tanıtmak değildi düşündüren, 46 normal kromozomlar vardı gösterdi. Kurulan kök hücre gen ekspresyonu robotik kültürlenmiş iPSC hatlarında 1,41,44,45 işaretleyicileri prob için, toplam RNA, boyama paralel olan ve karyotipleme toplanmıştır. Her ikisi de 96-plaka iPSC hatları her satırın ayırt kardiyomiyositler vermedi oysa Pluripotency belirteçlerinin Nanog, POU5F1 ve Rex1 benzer bir ifade vardı, ne de (HDF'ler) (Şekil 6) insan dermal fibroblastların ayrı bir hat yaptık. her iki hattan elde edilen kardiyomiyositler MYL7 HDF'ler ise pozitif ve kök hücre MYL7 ifade vermedi. İkisi de iPSC hatları, küçük molekül ile kardiyomiyositlere ayırt edildi, Wnt yolunun manipülasyon tekniği 46 geçenlerde açıklanan </sup>. Lekeli zaman her iki hattan gelen kardiyomiyositler cTnT net sarkomer oluşumu (Şekil 7) ile pozitif bulunmuştur. 96 oyuklu bir formatta kardiyomiyositlere farklılaşma kuyu% 80'den fazla başarılı oldu (veriler gösterilmemiştir). Birlikte, bu veriler, 3 ay ve robot kültür 20'den fazla geçit kardiyomiyositlere da farklılaşma yeteneğine sahip olan pluripotensin ile uyumlu bir transkripsiyon programı gösteren kromozomal normal hücreleri ile sonuçlanmıştır göstermektedir. Şekil robotik kök hücre kültürü ekipman ve tipik iPSC kültürü rutin 1. Genel Bakış. Için tipik bir yatak düzeni ile gösterilir (A) Robotik sıvı taşıma sistemi 96 oyuklu hücre kültürü kaynaklanıyor. Yeni steril pipet uçları (ipuçları), çıkarılabilir uç çöp konteyneri (Atık), multi-de otoklavlanabilen çukur gerekli tutun sıvı reaktifler (Sıvılar), 96-kuyu plakalar konumlandırılmış bir d kontrollü bir sıcaklığa desteklenen eğimli rampa (96 kuyu plakalar), sağ / sol ve yukarı / aşağı (Pipet kafa) hareket 8 kanallı robot pipet kafası. Plaka kapağı tutan raf (PLHR). Aşağıdaki tabloda gösterilmiştir Yatak pozisyon sayıları. Besleme ve Passage: (B) Robotik iPSC kültürü iki aşaması vardır. Bir koloni plaka geçişine hazır olduğunda hücre üretimi döngüsü başlar. Kullanıcı de geçit istenen oranını seçer ve robot tohumlar 96 oyuklu plakalar, yeni bir grubu daha sonra tekrar geçmesi için hazır olana kadar düzenli aralıklarla beslenir. Plakalar geçişi için hazır olduğu zaman, her bir plakanın en sonraki koloni plakaları tohum için kullanılmaz ve bu nedenle sistem, üretim fazı temsil eden, diğer kullanımlar için kullanılabilir. Dondurulmuş veya mevcut hücre hatları her zaman tanıttı ve yem / geçiş döngüsünde muhafaza edilebilir. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız. hep ">:" keep-together.within-page = fo "e_content Şekil 2,. Robotik sıvı kullanım parametreleri iPSC koloni ayrılma özelliklerini kontrol etmek için de kullanılabilir. Her bir Örnek görüntü hala 96-kuyu içinde süspansiyon haline getirilmiş iken, fibroblast türevli iPSCs belirtilen tedaviden sonra ayrışmış gösterir. (Üst Satır, A – C) Enzim Zaman, hiçbir öğütme. 96-çukurlu tablalarda büyütülmüştür Fibroblast kaynaklı iPSCs uygulandı proteolitik ve kolajenolitik ayrışma reaktif ayrılma ve bir robot toz haline süreleri artan tabi tutuldu. (Orta Row, D – F) toz haline getirilmesi oranı 3 dakika enzim. Hücreler, proteolitik ve kolajenolitik ayrışma reaktif tedavi üç dakika maruz bırakıldı ve daha sonra 175 ul büyüme ortamı uygulandı ve her bir oyuğa, belirtilen hızda yukarı ve aşağı bir kez pipetle. ul / sn = mikrolitre Per ikinci. (Alt Satır, G – I) toz haline getirilmesi tekrarlar, 3 dakika enzim, 160 ul / sn. Hücreler 3 dakika proteolitik ve kolajenolitik ayrışma ayıracı maruz bırakıldı, 175 ul büyüme ortamı daha sonra 160 ul / tekrarlama belirtilen sayıda sn öğütüldü, uygulanmıştır. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız. Geçit düzenli bir beslenme / geçit döngüsünü sürdürmek için zaman Şekil 3. Tipik yağ ve fibroblast iPSC koloni bakımı şeması ve koloni yoğunluğu görüntüleri bir dizi belirlemek için. (A) adipoz veya geçide fibroblast 96-iyi iPSC koloni hazır başlayarak, hücrelerin bir sütun santrifüj lenmeden robot üzerinde geçirildi ve seyreltilmişPlaka tekrar geçit hazır olana kadar bundan sonra belirli aralıklarla beslenen edildi 12 yeni sütunlar. Hücre üretimi için, koloni sağlamak için kullanılmayan sütun geçirilmiş ve daha sonraki kullanım için toplanır. Sütun Herhangi bir sayıda genişleme hızını kontrol etmek geçişli olabilir. Geçit, yoğunluk görüntüleri bir dizi, her 24 saat kullanıcılara sağlanan yakaladığı zaman (B) belirlenmesi. Üst kırmızı kutusunda (ilk tohumlama sonrası 72 saat içinde) koloni geçişi için yeterince yoğun olmadığı ve beslenmelidir. Yoğunluğu (~ 96 saatte) yeşil kutuda gösterilen eşleştiğinde, koloni geçişi için ideal bir yoğunlukta olduğunu. 120 saat ile, koloni geçişi için çok yoğun ve bu senaryo kaçınılmalıdır. İkincisi kesinlikle önerilmez bu yoğunlukta bir ekim yoğunluğu degrade ama rutin kültürü ile çözülebilir. Beyaz çubuk 200 mcM eşittir. Daha büyük bir Versi görmek için buraya tıklayınızbu rakamın üzerinde. Şekil 4. 96-iyi robotik kültür sistemi kullanıcıları donmuş veya aktif hücre hatları kültürleri başlatmak ve tohum degrade gerçekleştirmek için olanak sağlar. (A) hücre çözümü donmuş hücre stoktan veya aktif kültür hasat sonrası kullanıcı tarafından hazırlanan ve yerleştirilir robot. robot sistemi daha sonra bir sütun tarafından dağıtılan yoğunluk gradyanı ile 96 oyuklu plaka boyunca başlangıç ​​hücre çözeltisi dağıtmak için bir seri seyreltme protokolü gerçekleştirir. (B – E) A oniki sütun dört hücre yoğunluğu örnekleri, yoğunluk gradyan tohumlama protokolü sonra 48 saat. Beyaz çizgiler 225 mikron eşit. Bu büyük halini görmek için tıklayınızrakam. . Şekil 5. pluripotensin 22 (yağ) ya da 23 (fibroblast) geçitler (~ 3 ay) boyunca 96 oyuklu robotik kültür sırasında adipoz ve iPSC hatları türetilmiş fibroblast için muhafaza edilmektedir (A – M) Yağ ve fibroblast türevli iPSC hücre çizgileri robotik edildi beslenen ve geçişli daha sonra sabit ve DAPI karşıt olan pluripotense belirteçleri Oct4, Nanog veya Ssea4 lekeli 22 veya 23 geçişleri için 96-yuvalı plakalar içinde santrifüj olmayan metinde anlatıldığı gibi. Beyaz çubuk, 100 mikron eşittir. (M – N). A tarif edilen 46 kromozom normal tamamlayıcı ortaya karyotip analizi için sunuldu paralel kültürleri daha büyük bir versiyonu o görmek için buraya tıklayınızBu rakam f. Şekil 6. Yağ (96-A) ve fibroblast (96-F) elde edilen iPSCs pluripotense gen ekspresyonunu muhafaza 96 oyuklu robotik biçiminde 20 pasajdan fazla kültürlendi ve kardiyomiyositlerde ayrışmıştır. Toplam mRNA, her iki robot tarafından kültürlenmiş iPSC hatlarından özütlendi kardiyomiyositlerde her iki hattan ayırt yanı sıra, (Cm-A = adipoz iPSC türetilmiş kardiyomiyositlerde, CM-F = fibroblast iPSC 14 gün diferansiyasyon indüksiyonuna sonra toplanan, kardiyomiyositlerde türetilmiştir) ve pluripotense belirteçleri Nanog, POU5F1, Rex1 araştırmak için RT-PCR için kullanılan Kardiyomiyosit işaretleyici MYL7 ve yükleme kontrol GAPDH. İnsan dermal fibroblastları (HDF), aynı zamanda toplandı ve olmayan iPSC olmayan kardiyomiyosit kontrol olarak kullanılmıştır. tıklayın Burada bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için. . Şekil 7. Fibroblast ve adipoz türetilmiş iPSCs oyuklu 96 uzun vadede robotik kültürü sonra kardiyomiyosit ayırt yeteneğini muhafaza (A – H) Yağ ve fibroblast iPSCs kardiyomiyositlere farklılaştırılmıştır 20 pasajdan fazla 96 oyuklu robotik biçimde kültürlenmiştir . 14 gün farklılaşma indüksiyon sonrası, 96-plaka bağlı kardiyomiyositler ayrışmış ve troponin T (kırmızı), F-aktin (yeşil) ve çekirdekleri (mavi) immün için cam slaytlar üzerine düşük yoğunlukta kaplandı. Bir görmek için buraya tıklayınız Bu rakamın büyük bir sürümü. p_upload / 52755 / 52755fig8.jpg "/> Şekil 8. 96-plaka kök hücre kültürü büyütülmesi. Kök hücre üretimi kadar Ölçek plakaların sonraki grup tohum için kullanılan plakaların sayısına bağlıdır. Kullanıcı ya her bölünmüş fırsatta plakaların aynı sayıda Pasajlanması tek üretim seviyesini korumak veya daha fazla tabak tohumlama yoluyla üretimini genişletebilirsiniz. Örneğin, döngü 0, tek bir 96-deney levhası, bir 12 kat genleşme yaratarak, on iki yeni plakalara (Döngü 1) geçişli edilir. On iki levha bir ilâ on iki levha (2 Döngü 1) 'in bir dizi yeni için geçişli veya daha çok tabakayı (3 Döngü 2) Pasajlanması genleştirilir, bu oran muhafaza edilebilir. Geçiş sırasında, koloni korumak için kullanılan herhangi bir levha downstream uygulamalar için kullanılabilir. Bu nedenle, rutin 12 tabak Pasajlanması iki pasajlar gibi birçok 144 olarak plakaları elde olabilir: koloni bakımı için 12 ve 132 diğer kullanımlar için."> Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız. Hücre üretimi için 96 oyuklu plaka bazlı kültür Şekil 9. verimliliği büyük ölçüde el ekimi aşmaktadır. Şekil 8'de belirtildiği gibi, tek bir plaka daha sonra 144 plakalara geçişli olabilir on iki tabak, tohum geçişli olabilir. Bu genişleme oranı, iki bölme fırsatların elde edilebilir. Bir teknisyen bunlar mikroskop incelemek ve robot üzerine yerleştirmek için bir 96 oyuklu plaka ile yaklaşık 30 saniye harcama ise, bir 6-yuvalı plaka beslemek için yaklaşık 3.5 dakika sürer. Teknisyen 144 plakaları taşıyan, onlar beslemek için özel 8 saat gerektirir manuel kültürü ise robot ile beslerken. Yaklaşık 1.2 saat işleme plakaları geçirecek v için tıklayınızBu rakamın büyük bir sürümünü iew.